Transformation of H. pluvialis H. p

Transformation of H. pluvialis
H. pluvialis was transformed using the PDS-1000/He particle delivery system (BioRad) according to the manufacturer's instructions. 1 μg plasmid or linear DNA was used to coat 0.6 μm gold particles (BioRad). Two-four days after diluting stationary H. pluvialis culture (hereby, referred as 2–4 days old), 2–10 million cells, were plated onto TAP medium, 1.5% agarose and were bombarded from a distance of 6 cm using 1350 psi rupture disks. Two separate bombardments were conducted with each construct. DNA was omitted from control and bombarded once. After 1 night of recovery, cells were removed from the bombarded plates using TAP medium, and divided into two TAP plates supplement-
ed with either 2 or 5 μM norflurazon. Transformed colonies started to
appear after 8–28 days of incubation at optimal conditions of 20–
40 μmol photon × m−2 × s−1, 25°C

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเปลี่ยนแปลงของ H. pluvialis H. pluvialis ถูกเปลี่ยนไปใช้ PDS-1000/เขา อนุภาคส่งระบบ (BioRad) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต 1 μg plasmid หรือเชิงเส้นดีเอ็นเอถูกใช้เพื่อตราอนุภาค μm ทอง 0.6 (BioRad) 2 4 วันหลังจาก diluting วัฒนธรรม pluvialis H. เครื่องเขียน (ขอ เรียกว่าเป็น 2-4 วัน), 2-10 ล้านเซลล์ ถูกชุบไปเคาะกลาง 1.5% agarose และได้ระดมยิงจากระยะไกลของ 6 ซม.ใช้ดิสก์แตก 1350 psi Bombardments สองแยกต่างหากได้ดำเนินการกับแต่ละโครงสร้าง ดีเอ็นเอถูกตัดออกจากการควบคุม และระดมยิงครั้งเดียว หลังจากกู้คืน 1 คืน เซลล์ถูกลบออกจากแผ่น bombarded ใช้เคาะกลาง และแบ่งออกเป็นสองเคาะแผ่นเสริม-ed ด้วย 2 หรือ 5 norflurazon μM เริ่มแปรรูปอาณานิคมปรากฏหลังจากบ่มในสภาวะที่ 20 – วันที่ 8-2840 μmol s−1 ซื้อเราซื้อ m−2, 25° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเปลี่ยนแปลงของ H . สีเขียว
H . สีเขียวได้เปลี่ยนการใช้ pds-1000 / เขาอนุภาคระบบส่ง ( biorad ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต 1 μ G พลาสมิดดีเอ็นเอถูกใช้เพื่อขนหรือเส้น 0.6 μทองอนุภาค ( biorad ) สองสี่วันหลังจากที่เจือจางวัฒนธรรม ( H . สีเขียว ( ขอเรียกเป็น 2 – 4 วัน ) อายุ 2 – 10 ล้านเซลล์ ถูกชุบลงแตะกลาง , 15 % , ถูกระดมยิงจากระยะ 6 ซม. ใช้ 1350 psi ฉีกดิสก์ สองแยก bombardments การทดลองแต่ละสร้าง ดีเอ็นเอถูกละเว้นจากการควบคุมและระดมยิงครั้งเดียว หลังจาก 1 คืน การกู้คืน เซลล์ถูกเอาออกจากการระดมยิงแผ่นแตะกลาง และแบ่งออกเป็นสองเคาะแผ่นเสริม -
เอ็ดกับทั้ง 2 หรือ 5 μ M หรือfl urazon .กลายเป็นอาณานิคมเริ่ม
ปรากฏหลังจาก 8 – 28 วันของการบ่มที่สภาวะที่เหมาะสมของ 20 – 40 μ mol photon
× m − 2 × s − 1 , 25 ° C