2.4.4. Analysis of flavonoids by HP

2.4.4. Analysis of flavonoids by HPLC
The quantitative analysis was performed by using an HPLC analytical system (Elite LaChrom, VWR-Hitachi, France) con-sisting of a Spectra System P4000 pump, a Spectra System UV 6000LP diode array detector, a Spectra System SCM 1000 degasser and a Spectra System AS3000 auto-sampler con-trolled by software (THERMO CHROMQUEST). After filtration on Millipore paper (0.22 m), 20 l of ethanolic extract was injected on reverse-phase C18column (150 × 4.6 mm, 5 m par-ticle size, Apollo, Grace, Belgium). The mobile phase consisted of solvent A, water-acetic acid (2%) and solvent B, methanol-acetic acid (2%). A gradient program was carried out as follows:5 min, 10% B; 78 min, 100% B; 88 min, 100% B; 90 min, 10% B;100 min, 10% B. The flow recorded at 280 nm for the quantitative determination of fla-vanones and at 340 nm for flavones. The limits of detection ofthe HPLC used for the flavonoid analysis are 9000 u.a. for thedetection at 290 nm and 50 u.a. for the detection at 340 nm.The limits of quantification were calculated according to eachstandard curve (Annex materials).The standards eriocitrin, naringin, narirutin, neohes-peridin, didymin, sinensetin, tangeretin, nobiletin and3,4,5,56,7,-hexamethoxyflavone were prepared at a stockconcentration of 250 mg/L. For hesperidin, the concentrationwas 20 mg/L because of its low solubility. Calibration standardsamples were prepared by appropriate dilutions with a mix-ture of ethanol/DMSO from the stock solutions and filteredon Millipore paper (0.22 m) before use. Calibration curvesobtained showed determination coefficients superior to 0.98(Annex materials).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4.4 การวิเคราะห์ของ flavonoids โดย HPLC ทำการวิเคราะห์เชิงปริมาณ โดยใช้การ HPLC ระบบวิเคราะห์ (Elite LaChrom ฮิตาชิ VWR ฝรั่งเศส) คอน-sisting ปั๊ม P4000 ระบบแรมสเป็คตรา มีแรมสเป็คตราระบบ UV 6000LP ไดโอดอาร์เรย์จับ degasser แรมสเป็คตราระบบ SCM 1000 และมีแรมสเป็คตรา AS3000 ระบบอัตโนมัติแซมเพลอร์ trolled คอนโดยซอฟต์แวร์ (เทอร์โม CHROMQUEST) หลังจากกรองบนกระดาษมาก (0.22 เมตร), l 20 ของสารสกัด ethanolic ถูกฉีดบน C18column กลับเฟส (150 × 4.6 มม. ขนาด 5 m par ticle อพอลโล่ เกรซ เบลเยียม) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยกรดอะซิติกน้ำ (2%) ตัวทำละลาย A และ B เป็นตัวทำละลาย กรดอะซิติกเมทานอล (2%) โปรแกรมไล่ระดับทำออกเป็นดังนี้: 5 นาที 10% B นาที 78, 100% B นาที 88, 100% B 90 นาที 10% B; 100 นาที 10% บี ขั้นตอนการบันทึกที่ 280 nm สำหรับการกำหนดเชิงปริมาณ vanones สัมภาษณ์ของสมาคม และ ที่ 340 nm สำหรับ flavones ขีดจำกัดของการตรวจสอบของ HPLC ที่ใช้สำหรับวิเคราะห์ flavonoid มี u.a. 9000 สำหรับ thedetection ที่ 290 nm และ u.a. 50 ตรวจที่ 340 nm มีคำนวณขีดจำกัดของการนับตามเส้นโค้ง eachstandard (แอนเน็กซ์วัสดุ) การ eriocitrin มาตรฐาน naringin, narirutin, neohes peridin, didymin, sinensetin, tangeretin, nobiletin and3, 4, 5,5 6,7, -hexamethoxyflavone ได้เตรียมที่ stockconcentration ของ 250 มิลลิกรัม/L. สำหรับ hesperidin, concentrationwas 20 mg/L เนื่องจากการละลายต่ำสุด เทียบ standardsamples ถูกจัดทำ โดย dilutions ที่เหมาะสมกับการผสม-ture ของเอทานอ ล/DMSO จากโซลูชั่นหุ้นและ filteredon มากกระดาษ (0.22 เมตร) ก่อนใช้ เทียบ curvesobtained แสดงสัมประสิทธิ์ความมุ่งมั่นที่จะ 0.98(Annex materials)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4.4 การวิเคราะห์ของ flavonoids โดย HPLC
เพื่อการวิเคราะห์เชิงปริมาณได้ดำเนินการโดยใช้ระบบการวิเคราะห์HPLC (ยอด LaChrom, VWR-Hitachi, ฝรั่งเศส) นักโทษ-sisting ของปั๊มระบบ Spectra P4000, ระบบ Spectra UV 6000LP เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอดระบบ Spectra SCM 1000 degasser และระบบ Spectra AS3000 ตัวอย่างอัตโนมัตินักโทษ-trolled โดยซอฟต์แวร์ (THERMO CHROMQUEST) หลังจากที่กรองบนกระดาษค (0.22? m) 20 ลิตรสารสกัดฉีดด้านหลังเฟส C18column (150 × 4.6 มม 5? เมตรขนาดตราไว้หุ้นละ ticle อพอลโล, เกรซ, เบลเยียม) ขั้นตอนถือเป็นตัวทำละลายประกอบด้วย A, กรดน้ำอะซิติก (2%) และ B ตัวทำละลายกรดอะซิติก-เมทานอล (2%) โปรแกรมการไล่ระดับสีได้ดำเนินการดังต่อไปนี้: 5 นาที, 10% B; 78 นาที, 100% B; 88 นาที, 100% B; 90 นาที, 10% B 100 นาที, 10% บีไหลบันทึกที่ 280 นาโนเมตรสำหรับการวัดเชิงปริมาณของ fla-vanones และ 340 นาโนเมตรสำหรับ flavones ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ ofthe HPLC เพื่อใช้สำหรับการวิเคราะห์ flavonoid มี UA 9000 สำหรับ thedetection ที่ 290 นาโนเมตรและ 50 UA สำหรับการตรวจสอบ 340 ข้อ จำกัด ของปริมาณ nm.The ถูกคำนวณตามเส้นโค้ง eachstandard นี้ (วัสดุ Annex) ได้โดยเริ่มต้น eriocitrin มาตรฐาน naringin, narirutin, neohes-peridin, didymin, sinensetin, tangeretin, nobiletin and3? 4? 5,5? 6,7, -hexamethoxyflavone ได้เตรียมที่ stockconcentration 250 มก. / ลิตร สำหรับ hesperidin ที่ concentrationwas 20 มิลลิกรัม / ลิตรเนื่องจากความสามารถในการละลายที่ต่ำ การสอบเทียบ standardsamples เตรียมโดยเจือจางที่เหมาะสมกับการผสมเอทานอล ture / DMSO จากการแก้ปัญหาสต็อกและกระดาษ filteredon ค (0.22? เมตร) ก่อนการใช้งาน การสอบเทียบ curvesobtained แสดงให้เห็นว่าค่าสัมประสิทธิ์ความมุ่งมั่นที่ดีกว่า 0.98 (วัสดุ Annex)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4.4 . การวิเคราะห์เชิงปริมาณของฟลาโวนอยด์โดยวิธี HPLC
การวิเคราะห์โดยใช้ HPLC วิเคราะห์ระบบ ( ยอด lachrom อนาคีเมีย ฮิตาชิ , ฝรั่งเศส ) คอน sisting ของระบบปั๊ม spectra spectra เข้าถึงข้อมูล , ระบบยูวี 6000lp ไดโอดเรย์ตรวจจับ , Spectra Spectra ระบบ SCM 1000 degasser และระบบ as3000 ตัวอย่างอัตโนมัติ ( เทอร์โม chromquest CON trolled โดยซอฟต์แวร์ )หลังจากการกรองบนกระดาษ ( 0.22 มิลลิ  m ) 20  L ของสิ่งสกัดมาฉีดบน c18column กลับเฟส ( 150 × 4.6 มม. , 5  M โดย ticle ขนาด อพอลโล , เกรซ , เบลเยียม ) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยตัวทำละลาย , กรดน้ำ ( 2% ) และตัวทำละลาย B , เมทานอลกรดอะซิติก ( 2% ) โปรแกรมการกระทำดังนี้ 5 นาที 10 % B ; 78 นาที 100 % B ; 88 นาที 100 % B ; 90 นาที 10 % B ; 100 นาที10 . การบันทึกที่ 280 nm สำหรับการวิเคราะห์ปริมาณฟลา vanones และ 340 nm สำหรับนิลในสูตร . ขอบเขตของการตรวจสอบของ HPLC วิเคราะห์ฟลาโวนอยด์เป็น 9000 u.a. สำหรับ thedetection ที่ 290 nm และ 50 u.a. ตรวจหาที่ 340 นาโนเมตร ขีดจำกัดของปริมาณได้ตาม eachstandard โค้ง ( วัสดุภาคผนวก ) มาตรฐานพันธุ์ริโอซิทริน , ,narirutin neohes peridin , didymin sinensetin tangeretin , , , ,   โนบิลิติน 3 , 4 , 6 , 7 - 5 , 5  , hexamethoxyflavone เตรียมที่ stockconcentration 250 มก. / ล. สำหรับ hesperidin , concentrationwas 20 มิลลิกรัมต่อลิตร เพราะค่าต่ำ standardsamples สอบเทียบได้ถูกเตรียมโดยวิธีการที่เหมาะสมกับการผสมจริงของเอทานอล / DMSO จากหุ้นโซลูชั่น และ กระดาษ filteredon MILLIPORE ( 022  M ) ก่อนใช้ การสอบเทียบ curvesobtained แสดงการหาค่าสัมประสิทธิ์เหนือ 0.98 ( วัสดุภาคผนวก )