HUMANIZED แอนติ-CD134 (OX40) ANTIBO

HUMANIZED แอนติ-CD134 (OX40) ANTIBODIES AND USES ของมัน

The present application claims priority from EP13159794.0 filed on March 18, 2013.
5
Field of the การประดิษฐ์


The การประดิษฐ์ relates to antibodies, the use of such antibodies, and
particularly to humanized antibodies that bind to CD134, for the treatment of
10 cancer.


Background of the การประดิษฐ์
Enhancing anti-tumour T-cell function represents a unique approach for
treating cancer. There is considerable evidence that tumour cells 'escape' the
15 immune system by induction of an active immune tolerance largely mediated by
regulatory T ลิมโฟไซต์ (Tregs; Quezda et al. Immunol Rev 2011; 241:104-118).
Therefore, the balance between effector (i.e., direct or indirect eradication of
tumour cells) T ลิมโฟไซต์ (Teffs) and tolerogenic (i.e., suppression of Teffs
effector function and survival) Tregs appears to be crucial for effective anti-tumour 20 immunotherapy. In other words, an effective anti-tumour immune response can be
obtained by enhancing effector function of tumour-specific Teffs and/or by
attenuating suppressive function of tumour-specific Tregs. A key รีเซปเตอร์ that has
been shown to mediate these responses is the CD134 (OX40) รีเซปเตอร์. (Sugamura,
K, Ishii, N, Weinberg, A. Therapeutic targeting of the effector T-cell co-stimulatory 25 molecule OX40. Nature Rev Imm 2004; 4: 420-431).
CD134 (also known as OX40, TNFRSF4, and ACT35) is a member of the tumour necrosis factor รีเซปเตอร์ superfamily. This CD134 surface co-stimulatory รีเซปเตอร์ is expressed on activated T ลิมโฟไซต์, and plays an important role in
their survival and function. The presence of CD134 expressing T ลิมโฟไซต์ has 30 been demonstrated in various human malignant tumours and in the draining
lymph nodes of cancer patients (Ramstad et al. Am J Surg 2000; 179: 400-406;
Vetto et al. Am J Surg 1997; 174: 258-265).







2
In vivo ligation of the mouse CD134 รีเซปเตอร์ (by either soluble mouse OX40 ligand (OX400-immunoglobulin fusion proteins or mouse OX4OL mimetics, such as anti-mouse CD134-specific antibodies) in tumour-bearing mice enhances anti-
tumour immunity, leads to tumour-free survival in mouse models of various
5 murine malignant tumour cell lines, e.g., lymphoma, melanoma, sarcoma, colon
cancer, breast cancer, and glioma (Sugamura et al. Nature Rev Imm 2004; 4: 420-
431) .
It has been proposed to enhance the immune response of a mammal to an
antigen by engaging the OX4OR through the use of an OX4OR binding agent (Int. 10 Pat. Publ. No. WO 99/42585). Although the document refers generally to OX40-
binding agents, the emphasis is on the use of OX4OL or parts ของมัน, the
การเปิดเผย of anti-OX40 antibodies is in the context of their being equivalent to
OX4OL. Indeed, when the Weinberg team (Weinberg et al. J Immunther 2006; 29:
575-585) translated the research to a study with non-human primates, they again 15 deliberately chose an antibody that binds to the OX40L-binding site and generally
mimics OX4OL.
Al-Shamkhani et al. (Eur J Chem 1996; 26: 1695-1699) used an anti-OX40
antibody called OX86, which did not block OX40L-binding, in order to explore
differential expression of OX40 on activated mouse T-cells; and Hirschhorn-
20 Cymerman et al. (J Exp Med 2009; 206: 1103-1116) used OX86 together with
cyclophosphamide in a mouse model as a potential chemoimmunotherapy.
However, OX86 would not be expected to bind ฮิวเมน OX40 and, when choosing an
antibody that would be effective in humans, one would, in the light of the Weinberg
work, choose an antibody that did bind at the OX40L-binding site.
25 In vivo ligation of the ฮิวเมน CD134 รีเซปเตอร์ (by แอนติ-ฮิวเมน CD134-
specific antibodies which interact with the OX4OL binding domain on human
CD134; US 2009/0214560 Al) in severe combined immunodeficient (SCID) mice enhances anti-tumour immunity, which leads to tumour growth inhibition of
various human malignant tumour cell lines, e.g. lymphoma, prostate cancer, colon
30 cancer, and breast cancer.
The exact mechanism of ฮิวเมน CD134 ligation-mediated anti-tumour
immune responses in humans is not yet elucidated, but is thought to be mediated via the CD134 transmembrane signalling pathway that is stimulated by the







3
interaction with OX4OL. This interaction is mediated by the binding of trimeric OX4OL to CD134. In current anti-cancer therapies, the use of trimerized OX40 ligand is proposed as a more effective agent than anti-OX40 antibodies (Morris et al. Mol Immunol 2007; 44: 3112-3121).
5
Summary of the การประดิษฐ์


The การประดิษฐ์นี้ provides a bindin •molecule ซึ่งประกอบรวมด้วย
(a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence of figure
10 27, or a variant of that sequence having 1, 2 or 3 amino acid substitutions;
and/or
(b) a บริเวณ แปรผัน สายเบา ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence of figure 27,
or a variant of that sequence having 1, 2 or 3 amino acid substitutions.
The การประดิษฐ์ further provides a โมเลกุลยึดเกาะ ซึ่งประกอบรวมด้วย
15 (a) a บริเวณ แปรผัน สายหนัก ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence of figure
26, or a variant of that sequence having 1, 2 or 3 amino acid substitutions; and/or
(b) a บริเวณ แปรผัน สายเบา ซึ่งประกอบรวมด้วย the amino acid sequence of figure 26
or a variant of that sequence having 1, 2 or 3 amino acid substitutions.
20 In some embodiments, the isolated binding, molecules bind to human
CD134. The โมเลกุลยึดเกาะs of the การประดิษฐ์ may not prevent ฮิวเมน CD134 (OX40) รีเซปเตอร์ binding to OX40 ligand (OX401.4).
Such โมเลกุลยึดเกาะs รวมถึง suitable แอนติ-CD134 antibodies, antigen-
binding fragments of the แอนติ-CD134 antibodies, and derivatives of the แอนติ-CD134 25 antibodies. In some embodiments the โมเลกุลยึดเกาะ binds to ฮิวเมน CD134
with a Ka of 1 x 10.7 M or less. The โมเลกุลยึดเกาะ has agonist activity on
ฮิวเมน CD134 on T- effector cells and/or antagonistic activity on ฮิวเมน CD134 on
T-regulator cells. In some further embodiments, the โมเลกุลยึดเกาะ is a human
monoclonal antibody that specifically binds ฮิวเมน CD134 with a Ka of 100 nM or 30 less, for example less than 50nM, or less than 20 nM.
The การประดิษฐ์นี้ also provides a composition that ประกอบรวมด้วย one or
more of the โมเลกุลยึดเกาะs and a pharmaceutically acceptable carrier. In some embodiments, the โมเลกุลยึดเกาะ is a human monoclonal แอนติ-CD134 antibody or







4


an antigen-binding fragment ของมัน. The composition may further ประกอบรวมด้วย
additional pharmaceutical agents, such as immunotherapeutic agents,
chemotherapeutic agents, and hormonal therapeutic agents.
The การประดิษฐ์นี้ further provides diagnostic and therapeutic methods 5 of using the โมเลกุลยึดเกาะs. In some embodiments is provided a method of
treating or preventing cancer in a mammal, ซึ่งประกอบรวมด้วย การให้ to the
mammal a ปริมาณ ที่มีประสิทธิภาพ ทางการรักษา of a โมเลกุลยึดเกาะ or a composition
ซึ่งประกอบรวมด้วย a โมเลกุลยึดเกาะ as disclosed herein. In some other embodiments, the
การเปิดเผย provides a method of enhancing an immune response in a mammal,
10 ซึ่งประกอบรวมด้วย การให้ to the mammal a ปริมาณ ที่มีประสิทธิภาพ ทางการรักษา of a
โมเลกุลยึดเกาะ or a composition ซึ่งประกอบรวมด้วย a โมเลกุลยึดเกาะ. In some
embodiments, the โมเลกุลยึดเกาะ used in the methods is a human monoclonal.
แอนติ-CD134 antibody or an antigen-binding fragment ของมัน, which binds to
ฮิวเมน CD134, wherein the antibody does not prevent ฮิวเมน CD134 (OX40) 15 รีเซปเตอร์ binding to OX40 ligand (OX401).
The การประดิษฐ์นี้ further provides nucleic acid molecules that encode an amino acid sequence of a โมเลกุลยึดเกาะ, vectors ซึ่งประกอบรวมด้วย such nucleic acids, host cells ซึ่งประกอบรวมด้วย the vectors, and methods of preparing the โมเลกุลยึดเกาะs.
20 The การเปิดเผย also provides other aspects, which will be apparent from the
entire การเปิดเผย, ที่รวมถึง the claims.


Description of the Figures


25 Figure 1. Time course and dose effect of exposure to PHA-M on surface human
CD134 expression of human T ลิมโฟไซต์.
Figure 2. ฮิวเมน CD134 expression on resting and on PHA-M-activated ฮิวเมน CD4 T ลิมโฟไซต์.
Figure 3. Binding characteristics of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 30 ACT35, clone 12113, and clone 20E5 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134
expressing T ลิมโฟไซต์.







5
Figure 4. Binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 and clone 20E5 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing CD4 T ลิมโฟไซต์ and CD8 T ลิมโฟไซต์.
Figure 5. Cross-competition of non-labeled mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies 5 clone 12H3 or clone 20E5 with PE-conjugated commercial mouse แอนติ-CD134
antibodies clone ACT35 or clone L106 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134
expressing T ลิมโฟไซต์.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ของมันแอนตี้และใช้ HUMANIZED แอนติ-CD134 (OX40)แอพลิเคชันปัจจุบันอ้างสำคัญจาก EP13159794.0 ที่ยื่นในวันที่ 18 มีนาคม 20135ฟิลด์การประดิษฐ์การประดิษฐ์เกี่ยวข้องกับแอนตี้ แอนตี้ดังกล่าว การใช้ และโดยเฉพาะอย่างยิ่งการแอนตี้ humanized ที่ผูกกับ CD134 สำหรับการจัดการมะเร็ง 10เบื้องหลังของการการประดิษฐ์เพิ่มฟังก์ชัน T เซลล์ป้องกันเนื้องอกแทนวิธีการเฉพาะสำหรับ รักษาโรคมะเร็ง มีหลักฐานพอสมควรที่ว่าเนื้องอกเซลล์ 'หนี' ส่วนใหญ่ mediated 15 ระบบภูมิคุ้มกัน โดยการเหนี่ยวนำของยอมรับภูมิคุ้มกันการใช้งานโดย กำกับดูแล T ลิมโฟไซต์ (Tregs Quezda et al. Immunol เรฟ 2011 241:104-118) ดังนั้น สมดุลระหว่าง effector (เช่น โดยตรง หรือทางอ้อมขจัดความ เนื้องอกเซลล์) T ลิมโฟไซต์ (Teffs) และ tolerogenic (เช่น ปราบปราม Teffs ฟังก์ชัน effector และการอยู่รอด) Tregs ดูเหมือนจะ เป็นเรื่องสำคัญที่มีประสิทธิภาพต่อต้านเนื้องอก immunotherapy 20 ในคำอื่น ๆ การตอบสนองภูมิคุ้มกันต่อต้านเนื้องอกที่มีประสิทธิภาพสามารถ ได้ โดยเพิ่มฟังก์ชัน effector ของ Teffs เนื้องอกเฉพาะ และ/หรือตาม ฟังก์ชัน suppressive attenuating ของ Tregs เนื้องอกเฉพาะ รีเซปเตอร์หลักที่มี การแสดงสื่อกลางตอบสนองเหล่านี้เป็น CD134 (OX40) รีเซปเตอร์ (Sugamura K, Ishii, N, Weinberg บำบัด A. กำหนดเป้าหมายของโมเลกุล T เซลล์ co-stimulatory 25 effector เป็น OX40 ธรรมชาติเรฟอิ่ม 2004 4:420-431)CD134 (ที่รู้จักกัน เป็น OX40, TNFRSF4, ACT35) เป็นสมาชิกของเนื้องอกการตายเฉพาะส่วนปัจจัยรีเซปเตอร์ superfamily นี้รีเซปเตอร์ co-stimulatory ผิว CD134 แสดงบนลิมโฟไซต์ T เปิด และมีบทบาทสำคัญในความอยู่รอดและฟังก์ชัน สถานะของ CD134 แสดง T ลิมโฟไซต์มี 30 ได้แสดงให้เห็นว่า ในเนื้องอกร้ายมนุษย์ต่าง ๆ และ ในการระบายน้ำ โหนดน้ำเหลืองของผู้ป่วยโรคมะเร็ง (Ramstad et al. Am J Surg 2000; 179:400-406 Vetto et al. Am J Surg 1997 174:258-265) 2ไข่ในสัตว์ทดลองของรีเซปเตอร์เมาส์ CD134 (โดยการละลายน้ำเมาส์ OX40 ลิแกนด์ (โปรตีน OX400 immunoglobulin ฟิวชั่นหรือเมาส์ OX4OL mimetics เช่นแอนตี้ CD134 เฉพาะป้องกันเมาส์) ในหนูเรืองเนื้องอกช่วยป้องกันเนื้องอกภูมิคุ้มกัน นำไปสู่ปราศจากเนื้องอกอยู่รอดในรูปแบบเมาส์ของต่าง ๆรายการเซลล์เนื้องอกร้าย murine 5 เช่น คอลลา melanoma, sarcoma ลำไส้ใหญ่มะเร็ง มะเร็งเต้านม และ glioma (Sugamura et al. ธรรมชาติเรฟอิ่ม 2004; 4:420-431)ได้รับการเสนอชื่อเพื่อเพิ่มการตอบสนองภูมิคุ้มกันของเท้าเพื่อการ ตรวจหา โดยเสน่ห์ OX4OR โดยใช้ตัวแทนการผูก OX4OR (Pat 10 ของดอกเบี้ย หมายเลข publ. WO 99/42585) แม้ว่าเอกสารอ้างอิงโดยทั่วไป OX40- ประสาน จะเน้นการใช้ของมัน OX4OL หรือชิ้นส่วน การ การเปิดเผย OX40 ต่อต้านแอนตี้อยู่ในบริบทของตนเทียบเท่ากับ OX4OL แน่นอน เมื่อ Weinberg ที่ทีม (Weinberg et al. J Immunther 2006; 29: 575 585) แปลงานวิจัยเพื่อการศึกษา ด้วยไม่ใช่มนุษย์ primates พวกเขาอีก 15 จงใจเลือกแอนติบอดีที่ binds ไปผูก OX40L และโดยทั่วไป เลียนแบบ OX4OLอัล-Shamkhani et al. (Eur J เคมี 1996; 26:1695-ปา) ใช้การต่อต้าน-OX40 แอนติบอดีที่เรียกว่า OX86 ซึ่งไม่ได้บล็อกรวม OX40L ออกแบบ ค่าแตกต่างของ OX40 บนการเปิดใช้งานเมาส์ทีเซลล์ และ Hirschhorn-20 Cymerman et al. (เจ Exp Med 2009; 206:1103-1116) ใช้ OX86 ร่วมกับ cyclophosphamide ในรูปแบบเมาส์เป็น chemoimmunotherapy อาจเกิดขึ้น อย่างไรก็ตาม OX86 จะไม่คาดหวังการผูกกับฮิวเมน OX40 และ เมื่อเลือกการ แอนติบอดีที่จะมีประสิทธิภาพในมนุษย์ หนึ่งจะ นี้ Weinberg ทำงาน เลือกแอนติบอดีที่ไม่ผูกที่เว็บไซต์ OX40L รวม25 ไข่ในสัตว์ทดลองของฮิวเมน CD134 รีเซปเตอร์ (โดย CD134 แอนติ-ฮิวเมน-แอนตี้เฉพาะที่โต้ตอบกับโดเมนรวม OX4OL ในมนุษย์CD134 สหรัฐอเมริกาอัล 2009/0214560) ในรุนแรงรวม immunodeficient (วทคร) หนูช่วยเพิ่มเนื้องอกต่อต้านภูมิคุ้มกัน ซึ่งนำไปสู่การยับยั้งการเจริญเติบโตของเนื้องอกของ รายการเซลล์เนื้องอกร้ายมนุษย์ต่าง ๆ เช่นคอลลา มะเร็งต่อมลูกหมาก ลำไส้ใหญ่โรคมะเร็ง 30 และมะเร็งเต้านมกลไกที่แน่นอนของฮิวเมน CD134 mediated ไข่ต่อต้านเนื้องอกการตอบสนองของภูมิคุ้มกันในมนุษย์จะไม่ได้ elucidated แต่ไม่คิดจะ mediated ผ่าน CD134 transmembrane แดงทางเดินที่ถูกกระตุ้นโดยการ 3ติดต่อกับ OX4OL โต้ตอบนี้เป็น mediated เชื่อม OX4OL trimeric เพื่อ CD134 ในปัจจุบันป้องกันมะเร็งรักษา ใช้ของลิแกนด์ OX40 trimerized นำเสนอเป็นตัวแทนที่มีประสิทธิภาพกว่าแอนตี้ต่อต้าน-OX40 (al. et มอร์ริสโมล Immunol 2007; 44:3112-3121)5สรุปการประดิษฐ์การประดิษฐ์นี้การให้ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็น •molecule bindin(ก) เป็นบริเวณแปรผันสายหนักซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของรูป10 27 หรือตัวแปรของลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 กรดอะมิโนทดแทนและ/หรือ(ข) บริเวณแปรผันสายเบาซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของเลข 27หรือตัวแปรของลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโน การประดิษฐ์เพิ่มเติมให้โมเลกุลยึดเกาะซึ่งประกอบรวมด้วย15 (a) บริเวณแปรผันสายหนักซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของรูป26 หรือตัวแปรของลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 กรดอะมิโนทด แทน และ/หรือ(ข) บริเวณแปรผันสายเบาซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของรูป 26หรือตัวแปรของลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโน20 ในบาง embodiments ผูกแยก โมเลกุลผูกกับมนุษย์CD134 โมเลกุลยึดเกาะs ของการประดิษฐ์อาจป้องกันไม่ให้ฮิวเมน CD134 ผูกรีเซปเตอร์ (OX40) กับลิแกนด์ OX40 (OX401.4)เช่น โมเลกุลยึดเกาะs รวมถึงเหมาะแอนติ-CD134 แอนตี้ ตรวจหา-เชื่อมชิ้นส่วนของแอนตี้แอนติ CD134 และอนุพันธ์ของแอนตี้แอนติ-CD134 25 ในบาง embodiments โมเลกุลยึดเกาะ binds ฮิวเมน CD134 ด้วยคะ 1 x 10.7 เมตร หรือน้อยกว่า โมเลกุลยึดเกาะมีกล้ามเนื้อทำกิจกรรม ฮิวเมน CD134 T effector เซลล์และ/หรือต่อต้านกิจกรรมฮิวเมน CD134 บน เซลล์ควบคุม T Embodiments บางเพิ่มเติม โมเลกุลยึดเกาะเป็นมนุษย์ monoclonal แอนติบอดีที่เฉพาะ binds ฮิวเมน CD134 กับ Ka 100 nM หรือ 30 น้อย ตัวอย่างน้อยกว่า 50nM หรือน้อยกว่า 20 nMการประดิษฐ์นี้มีส่วนประกอบเป็นประกอบรวมด้วยที่หนึ่ง หรือเพิ่มเติมได้ โมเลกุลยึดเกาะs และผู้ขนส่งยอมรับได้ pharmaceutically บาง embodiments โมเลกุลยึดเกาะมีแอนติบอดีมนุษย์โมโนแอนติ-CD134 หรือ 4การตรวจหาผูกส่วนของมัน องค์ประกอบอาจเพิ่มเติมประกอบรวมด้วยเพิ่มเติมยาตัวแทน เช่นตัวแทน immunotherapeuticตัวแทนเผชิญ และตัวแทนการรักษาฮอร์โมนการประดิษฐ์นี้เพิ่มเติมช่วยให้การวินิจฉัย และรักษาวิธีการ 5 การใช้ โมเลกุลยึดเกาะs การ ในบาง embodiments ไว้วิธีการ รักษา หรือป้องกันโรคมะเร็งในเท้า การให้ซึ่งประกอบรวมด้วยเพื่อ เท้าเป็นทางการรักษาที่มีประสิทธิภาพปริมาณของโมเลกุลยึดเกาะเป็นองค์ประกอบ ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลยึดเกาะเป็นที่เปิดเผยนี้ ในบางอื่น ๆ embodiments การ การเปิดเผยแสดงวิธีการเพิ่มการตอบสนองภูมิคุ้มกันในตัวเท้า 10 ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้กับเท้าเป็นปริมาณที่มีประสิทธิภาพทางการรักษาของการโมเลกุลยึดเกาะ or a composition ซึ่งประกอบรวมด้วย a โมเลกุลยึดเกาะ. In someembodiments, the โมเลกุลยึดเกาะ used in the methods is a human monoclonal. แอนติ-CD134 antibody or an antigen-binding fragment ของมัน, which binds to ฮิวเมน CD134, wherein the antibody does not prevent ฮิวเมน CD134 (OX40) 15 รีเซปเตอร์ binding to OX40 ligand (OX401).The การประดิษฐ์นี้ further provides nucleic acid molecules that encode an amino acid sequence of a โมเลกุลยึดเกาะ, vectors ซึ่งประกอบรวมด้วย such nucleic acids, host cells ซึ่งประกอบรวมด้วย the vectors, and methods of preparing the โมเลกุลยึดเกาะs.20 The การเปิดเผย also provides other aspects, which will be apparent from theentire การเปิดเผย, ที่รวมถึง the claims.Description of the Figures25 Figure 1. Time course and dose effect of exposure to PHA-M on surface humanCD134 expression of human T ลิมโฟไซต์.Figure 2. ฮิวเมน CD134 expression on resting and on PHA-M-activated ฮิวเมน CD4 T ลิมโฟไซต์.Figure 3. Binding characteristics of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 30 ACT35, clone 12113, and clone 20E5 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing T ลิมโฟไซต์. 5Figure 4. Binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 and clone 20E5 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing CD4 T ลิมโฟไซต์ and CD8 T ลิมโฟไซต์.Figure 5. Cross-competition of non-labeled mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies 5 clone 12H3 or clone 20E5 with PE-conjugated commercial mouse แอนติ-CD134 antibodies clone ACT35 or clone L106 on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing T ลิมโฟไซต์.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Humanized แอนติ -CD134 (OX40) แอนติบอดีและการใช้งานของมันความสำคัญประยุกต์ใช้ในปัจจุบันการเรียกร้องจากEP13159794.0 ยื่นเมื่อวันที่ 18 มีนาคม 2013 5 สนามของการประดิษฐ์การประดิษฐ์ที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกันการใช้แอนติบอดีดังกล่าวและโดยเฉพาะอย่างยิ่งแอนติบอดี humanized ที่ผูกกับ CD134 สำหรับการรักษาของ10 โรคมะเร็ง. ประวัติความเป็นมาของการประดิษฐ์การเสริมสร้างป้องกันมะเร็งฟังก์ชั่น T-cell แสดงให้เห็นถึงวิธีการที่ไม่ซ้ำกันสำหรับการรักษาโรคมะเร็ง มีหลักฐานมากที่หลบหนี'เซลล์มะเร็งของระบบภูมิคุ้มกันที่ 15 โดยการเหนี่ยวนำของความอดทนของระบบภูมิคุ้มกันที่ใช้งานสื่อกลางส่วนใหญ่โดย T กฎระเบียบลิมโฟไซต์ (Tregs; Quezda et al, Immunol Rev 2011; 241:. 104-118). ดังนั้น ความสมดุลระหว่าง effector (เช่นการกำจัดโดยตรงหรือโดยอ้อมของเซลล์มะเร็ง) T ลิมโฟไซต์ (Teffs) และ tolerogenic (เช่นการปราบปรามของ Teffs ฟังก์ชั่นและความอยู่รอด effector) Tregs ดูเหมือนจะเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการที่มีประสิทธิภาพในการต้านเซลล์มะเร็ง 20 immunotherapy ในคำอื่น ๆ ที่มีการต้านเซลล์มะเร็งตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่มีประสิทธิภาพสามารถได้รับโดยการเสริมสร้างการทำงานของeffector Teffs เนื้องอกที่เฉพาะเจาะจงและ / หรือโดยการลดทอนการทำงานปราบปรามของTregs เนื้องอกที่เฉพาะเจาะจง คีย์รีเซปเตอร์ที่ได้รับการแสดงเพื่อเป็นสื่อกลางในการตอบสนองเหล่านี้เป็น CD134 (OX40) รีเซปเตอร์ (Sugamura, K, อิชิ, N, Weinberg, A. กำหนดเป้าหมายการรักษาของ effector T-cell ร่วมกระตุ้นโมเลกุล 25 OX40 ธรรมชาติเรฟอิม 2004; 4:. 420-431). CD134 (หรือเรียกว่า OX40, TNFRSF4 และ ACT35) เป็นสมาชิกของปัจจัยเนื้อร้ายเนื้องอกรีเซปเตอร์ superfamily พื้นผิวนี้ CD134 ร่วมกระตุ้นรีเซปเตอร์จะแสดงในวันที่เปิดใช้งานทีลิมโฟไซต์และมีบทบาทสำคัญในการอยู่รอดและการทำงานของพวกเขา การปรากฏตัวของ CD134 แสดงทีลิมโฟไซต์ได้ที่ 30 แสดงให้เห็นในเนื้องอกมะเร็งของมนุษย์ที่หลากหลายและการระบายน้ำในต่อมน้ำเหลืองของผู้ป่วยมะเร็ง(Ramstad et al, Am J Surg 2000; 179:. 400-406;. Vetto et al, Am J Surg 1997; 174:. 258-265) 2 ใน ligation ร่างกายเมาส์ CD134 รีเซปเตอร์ (โดยทั้งเมาส์ที่ละลายน้ำได้ OX40 แกนด์ (OX400-อิมมูโนโปรตีนฟิวชั่นหรือเมาส์ mimetics OX4OL เช่นต่อต้านเมาส์แอนติบอดี CD134 เฉพาะ) เนื้องอกในหนูแบกช่วยเพิ่มการป้องกันภูมิคุ้มกันมะเร็งนำไปสู่การอยู่รอดของเนื้องอกฟรีในรูปแบบเมาส์ต่างๆ5 หมาสายพันธุ์เซลล์เนื้องอกมะเร็งเช่นมะเร็งต่อมน้ำเหลือง, มะเร็งผิวหนัง, เนื้องอกลำไส้ใหญ่มะเร็งโรคมะเร็งเต้านมและGlioma (Sugamura et al, ธรรมชาติเรฟอิม 2004; 4: 420-. 431) จะได้รับการเสนอให้เพิ่มการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันของเลี้ยงลูกด้วยนมไปยังแอนติเจนโดยมีส่วนร่วม OX4OR ผ่านการใช้งานของตัวแทนที่มีผลผูกพัน OX4OR (Int 10 แพ็ Publ เลขที่ WO... 99/42585). แม้ว่าเอกสารหมายโดยทั่วไปจะ OX40- ตัวแทนผูกพันเน้นอยู่ในการใช้งานของ OX4OL หรือชิ้นส่วนของมันที่การเปิดเผยของแอนติบอดีต่อต้านOX40 อยู่ในบริบทของความเป็นอยู่ของพวกเขาเทียบเท่ากับOX4OL อันที่จริงเมื่อทีม Weinberg (Weinberg et al, J Immunther 2006; 29:. 575-585) แปลวิจัยเพื่อการศึกษาที่มีบิชอพที่ไม่ใช่มนุษย์ที่พวกเขาอีกครั้ง 15 จงใจเลือกแอนติบอดีที่ผูกไปยังเว็บไซต์ OX40L-ผูกพันและทั่วไปเลียนแบบ OX4OL. อัล Shamkhani et al, (Eur J Chem 1996; 26: 1695-1699) ที่ใช้ป้องกัน OX40 เรียกว่าแอนติบอดี OX86 ซึ่งไม่ได้ปิดกั้น OX40L ผูกพันเพื่อสำรวจการแสดงออกของความแตกต่างของOX40 บนเมาส์เปิดใช้งาน T-เซลล์ และ Hirschhorn- 20 Cymerman et al, (J Med Exp 2009; 206: 1103-1116) ที่ใช้ร่วมกับ OX86 cyclophosphamide ในรูปแบบเมาส์เป็น chemoimmunotherapy ที่มีศักยภาพ. อย่างไรก็ตาม OX86 จะไม่ได้คาดหวังว่าจะผูกฮิวเมน OX40 และเมื่อเลือกแอนติบอดีที่จะมีประสิทธิภาพในการมนุษย์หนึ่งจะอยู่ในแสงไฟของ Weinberg ทำงานเลือกแอนติบอดีที่ไม่ผูกที่ OX40L ผูกพันเว็บไซต์. 25 ในร่างกาย ligation ของฮิวเมน CD134 รีเซปเตอร์ (โดยแอนติ - ฮิวเมน CD134 - แอนติบอดี้ที่เฉพาะเจาะจงซึ่งมีปฏิสัมพันธ์กับโดเมน OX4OL ผลผูกพันกับมนุษย์CD134 สหรัฐ 2009/0214560 อัล) ในภูมิคุ้มกันโรคเพียงพอรวมกันอย่างรุนแรง (SCID) หนูเพิ่มภูมิคุ้มกันป้องกันมะเร็งซึ่งนำไปสู่การเจริญเติบโตของเนื้องอกในการยับยั้งการต่างๆของมนุษย์สายพันธุ์เซลล์เนื้องอกมะเร็งเช่นมะเร็งต่อมน้ำเหลืองมะเร็งต่อมลูกหมากลำไส้ใหญ่30 โรคมะเร็งและโรคมะเร็งเต้านม. กลไกที่แน่นอนของฮิวเมน CD134 ligation พึ่งป้องกันมะเร็งตอบสนองภูมิคุ้มกันในมนุษย์ไม่ได้อธิบายแต่เป็นความคิดที่จะพึ่งผ่านทางเดินสัญญาณรน CD134 ที่ถูกกระตุ้น โดย3 มีปฏิสัมพันธ์กับ OX4OL ปฏิกิริยานี้เป็นผู้ไกล่เกลี่ยโดยมีผลผูกพันของ OX4OL trimeric เพื่อ CD134 ในการรักษาในปัจจุบันการป้องกันมะเร็งการใช้ trimerized แกนด์ OX40 มีการเสนอเป็นตัวแทนที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่าแอนติบอดีต่อต้าน OX40 (มอร์ริสและอัล Mol Immunol 2007; 44:. 3112-3121). 5 บทสรุปของการประดิษฐ์การประดิษฐ์นี้ให้ bindin •โมเลกุลซึ่งประกอบรวมด้วย(ก) บริเวณแปรผันสายหนักซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของตัวเลข10 27 หรือแตกต่างจากลำดับว่ามี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโนและ/ หรือ(ข) บริเวณแปรผันสายเบาซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของตัวเลข 27 หรือแตกต่างจากลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโน. การประดิษฐ์เพิ่มเติมให้โมเลกุลยึดเกาะซึ่งประกอบรวมด้วย15 (ก) บริเวณแปรผันสายหนักซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของตัวเลข26 หรือแตกต่างจากลำดับว่ามี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโน; และ / หรือ(ข) บริเวณแปรผันสายเบาซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของตัวเลข 26 หรือแตกต่างของลำดับที่มี 1, 2 หรือ 3 แทนกรดอะมิโนที่. 20 ในบาง embodiments ที่แยกผูกพันโมเลกุลผูกกับ มนุษย์CD134 โมเลกุลยึดเกาะ s ของการประดิษฐ์อาจไม่สามารถป้องกันฮิวเมน CD134 (OX40) รีเซปเตอร์ผูกพันกับแกนด์ OX40 (OX401.4). ดังกล่าวโมเลกุลยึดเกาะ s ที่เหมาะสมรวมถึงแอนติ -CD134 แอนติบอดี antigen- มีผลผูกพันชิ้นส่วนของแอนติ -CD134 แอนติบอดีและอนุพันธ์ของแอนติ -CD134 25 แอนติบอดี ในบาง embodiments โมเลกุลยึดเกาะผูกกับฮิวเมน CD134 กับกา 1 x 10.7 M หรือน้อยกว่า โมเลกุลยึดเกาะกิจกรรมตัวเอกที่มีต่อฮิวเมน CD134 ใน T- เซลล์ effector และ / หรือกิจกรรมที่เป็นปฏิปักษ์ในฮิวเมน CD134 ในเซลล์T-ควบคุม ใน embodiments เพิ่มเติมบางโมเลกุลยึดเกาะเป็นมนุษย์แอนติบอดีที่เฉพาะผูกฮิวเมนCD134 กับกา 100 นาโนเมตรหรือ 30 น้อยเช่นน้อยกว่า 50nm หรือน้อยกว่า 20 นาโนเมตร. การประดิษฐ์นี้ยังมี องค์ประกอบที่ประกอบรวมด้วยหนึ่งหรือมากกว่าของโมเลกุลยึดเกาะs และผู้ให้บริการได้รับการยอมรับ pharmaceutically ในบาง embodiments ที่โมเลกุลยึดเกาะเป็นมนุษย์โมโนโคลนอลแอนติ -CD134 แอนติบอดีหรือ4 ส่วนแอนติเจนผูกพันของมัน องค์ประกอบอาจส่งเสริมการประกอบรวมด้วยตัวแทนยาเพิ่มเติมเช่นตัวแทน immunotherapeutic, ยาเคมีบำบัดและการรักษาตัวแทนของฮอร์โมน. การประดิษฐ์นี้ต่อไปให้วิธีการวินิจฉัยและการรักษาที่ 5 ของการใช้โมเลกุลยึดเกาะของ ในบาง embodiments จะให้วิธีการของการรักษาหรือป้องกันโรคมะเร็งในเลี้ยงลูกด้วยนมที่ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้ไปเลี้ยงลูกด้วยนมปริมาณที่มีประสิทธิภาพทางการรักษาของโมเลกุลยึดเกาะหรือองค์ประกอบซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลยึดเกาะเป็นที่เปิดเผยในที่นี้ ในบาง embodiments อื่น ๆ ที่การเปิดเผยมีวิธีในการเพิ่มการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในการเลี้ยงลูกด้วยนมเป็น10 ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้การเลี้ยงลูกด้วยนมที่ปริมาณที่มีประสิทธิภาพทางการรักษาของโมเลกุลยึดเกาะหรือองค์ประกอบซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลยึดเกาะ ในบางembodiments ที่โมเลกุลยึดเกาะใช้ในวิธีการที่เป็นมนุษย์โมโนโคลนอล. แอนติ -CD134 แอนติบอดีหรือส่วนแอนติเจนผูกพันของมันซึ่งผูกกับฮิวเมนCD134 ประเด็นแอนติบอดีไม่ได้ป้องกันฮิวเมน CD134 (OX40) 15 รีเซปเตอร์ผูกพันกับแกนด์ OX40 (OX401). การประดิษฐ์นี้ต่อไปให้โมเลกุลของกรดนิวคลีอิกที่เข้ารหัสลำดับกรดอะมิโนของโมเลกุลยึดเกาะ, เวกเตอร์ซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิกเช่นเซลล์โฮสต์ซึ่งประกอบ รวมด้วยเวกเตอร์และวิธีการจัดทำโมเลกุลยึดเกาะ s. 20 การเปิดเผยนอกจากนี้ยังมีด้านอื่น ๆ ซึ่งจะเห็นได้ชัดจากการเปิดเผยทั้งหมด, ที่รวมถึงการเรียกร้อง. รายละเอียดของตัวเลข25 รูปที่ 1 แน่นอนเวลา และปริมาณผลกระทบจากการสัมผัสกับ PHA-M บนพื้นผิวของมนุษย์แสดงออกCD134 ของมนุษย์ทีลิมโฟไซต์. รูปที่ 2 ฮิวเมน CD134 แสดงออกในที่พำนักและ PHA-M-เปิดใช้งานฮิวเมน CD4 ทีลิมโฟไซต์. เต็มตัว 3. ลักษณะการผูกเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 30 ACT35 โคลน 12,113 และโคลน 20E5 ใน PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134. แสดงทีลิมโฟไซต์5 รูปที่ 4 เข้าเล่มเมาส์แอ นติ -. ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลนและโคลน 12,113 20E5 ใน PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง CD4 ทีลิมโฟไซต์และ CD8 T ลิมโฟไซต์รูปที่5 ข้ามการแข่งขันที่ไม่ติดป้ายแอเมาส์ นติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดี 5 โคลน 12H3 หรือโคลน 20E5 ด้วยเมาส์พาณิชย์ PE-ผันแอนติ -CD134 แอนติบอดีโคลน ACT35 หรือโคลน L106 ใน PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดงทีลิมโฟไซต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. แอนติ - cd134 ( ox40 ) แอนติบอดีและการใช้ของมัน

โปรแกรมปัจจุบันการเรียกร้องความสำคัญจาก ep13159794.0 ยื่นวันที่ 18 มีนาคม 2013 .
5
สนามของการประดิษฐ์


การประดิษฐ์เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีที่ใช้ เช่น แอนติบอดีและ
โดยแอนติบอดีที่ผูกกับ cd134 humanized , รักษา มะเร็ง



10พื้นหลังของการประดิษฐ์
การเพิ่มฟังก์ชั่นป้องกันเนื้องอกจากเป็นวิธีการเฉพาะสำหรับ
รักษามะเร็ง มีหลักฐานมากว่าเนื้องอก ' หนี '
15 ระบบภูมิคุ้มกันโดยการใช้ภูมิคุ้มกันความอดทน ( โดยส่วนใหญ่บริษัทลิมโฟไซต์
T ( ทีเร็กส์ ; quezda et al . immunol Rev 2011 ; 241:104-118 )
ดังนั้นความสมดุลระหว่างหน่วยปฏิบัติงาน ( เช่น โดยตรงหรือทางอ้อม ทำลายเซลล์มะเร็งลิมโฟไซต์
) t ( teffs ) และ tolerogenic ( เช่น การปราบปราม teffs
( ฟังก์ชันการอยู่รอดและ ) ทีเร็กส์จะปรากฏเป็นสำคัญที่มีประสิทธิภาพต่อต้านเนื้องอก 20 immunotherapy . ในคำอื่น ๆที่มีประสิทธิภาพต่อต้านเนื้องอกภูมิคุ้มกันสามารถ
ได้โดยการเพิ่มฟังก์ชันของ teffs ( เฉพาะเนื้องอกและ / หรือปราบปรามการทำงานของทีเร็กส์เฉพาะ
ลดบวม เป็นรีเซปเตอร์คีย์ที่มี
ถูกแสดงไกล่เกลี่ยการตอบสนองเหล่านี้เป็น cd134 ( ox40 ) รีเซปเตอร์ . ( sugamura
, K , อิชิ , N , ที่สุด , A . การรักษาเป้าหมายของโต้งจากการ 25 โมเลกุล ox40 Co . ธรรมชาติของอิม 2004 ; 4 :420-431 )
cd134 ( ยังเป็นที่รู้จัก ox40 tnfrsf4 , และ act35 ) เป็นสมาชิกของเนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัยรีเซปเตอร์ซูเปอร์แฟมิลี . นี้ผิว cd134 Co รีเซปเตอร์แสดงการใช้ t ลิมโฟไซต์และมีบทบาทสำคัญใน
อยู่รอดของพวกเขาและฟังก์ชันการปรากฏตัวของ cd134 แสดง T ลิมโฟไซต์มี 30 ถูกแสดงในมนุษย์มะเร็งเนื้องอกต่าง ๆและในการระบาย
ต่อมน้ำเหลืองของผู้ป่วยมะเร็ง ( แรมสตัด et al . เป็นเจ surg 2000 ; 179 : 400-406 ;
vetto et al . เป็น surg 1997 174 : J ;
2







258-265 )ชนิดของเมาส์ cd134 Ligation รีเซปเตอร์ ( โดยให้ละลายเมาส์ ox40 ลิแกนด์ ( ox400 ฟิวชันโปรตีนอิมมูโนโกลบูลิน หรือ mimetics ox4ol เมาส์ , เมาส์แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงเช่น anti cd134 ) เนื้องอกเรืองหนูเพิ่ม Anti -
เนื้องอกภูมิคุ้มกันทำให้เกิดเนื้องอกฟรีการอยู่รอดในเมาส์รุ่นต่างๆ
5 ~ เนื้อร้ายเนื้องอก เซลล์มะเร็ง เช่น า , เนื้องอก , ก้อนเนื้อมะเร็งลําไส้ใหญ่
โรคมะเร็ง โรคมะเร็งเต้านม และเซลส์ ( sugamura et al . ธรรมชาติของอิม 2004 ; 4 : 420 -

แล้ว ) ก็มีการเสนอเพื่อเพิ่มการตอบสนองของภูมิคุ้มกันของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเพื่อ
แอนติเจนโดยมีส่วนร่วม ox4or ผ่านการใช้งานของ ox4or ผูกตัวแทน ( int 10 แพท PUBL . ไม่ wo 99 / 42585 ) ถึงแม้ว่าเอกสารอ้างอิงโดยทั่วไป ox40 -
ผูกตัวแทน เน้นการใช้ ox4ol หรือส่วนของมัน
,การเปิดเผยของ anti-ox40 antibodies ในบริบทของการเทียบเท่า
ox4ol . แน่นอน เมื่อทีม Weinberg ( Weinberg et al . เจ immunther 2006 ; 29 :
575-585 ) แปลงานวิจัยการศึกษากับมนุษย์สัตว์ที่พวกเขาอีกครั้ง 15 จงใจเลือกแอนติบอดีที่ผูกกับ ox40l มัดเว็บไซต์และโดยทั่วไปเลียนแบบ ox4ol
.
อัล shamkhani et al . ( EUR J Chem 1996 ; 26 :1695-1699 ) ใช้ anti-ox40
แอนติบอดีที่เรียกว่า ox86 ซึ่งไม่ได้ปิดกั้น ox40l ผูก เพื่อสำรวจ
แสดงออกที่แตกต่างกันของ ox40 เซลล์ใช้เมาส์ และ hirschhorn -
20 cymerman et al . ( J Exp Med 2009 ; 206 : 1103-1116 ) ใช้ ox86 ร่วมกับ
ด้วยการใช้เมาส์ในรูปแบบเป็น chemoimmunotherapy ที่มีศักยภาพ
อย่างไรก็ตาม