Total RNA was isolated using Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) to measure the mRNA expression of procollagen I and MMP-1. A total of 1g of RNA was reverse-transcribed in a reaction mixture containing 2L of 0.1 M DTT, 1L of random primer 4L of a 2.5 mM dNTP mixture, 0.2L of M-MLV reverse transcriptase, 1L of RNase inhibitor (20–40 U/L; Promega, Madison, WI, USA), and 4L of RT 5X buffer (250 mM Tris–HCl, pH 8.3, 375 mMKCl, and 15 mM MgCl2)
อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกโดยใช้ Trizol รีเอเจนต์ (Invitrogen คาร์ลส CA, USA) วัดค่า mRNA ของ procollagen ฉันและ MMP-1 จำนวน 1 กรัมของอาร์เอ็นเอถูกทับศัพท์กลับในส่วนผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 2 L 0.1 เมตร DTT, 1L พื้นสุ่ม 4L ผสม dNTP 2.5 mM, L M MLV กลับ transcriptase 0.2, 1L ของสารยับยั้ง RNase (20-40 U/L Promega เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา), และ 4L X RT 5 บัฟเฟอร์ (250 mM ตรี – HCl, pH 8.3, 375 mMKCl และ 15 มม. MgCl2)
การแปล กรุณารอสักครู่..

อาร์เอ็นเอรวมที่แยกการใช้สาร Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) เพื่อวัดการแสดงออกของ mRNA ของฉัน procollagen และ MMP-1 รวม 1g ของอาร์เอ็นเอที่ถูกย้อนกลับคัดลอกในผสมปฏิกิริยาที่มี 2L 0.1 M DTT, 1L ของไพรเมอร์แบบสุ่มของ 4L 2.5 มิลลิ dNTP ผสม 0.2L ของ M-MLV transcriptase ย้อนกลับ 1L ของ RNase ยับยั้ง (20-40 U / L; Promega, แมดิสัน, USA) และ 4L ของ buffer RT 5X (250 มิลลิ Tris-HCl, pH 8.3, 375 mMKCl, และ 15 มิลลิ MgCl2)
การแปล กรุณารอสักครู่..

อาร์เอ็นเอทั้งหมดได้ใช้ trizol Reagent ( Invitrogen Carlsbad , CA , USA ) วัดของการแสดงออกของโปรคอลลาเจน และ mmp-1 . รวมเป็น 1G ของ RNA ถูกย้อนกลับและปฏิกิริยาผสมที่ประกอบด้วย 2L 0.1 M ส่วน 4L 1 ลิตรของรองพื้นสุ่มของ 2.5 มม. dntp ผสม 0.2l ของ m-mlv reverse transcriptase inhibitor ( 1 ลิตรของเลส , 20 – 40 U / L ; promega เมดิสัน , WI , USA )4L ของ RT 5x และบัฟเฟอร์ ( 250 มม. นอกจากนี้ – HCl , pH 8.3 , 375 mmkcl และ 15 มม. MgCl2 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
