Separation of carotenoids was carried out using an HPLC system
(1200 Series; Agilent Technologies, Diegem, Belgium) equipped
with a YMC C30 column (150 4.6 mm, 3 lm particle size; YMC
Europe, Dinslaken, Germany), coupled to a corresponding C30 guard
cartridge. The column was maintained at 25 C and methanol containing
0.1% (w/v) BHT (A), methyl t-butyl ether containing 0.1%
(w/v) BHT (B) and milli-Q water (C) were used as the mobile phase.
Gradient elution was applied at a flow rate of 1 mL min1 with the
following conditions: 0–2 min 95% A + 5% C, 10 min 95% A + 3%
B + 2% C, 21 min 95% A + 5% B, 27 min 90% A + 10% B, 37 min 70%
A + 30% B, 40 min 50% A + 50% B, 40.01–45 min 95% A + 5% C. The
diode array detector (DAD) was set at 430, 450 and 486 nm.
Mass spectra of carotenoids were obtained using the aforementioned
chromatographic system fitted to a time-of-flight (TOF)
mass spectrometer (6200 Series; Agilent Technologies, Diegem,
Belgium) equipped with an atmospheric pressure chemical ionisation
(APCI) interface. The APCI interface was used in positive ion
mode under the following conditions: high-purity (99.9%) nitrogen
was used as nebulising (60 psig) and drying gas (7 mL min1
); gas
and vaporiser temperatures were set at 350 C; the corona was set
at 4 lA, capillary, fragmentor, and skimmer voltages were 3500,
175, and 65 V, respectively.
The mass axis was calibrated using the mixture provided by the
manufacturer over the m/z 100–3200 range. A reference solution
was used as a continuous calibration using the following reference
masses: m/z 121.0509 and 922.0098 (ppm error < 3 ppm at m/z
922.0098). Spectra were acquired over the m/z 100–3200 range
at a scan rate of 1 s/spectrum.
Identification of carotenoids was done by comparing their
retention time, mass and spectra with commercial standards and
with literature data (Britton, Liaaen-Jesen, & Pfander, 2004;
Cortés, Esteve, Frigola, & Torregrosa, 2004; Meléndez-Martínez,
Britton, Vicario, & Heredia, 2005; Meléndez-Martínez, Stinco, Liu,
& Wang, 2013; Meléndez-Martínez et al., 2008; Vervoort et al.,
2011; Rodriguez-Amaya & Kimura, 2004; Breitenbach &
Sandmann, 2005; Meléndez-Martínez, Vicario, & Heredia, 2007).
Calculation of %III/II was made based on the percentage of the quotient
between band III and band II (normally kmax). The identification
of different cis isomers was based on the ratio of the height of
the cis-peak band to band II (Db/DII) (Rodriguez-Amaya & Kimura,
2004).
Qu
Separation of carotenoids was carried out using an HPLC system(1200 Series; Agilent Technologies, Diegem, Belgium) equippedwith a YMC C30 column (150 4.6 mm, 3 lm particle size; YMCEurope, Dinslaken, Germany), coupled to a corresponding C30 guardcartridge. The column was maintained at 25 C and methanol containing0.1% (w/v) BHT (A), methyl t-butyl ether containing 0.1%(w/v) BHT (B) and milli-Q water (C) were used as the mobile phase.Gradient elution was applied at a flow rate of 1 mL min1 with thefollowing conditions: 0–2 min 95% A + 5% C, 10 min 95% A + 3%B + 2% C, 21 min 95% A + 5% B, 27 min 90% A + 10% B, 37 min 70%A + 30% B, 40 min 50% A + 50% B, 40.01–45 min 95% A + 5% C. Thediode array detector (DAD) was set at 430, 450 and 486 nm.Mass spectra of carotenoids were obtained using the aforementionedchromatographic system fitted to a time-of-flight (TOF)mass spectrometer (6200 Series; Agilent Technologies, Diegem,Belgium) equipped with an atmospheric pressure chemical ionisation(APCI) interface. The APCI interface was used in positive ionmode under the following conditions: high-purity (99.9%) nitrogenwas used as nebulising (60 psig) and drying gas (7 mL min1); gasand vaporiser temperatures were set at 350 C; the corona was setat 4 lA, capillary, fragmentor, and skimmer voltages were 3500,175, and 65 V, respectively.The mass axis was calibrated using the mixture provided by themanufacturer over the m/z 100–3200 range. A reference solution
was used as a continuous calibration using the following reference
masses: m/z 121.0509 and 922.0098 (ppm error < 3 ppm at m/z
922.0098). Spectra were acquired over the m/z 100–3200 range
at a scan rate of 1 s/spectrum.
Identification of carotenoids was done by comparing their
retention time, mass and spectra with commercial standards and
with literature data (Britton, Liaaen-Jesen, & Pfander, 2004;
Cortés, Esteve, Frigola, & Torregrosa, 2004; Meléndez-Martínez,
Britton, Vicario, & Heredia, 2005; Meléndez-Martínez, Stinco, Liu,
& Wang, 2013; Meléndez-Martínez et al., 2008; Vervoort et al.,
2011; Rodriguez-Amaya & Kimura, 2004; Breitenbach &
Sandmann, 2005; Meléndez-Martínez, Vicario, & Heredia, 2007).
Calculation of %III/II was made based on the percentage of the quotient
between band III and band II (normally kmax). The identification
of different cis isomers was based on the ratio of the height of
the cis-peak band to band II (Db/DII) (Rodriguez-Amaya & Kimura,
2004).
Qu
การแปล กรุณารอสักครู่..
แยก carotenoids ได้ดำเนินการใช้ระบบ HPLC
(1200 ซีรีส์; Agilent Technologies, บรัสเซลส์, เบลเยียม)
การติดตั้งกับคอลัมน์YMC C30 (150 4.6 มมขนาดอนุภาค 3 LM; YMC
ยุโรป Dinslaken, เยอรมนี) คู่กับที่สอดคล้องกัน C30
ยามตลับหมึก คอลัมน์ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 25 C และเมทานอลที่มี
0.1% (w / v) บาท (A), เมธิลอีเธอร์ทีบิวทิลที่มี 0.1%
(w / v) บาท (B) และน้ำพัน-Q (C) ถูกนำมาใช้เป็น เฟสเคลื่อนที่.
ชะไล่โทนสีถูกนำมาใช้ในอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร min1
กับเงื่อนไขต่อไปนี้: 0-2 นาที 95% A + 5% C, 10 นาที 95% A + 3%
B + 2% C 21 นาที 95 % A + 5% B, 27 นาที 90% A + 10% B, 37 นาที 70%
A + 30% B, 40 นาที 50% A + 50% B, 40.01-45 นาที 95% A + 5% ซี
เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด (DAD) ตั้งอยู่ที่ 430, 450 และ 486 นาโนเมตร.
สเปกตรัมมวลของนอยด์ที่ได้รับการใช้ดังกล่าวระบบโครมาพอดีกับเวลาของเที่ยวบิน (TOF) สเปกโตรมิเตอร์มวล (6200 ซีรีส์; Agilent Technologies, บรัสเซลส์, เบลเยี่ยม ) พร้อมกับความดันบรรยากาศเคมี Ionisation (APCI) อินเตอร์เฟซ อินเตอร์เฟซที่ APCI ถูกใช้ในไอออนบวกโหมดภายใต้เงื่อนไขดังต่อไปนี้มีความบริสุทธิ์สูง(99.9%) ไนโตรเจนถูกใช้เป็นnebulising (60 psig) และก๊าซอบแห้ง (7 มล min1); ก๊าซและอุณหภูมิไอที่ตั้งอยู่ที่ 350 C; โคโรนาถูกตั้ง4 LA, ฝอย fragmentor และแรงดันไฟฟ้าที่เป็นพาย 3500, 175 และ 65 V ตามลำดับ. แกนได้รับการสอบเทียบมวลโดยใช้ส่วนผสมที่จัดไว้ให้โดยผู้ผลิตในช่วงม. / z ช่วง 100-3200 วิธีการแก้ปัญหาการอ้างอิงที่ใช้เป็นการสอบเทียบอย่างต่อเนื่องโดยใช้การอ้างอิงต่อไปมวลชน: ม. / z และ 121.0509 922.0098 (ppm ข้อผิดพลาด <3 ppm ที่ม. / z 922.0098) Spectra ได้มาในช่วงม. / z 100-3200 ช่วงที่อัตราการสแกน1 วินาที / สเปกตรัม. บัตรประจำตัวของนอยด์ที่ได้กระทำโดยการเปรียบเทียบของพวกเขาเวลาการเก็บรักษามวลและสเปกตรัมที่มีมาตรฐานในเชิงพาณิชย์และมีข้อมูลวรรณคดี(บริท Liaaen-Jesen, และ Pfander 2004; Cortés, Esteve, Frigola และ Torregrosa 2004; Meléndez-Martínez, บริท Vicario และ Heredia 2005; Meléndez-Martínez, Stinco หลิวและวัง2013;. Meléndez-Martínez et al, 2008 ; Vervoort, et al. 2011; Rodriguez-Amaya และคิมูระ, 2004; Breitenbach และSandmann 2005. Meléndez-Martínez, Vicario และ Heredia, 2007) การคำนวณ% III / II ถูกสร้างขึ้นในอัตราร้อยละของความฉลาดทางที่ระหว่างวงดนตรีวง III และครั้งที่สอง (ปกติ kmax) บัตรประจำตัวของไอโซเมอสรุปที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับอัตราส่วนของความสูงของวงดนตรีที่ถูกต้องยอดวงที่สอง(Db / DII) (Rodriguez-Amaya และคิมูระ, 2004). คู
การแปล กรุณารอสักครู่..
การแยกแคโรทีนอยด์ได้ โดยใช้ระบบ HPLC
( 1200 ชุด ด้านเทคโนโลยี ดีเกม , เบลเยียม ) ติดตั้ง
กับ ymc C30 คอลัมน์ ( 150 4.6 มม. 3 ขนาด อนุภาค อิม ymc
ยุโรป Dinslaken , เยอรมนี ) , คู่กับตลับ C30 ยาม
ที่สอดคล้องกัน คอลัมน์ไว้ที่ 25 C และเมทานอลประกอบด้วย
0.1% ( w / v ) บาท ( A ) เมทิลอีเทอร์ที่ประกอบด้วย 0.1%
t-butyl( w / v ) บาท ( B ) และ milli-q น้ำ ( C ) ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ การประยุกต์
ได้มาที่อัตราการไหล 1 ml min1 กับ
เงื่อนไขต่อไปนี้ : 0 – 2 นาที 95 % เป็น 5 % C 10 นาที 95 % 3 %
% C B 2 21 นาที 95 % เป็น 5 % B , 27 นาที 90 % เป็น 10 % B , 37 นาที 30 70 %
% B , 40 นาที 50 % 50 % B , 40.01 – 45 นาที 95 % เป็น 5 % C .
ไดโอดเรย์ตรวจจับ ( พ่อ ) เท่ากับ 430 , 450 และ 486 nm .
มวลสเปกตรัมของแคโรทีนอยด์ได้ใช้ระบบดังกล่าว
เมื่อติดตั้งกับเวลา - การบิน ( tof )
แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( 200 ชุด ; Agilent Technologies , Diegem ,
เบลเยียม ) พร้อมกับความกดอากาศเคมี ionisation
( ACPI ) อินเตอร์เฟซ อินเตอร์เฟซที่ใช้ในโหมด ACPI ไอออน
บวกภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้ : ความบริสุทธิ์สูง ( 99.9% ) ไนโตรเจน
ใช้เป็น nebulising ( 60 ปอนด์ ) และก๊าซแห้ง ( 7 ml min1
) ; ก๊าซและอุณหภูมิสลิงตั้ง 350 C ;
4 ลาโคโรนาเป็นชุด fragmentor หลอดเลือดฝอย และแรงดันไฟฟ้า , สกิมเมอร์เป็น 3500
V , 175 และ 65 ตามลำดับ
มวลแกนคือการปรับส่วนผสมที่มาจากผู้ผลิตกว่า
M / Z 100 – 3 ช่วง อ้างอิง
โซลูชั่นถูกใช้เป็นอย่างต่อเนื่องการสอบเทียบโดยใช้มวลชนอ้างอิง
ต่อไปนี้ : M / Z 121.0509 922.0098 ( ppm และข้อผิดพลาด < 3 ppm ที่ m / z
922.0098 ) สเปกตรัมที่ได้มาผ่าน M / Z 100 - 3200 ช่วงที่อัตราการสแกน
1 s /
การจำแนกสเปกตรัม คาโรทีนอยด์ โดยเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาของพวกเขา
, สื่อมวลชน และช่วงที่มีมาตรฐานการค้าและ
ข้อมูลวรรณกรรม ( บริท liaaen jesen & pfander , , ,2004 ;
CORT é s , esteve frigola & , , torregrosa , 2004 ; เมลจาก ndez มาร์ตีเนซ
Vicario , บริตตัน , , & Heredia , 2005 ; เมลจาก ndez มาร์ตีเนซ stinco Liu , , ,
&วัง 2013 ; เมลจาก ndez มาร์ตีเนซ et al . , 2008 ; vervoort และ al . ,
2011 ; Rodriguez Amaya &คิมูระ , 2004 ; Breitenbach &
sandmann , 2005 ; เมลจาก ndez มาร์ตีเนซ Vicario , & Heredia , 2550 ) .
การคำนวณ % 3 / 2 ตามร้อยละของผลหาร
ระหว่างวงดนตรี 3 วงและ II ( ปกติ kmax ) รหัส
ของไอโซเมอร์ CIS แตกต่างกัน ขึ้นอยู่กับอัตราส่วนของความสูงของ CIS ยอดวงดนตรีวง
2 ( dB / ไม่ดี ) ( โรดริเกซ Amaya &คิมูระ ,
า 2004 )
การแปล กรุณารอสักครู่..