A rapid sandwich enzyme-linked immu

A rapid sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)-based in vitro diagnostic (IVD) procedure has been developed for human fetuin A (HFA), an important disease biomarker for inflammatory diseases as well as malignancies. In this simplified and cost-effective procedure, the EDC-activated anti-HFA antibody (Ab) was admixed with 1% (v/v) 3-aminopropyltriethoxysilane (APTES) in 1:1 (v/v) and dispensed in a KOH-pretreated microtiter plate (MTP). APTES formed a stable complex with the capture antibody that was in turn covalently bonded on the KOH-treated surface in 30 min. The resulting immunoassay (IA) format detects HFA with a dynamic range of 0.1–243 ng mL−1, and a limit of detection (LOD) and analytical sensitivity of 0.3 ng mL−1 and 1.0 ng mL−1, respectively. For the determination of HFA spiked in diluted human whole blood and serum, and HFA in ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)-plasma of patients, the obtained analytical precision is similar to that of the conventional sandwich ELISA. The anti-HFA Ab-bound MTPs, stored at 4 °C in 0.1 M PBS, pH 7.4, retained its biological activity for 8 weeks, thereby demonstrating excellent storage stability. This generic sandwich ELISA procedure can be extended for rapid, simplified and cost-effective detection of other disease biomarkers.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวิเคราะห์เอนไซม์ลิงค์ immunosorbent แซนวิชอย่างรวดเร็ว (ELISA) -ขั้นตอนการใช้เครื่องมือวินิจฉัย (ภายนอกร่างกายได้รับการพัฒนาสำหรับมนุษย์ fetuin A (HFA), ไบโอมาร์คเกอร์โรคสำคัญโรคอักเสบเป็น malignancies ในวิธีนี้ง่าย และคุ้มค่า EDC ที่ใช้ป้องกัน-HFA แอนติบอดี (Ab) ที่ admixed กับ 1% (v/v) 3-aminopropyltriethoxysilane (APTES) ใน 1:1 (v/v) และคำใน microtiter pretreated เกาะจาน (MTP) APTES ก่อตั้งขึ้นคอกด้วยแอนติบอดีจับที่โยมจะ covalently บนผิวถือว่าเกาะใน 30 นาที รูป immunoassay (IA) ได้ตรวจพบ HFA ช่วงแบบไดนามิกของ 0.1 – 243 ng mL−1 และข้อจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) และวิเคราะห์ความไวของ 0.3 ng mL−1 1.0 ng mL−1 ตามลำดับ สำหรับการกำหนด HFA spiked ทั้งเลือดมนุษย์แตกออกและซีรั่ม และ HFA ในกรด ethylenediaminetetraacetic (EDTA) -พลาสมาของผู้ป่วย ได้รับวิเคราะห์ความแม่นยำคือแซนด์วิชแบบ ELISA MTPs ผูกกับ HFA Ab ป้องกัน จัดเก็บที่ 4 ° C ใน PBS 0.1 M ค่า pH 7.4 รักษากิจกรรมชีวภาพของ 8 สัปดาห์ จึงเห็นความมั่นคงแห่งเก็บไว้ แซนด์วิชนี้ทั่วไปวิธี ELISA สามารถขยายตรวจ biomarkers โรคอื่น ๆ อย่างรวดเร็ว ง่าย และคุ้มค่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนแซนวิชอย่างรวดเร็ว (ELISA) ชั่นในหลอดทดลองการวินิจฉัย (IVD) ขั้นตอนที่ได้รับการพัฒนาสำหรับมนุษย์ fetuin (HFA), โรค biomarker สำคัญสำหรับโรคอักเสบรวมทั้งโรคมะเร็ง ในขั้นตอนนี้ง่ายและค่าใช้จ่ายที่มีประสิทธิภาพ, EDC-เปิดใช้งานแอนติบอดี้ต่อต้าน HFA (Ab) ได้รับการผสมกับ 1% (v / v) 3 aminopropyltriethoxysilane (APTES) ใน 1: 1 (v / v) และจ่ายในเกาะ -pretreated แผ่นไมโคร (MTP) APTES ที่เกิดขึ้นมีความซับซ้อนที่มั่นคงกับแอนติบอดีจับภาพที่อยู่ในทางกลับถูกผูกมัด covalently บนพื้นผิว KOH-รับการรักษาใน 30 นาที immunoassay ผล (IA) รูปแบบตรวจจับ HFA กับช่วงแบบไดนามิกของ 0.1-243 ศึกษา mL-1 และขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) และความไวของการวิเคราะห์ศึกษา 0.3 ML-1 และ 1.0 มิลลิลิตรศึกษา-1 ตามลำดับ สำหรับความมุ่งมั่นของ HFA ถูกแทงในเลือดเจือจางทั้งมนุษย์และซีรั่มและ HFA ในกรด ethylenediaminetetraacetic (EDTA) -plasma ของผู้ป่วยที่มีความแม่นยำในการวิเคราะห์ที่ได้จะคล้ายกับที่ของ ELISA แซนวิชธรรมดา MTPs ต่อต้าน HFA Ab ผูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสใน 0.1 M พีบีเอสพีเอช 7.4, สะสมฤทธิ์ทางชีวภาพของมันเป็นเวลา 8 สัปดาห์จึงแสดงให้เห็นถึงการเก็บรักษาที่ดีเยี่ยม ขั้นตอนนี้วิธี sandwich ELISA ทั่วไปสามารถขยายได้อย่างรวดเร็วสำหรับการตรวจสอบง่ายและค่าใช้จ่ายที่มีประสิทธิภาพของ biomarkers โรคอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รวดเร็วแซนวิช enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) เป็นฐานในการวินิจฉัย ( IVD ) ขั้นตอนที่ได้รับการพัฒนาสำหรับมนุษย์คน ( หัว ) ที่สำคัญโรคไบโอมาร์คเกอร์สำหรับการอักเสบ ตลอดจนการเกิดเนื้อร้าย ในขั้นตอนนี้ง่ายและมีประสิทธิภาพ , EDC กระตุ้นแอนติบอดีต่อต้านหัว ( AB ) คือผสม 1% ( v / v ) 3-aminopropyltriethoxysilane ( aptes ) 11 ( v / v ) และจ่ายในเกาะผ่านไมโครเพลท ( MTP ) aptes รูปแบบที่ซับซ้อนมั่นคงกับจับแอนติบอดีที่ในการเปิด covalently ที่อยู่บนเกาะรักษาผิวใน 30 นาที ส่งผลให้ผู้ป่วย ( IA ) รูปแบบตรวจจับหัวที่มีช่วงแบบไดนามิกของ 0.1 – 243 ของ− 1 มิลลิลิตร และขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) และความไวเชิง 0.3 ของมล − 1 สำหรับ ของ− 1 มิลลิลิตร ตามลำดับเพื่อการตัดสินใจของหัวหนามในเลือดเจือจางและมนุษย์ทั้งเซรั่ม และหัวบอน acid ( EDTA ) ในพลาสมาของผู้ป่วย , รับวิเคราะห์ความเที่ยงตรงจะคล้ายกับที่ของแซนวิชธรรมดาวิธีอีไลซ่า ต่อต้าน mtps AB ผูกหัว อุณหภูมิ 4 องศา C ใน 0.1 M พีบีเอส pH 7.4 รักษากิจกรรมทางชีวภาพของเป็นเวลา 8 สัปดาห์ จึงแสดงให้เห็นถึงเสถียรภาพการจัดเก็บที่ดีนี่แซนด์วิชทั่วไป Elisa ขั้นตอนสามารถขยายไปอย่างรวดเร็วง่ายและการตรวจหาโรคอื่น ๆซึ่งประหยัดต้นทุน