2.4.1.2. Stable isotope dilution as

2.4.1.2. Stable isotope dilution assay

Before extraction, labelled standards of folate vitamers were added and all folates were deconjugated into their monoglutamate forms. Vitamers were purified on SPE SAX cartridges after adding acetonitrile (10 ml) and centrifugation. Folate analysis was carried out on an HPLC (Shimadzu Inc., Kyoto, Japan) coupled with a triple quadrupole mass spectrometer (API 4000 Q-Trap, AB-Sciex, Foster City, CA, USA). A Pro-C18 HPLC-column (150 × 3, 3 μm, 130 Å, YMC, Japan) with water plus 0.1% (v/v) formic acid (A) and acetonitrile plus 0.1% (v/v) formic acid (B) as mobile phases was used. The gradient started at 5% B. After a linear increase to 10% B in 5 min and holding this condition for 5 min, another linear increase to 15% B during 10 min and to 50% B in 2 min, which was maintained for 2 min. Within 2 min B was decreased linearly to 5% and the column was equilibrated for 9 min.

Concentration of the single vitamers in the food samples was calculated using the response factors reported recently (Ringling & Rychlik, 2013). For more experimental details see Ringling and Rychlik (2013).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4.1.2 ทดสอบการเจือจางไอโซโทปก่อนที่จะสกัดมาตรฐานที่มีข้อความของ vitamers โฟเลตมีการเพิ่มและโฟเลตทั้งหมดถูก deconjugated ในรูปแบบของพวกเขา monoglutamate Vitamers บริสุทธิ์ในตลับ SPE แซ็กโซโฟนหลังจากที่เพิ่ม acetonitrile (10 มล.) และการหมุนเหวี่ยง การวิเคราะห์โฟเลตได้ดำเนินการบน HPLC (Shimadzu อิงค์เกียวโตญี่ปุ่น) ควบคู่ไปกับการวิเคราะห์มวล quadrupole สาม (API 4000 Q-Trap, AB-Sciex, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) มืออาชีพ-C18 HPLC คอลัมน์ (150 × 3, 3 ไมโครเมตร 130, YMC ญี่ปุ่น) ด้วยน้ำบวก 0.1% (v / v) กรดฟอร์มิค (A) และ acetonitrile บวก 0.1% (v / v) กรดฟอร์มิค ( B) เป็นขั้นตอนที่ใช้โทรศัพท์มือถือ ลาดเริ่มต้นที่ 5% B. หลังจากที่เพิ่มขึ้นเชิงเส้นถึง 10% บี 5 นาทีและถือภาวะนี้เป็นเวลา 5 นาทีอีกเชิงเส้นเพิ่มขึ้นถึง 15% ในช่วง B 10 นาทีและ 50% B ใน 2 นาทีซึ่งได้รับการรักษา 2 นาที ภายใน 2 นาที B ลดลงเป็นเส้นตรงถึง 5% และคอลัมน์ที่ถูก equilibrated 9 นาที. ความเข้มข้นของ vitamers เดียวในตัวอย่างอาหารที่ถูกคำนวณโดยใช้ปัจจัยการตอบสนองรายงานเมื่อเร็ว ๆ (Ringling และ Rychlik 2013) สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมโปรดดูที่การทดลอง Ringling และ Rychlik (2013)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4.1.2 . ไอโซโทปเสถียร เจือจาง )

ก่อนการสกัดข้อความมาตรฐานของโฟเลต vitamers เพิ่มและโฟเลตยังไม่รวมตัวกันในรูปแบบ monoglutamate ของพวกเขา vitamers มีความบริสุทธิ์ในตลับ แซ็ค เอสพี หลังจากเพิ่มไน ( 10 ml ) และ 3 . การวิเคราะห์ โฟเลตเป็นดําเนินการเกี่ยวกับ HPLC ( Shimadzu อิงค์ , เกียวโตญี่ปุ่น ) คู่กับสามสี่ขั้วแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( API 4000 q-trap , AB sciex ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา เป็น pro-c18 HPLC คอลัมน์ ( 150 × 3 , 3 μ M 130 กริพเพน ymc , ญี่ปุ่น ) กับน้ำ บวก 0.1% ( v / v ) กรด ( ) และไนบวก 0.1 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กรด ( B ) เป็นเฟสเคลื่อนที่ที่ใช้ การไล่ระดับสีเริ่มที่ 5 เปอร์เซ็นต์ หลังจากเส้นเพิ่ม 10 % B ใน 5 นาที และถือเงื่อนไขนี้สำหรับ 5 นาทีเส้นเพิ่มอีก 15 % B ในช่วง 10 นาที และ 50 % B ใน 2 นาที , ซึ่งเป็นประมาณ 2 นาที ภายใน 2 นาที บี ลดลงเฉลี่ย 5% และคอลัมน์ equilibrated 9 นาที

ความเข้มข้นของ vitamers เดียวในตัวอย่างอาหาร คำนวณโดยใช้ปัจจัยการรายงานเมื่อเร็ว ๆนี้ ( Ringling & rychlik 2013 ) สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมและทดลองเห็น Ringling rychlik ( 2013 )