5. Expanding the toolbox of single-

5. Expanding the toolbox of single-molecule calibrated FRETbased
tension sensors
Even though the described tension sensors (TSMod, HP35 and
HP35st; Fig. 3) cover much of the force range that is thought to
be relevant for the regulation of many intracellular processes
(Cost et al., 2015), modules sensitive to even higher forces will be
necessary to define how much force distinct molecules are able to
sustain in cells. Certain integrin receptors, for instance, have been
reported to experience mechanical forces of more than 40 pN during
cell adhesion (Roein-Peikar et al., 2016; Wang and Ha, 2013)
and molecules within cell–cell adhesion structures may bear similarly
high loads when external stresses are acutely applied. One of
the future challenges will therefore be engineering suitable sensor
peptides that push the detectable force range beyond 10–12 pN.
Five requirements for such force sensing elements have to be considered:
(1) a small N- to C-terminal distance in the folded state
to ensure high FRET efficiency at zero force, (2) a sufficient length
increase in response to mechanical loads that leads to a significant
drop in FRET accompanied by (3) a large enough change in folding
free energy, (4) fast folding kinetics, and (5) loading rate insensitivity.
While varying changes in peptide length and folding free energy
have predictable consequences on tension sensor sensitivity, it will
be challenging to engineer high-force sensing peptides that are
loading rate independent and undergo hysteresis-free refolding
when forces subside. An alternative may be using sensor peptides
that do not undergo an equilibrium folding/unfolding transition
but unfold at a distinct force threshold and therefore indicate
whether a certain protein has been experiencing mechanical loads
for a critical amount of time.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5. Expanding the toolbox of single-molecule calibrated FRETbasedtension sensorsEven though the described tension sensors (TSMod, HP35 andHP35st; Fig. 3) cover much of the force range that is thought tobe relevant for the regulation of many intracellular processes(Cost et al., 2015), modules sensitive to even higher forces will benecessary to define how much force distinct molecules are able tosustain in cells. Certain integrin receptors, for instance, have beenreported to experience mechanical forces of more than 40 pN duringcell adhesion (Roein-Peikar et al., 2016; Wang and Ha, 2013)and molecules within cell–cell adhesion structures may bear similarlyhigh loads when external stresses are acutely applied. One ofthe future challenges will therefore be engineering suitable sensorpeptides that push the detectable force range beyond 10–12 pN.Five requirements for such force sensing elements have to be considered:(1) a small N- to C-terminal distance in the folded stateto ensure high FRET efficiency at zero force, (2) a sufficient lengthincrease in response to mechanical loads that leads to a significantdrop in FRET accompanied by (3) a large enough change in foldingfree energy, (4) fast folding kinetics, and (5) loading rate insensitivity.While varying changes in peptide length and folding free energyhave predictable consequences on tension sensor sensitivity, it willbe challenging to engineer high-force sensing peptides that areราคาอิสระ และรับฟรี hysteresis refoldingเมื่อกองกำลังบรรเทา ทางเลือกอาจใช้เซ็นเซอร์เปปไทด์ที่ไม่ผ่านการเปลี่ยนสมดุลพับ/แฉแต่แฉเป็นเกณฑ์บังคับที่แตกต่าง และระบุดังนั้นว่าโปรตีนบางอย่างได้รับการประสบทางกลระยะเวลาเป็นสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5. ขยายกล่องเครื่องมือเดียวโมเลกุลสอบเทียบ FRETbased
เซ็นเซอร์ความตึงเครียด
แม้ว่าเซ็นเซอร์ความตึงเครียดอธิบาย (TSMod, HP35 และ
HP35st. รูปที่ 3) ให้ครอบคลุมมากในช่วงที่แรงที่เป็นความคิดที่
จะเกี่ยวข้องกับกฎระเบียบของกระบวนการภายในเซลล์จำนวนมาก
( เสียค่าใช้จ่าย et al., 2015), โมดูลที่มีความสำคัญที่จะได้กองกำลังที่สูงขึ้นจะเป็น
สิ่งจำเป็นในการกำหนดวิธีการที่แรงมากโมเลกุลที่แตกต่างกันสามารถที่จะ
รักษาในเซลล์ ผู้รับ integrin บางอย่างเช่นการได้รับ
รายงานจะได้สัมผัสกับกองกำลังทางกลของกว่า 40 PN ในช่วง
การยึดเกาะของเซลล์ (Roein-Peikar et al, 2016;. วังและฮา 2013)
และโมเลกุลภายในโครงสร้างของเซลล์เซลล์ยึดเกาะที่อาจแบกรับในทำนองเดียวกัน
สูง โหลดเมื่อความเครียดภายนอกถูกนำมาใช้อย่างรุนแรง หนึ่งใน
ความท้าทายในอนาคตจึงจะวิศวกรรมเซ็นเซอร์ที่เหมาะสม
เปปไทด์ที่จะผลักดันในช่วงที่ตรวจพบแรงเกิน 10-12 PN.
ห้าองค์ประกอบข้อกำหนดสำหรับการตรวจจับแรงดังกล่าวจะต้องมีการพิจารณา:
(1) N- เล็ก ๆ กับระยะทาง C-ขั้วใน พับรัฐ
ให้มีประสิทธิภาพฉลุสูงที่ศูนย์บังคับ (2) มีความยาวเพียงพอที่
เพิ่มขึ้นในการตอบสนองต่อแรงโหลดทางกลที่นำไปสู่อย่างมีนัยสำคัญ
ลดลงในฉลุพร้อมด้วย (3) มีการเปลี่ยนแปลงขนาดใหญ่มากพอในการพับ
พลังงาน (4) พับได้อย่างรวดเร็ว จลนพลศาสตร์และ (5) ไม่รู้สึกอัตราโหลด.
ในขณะที่ที่แตกต่างกันการเปลี่ยนแปลงในระยะเวลาเปปไทด์และพับพลังงาน
มีผลกระทบที่คาดการณ์เกี่ยวกับความไวของเซ็นเซอร์ความตึงเครียดก็จะ
เป็นสิ่งที่ท้าทายในการสร้างสูงแรงตรวจจับเปปไทด์ที่มีการ
โหลดอัตราที่เป็นอิสระและได้รับการ refolding hysteresis ฟรี
เมื่อกองกำลังบรรเทาลง เป็นทางเลือกที่อาจจะใช้เปปไทด์เซ็นเซอร์
ที่ไม่ได้รับการสมดุลพับ / แฉเปลี่ยนแปลง
แต่แฉที่เกณฑ์แรงที่แตกต่างกันและดังนั้นจึงแสดงให้เห็น
ว่าโปรตีนบางอย่างได้รับการประสบโหลดวิศวกรรม
สำหรับจำนวนเงินที่สำคัญของเวลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5 . การสอบเทียบ fretbased กล่องเครื่องมือของ - โมเลกุลเดี่ยวแรง เซ็นเซอร์แม้ว่าอธิบายแรง เซ็นเซอร์ ( tsmod hp35 , และhp35st ; รูปที่ 3 ) ครอบคลุมมากของแรงช่วงนั้นคิดว่าจะเกี่ยวข้องกับการควบคุมกระบวนการภายในเซลล์มาก( ต้นทุน et al . , 2015 ) , โมดูลไวยิ่งกว่ากำลังจะกำหนดวิธีการบังคับแตกต่างกันโมเลกุลสามารถหล่อเลี้ยงในเซลล์ ตัวรับอินทีกรินบาง , เช่น , ได้รับรายงานประสบการณ์กลบังคับมากกว่า 40 ? ระหว่างการยึดเกาะของเซลล์ ( roein peikar et al . , 2016 ; วังและฮา , 2013 )และโมเลกุลภายในเซลล์และเซลล์ยึดเกาะโครงสร้างอาจทนในทํานองเดียวกันโหลดสูงเมื่อความเค้นภายนอกจะรุนแรงไปใช้ หนึ่งของความท้าทายในอนาคตจึงจะเหมาะสม เซ็นเซอร์ วิศวกรรมเปปไทด์ที่ดันช่วงที่ตรวจพบเกิน 10 – 12 อื่นๆ5 ความต้องการเช่นบังคับตรวจจับองค์ประกอบที่ต้องพิจารณา :( 1 ) ขนาดเล็ก - ซึ่งระยะห่างในพับในรัฐเพื่อให้แน่ใจว่าประสิทธิภาพกังวลสูงที่ศูนย์บังคับ ( 2 ) ความยาวเพียงพอเพิ่มขึ้นในการโหลดที่นำไปสู่ความกลปล่อยในฉลุพร้อม ( 3 ) การเปลี่ยนแปลงขนาดใหญ่พอในพับพลังงานฟรี ( 4 ) แบบพับเร็ว และ ( 5 ) อัตราการโหลดเฉื่อยชาในขณะที่การเปลี่ยนแปลงในความยาวเปปไทด์และพับเก็บพลังงานฟรีผลทำนายบนเซ็นเซอร์แรงไว มันจะท้าทายวิศวกรเปปไทด์ที่ตรวจจับแรงสูงอัตราการโหลดแบบอิสระและได้รับ refolding ฟรีเมื่อกำลังทรุด ทางเลือกที่อาจจะใช้เซ็นเซอร์ เปปไทด์ที่ไม่ได้ผ่านการพับ / แฉเปลี่ยนสมดุลแต่แฉในเกณฑ์บังคับที่แตกต่างกันและดังนั้นจึงระบุว่าไม่ว่าจะเป็นโปรตีนบางอย่างได้รับการประสบโหลดทางกลสำหรับจำนวนเงินที่สำคัญของเวลา