A novel homogenous fluorescent sens

A novel homogenous fluorescent sensor for signal-on detection of Cu2+ has been developed based on intra-molecular G-quadruplex formed by DNA-templated click reaction and crystal violet (CV) as label-free signal reporter. The clickable DNA probe consists of two G-rich strands (A and B) bearing azide and alkyne group, respectively, and a template strand (C) locating two proximate reactants by pairing with A and B. The sequences of A and B are derived from asymmetric split of the G-quadruplex sequence (TTAGGG)4. In the presence of Cu2+, the whole G-quadruplex sequence A-B is generated by chemical ligation of A and B via copper ion-catalyzed alkyne-azide cycloaddition, then released from template by toehold strand displacement, and consequently forming a stable intra-molecular G-quadruplex, which binds with CV to generate a strong fluorescent signal. Oppositely, weak fluorescence was obtained without Cu2+ because of unstable intermolecular G-quadruplex formed by A and B and lack of lateral loop connection. Therefore, the Cu2+ can be sensitively and specifically detected by the fluorescence of the CV-stained G-quadruplex with a low detection limit of 65nM and a linear range of 0.1-3μM. This method rationally integrated the DNA-templated synthesis and G-quadruplex structure-switch, presenting a simple and promising approach for biosensor development. © 2013 Elsevier B.V.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นวนิยายให้ฟลูออเรสเซนเซอร์สำหรับตรวจจับสัญญาณบนของ Cu2 ได้ถูกพัฒนาตาม G-quadruplex ภายในโมเลกุลที่เกิดขึ้นจากดีเอ็นเอ templated คลิปฏิกิริยาและคริสตัลไวโอเลต (CV) เป็นโปรแกรมรายงานสัญญาณฟรีป้ายชื่อ โพรบ DNA คลิกได้ประกอบด้วยสอง G-ริช strands (A และ B) เรือง azide และแอลไคน์กลุ่ม ตามลำดับ และเดอะแม่ (C) ค้นหา reactants สองเคียง โดยจับคู่กับ A และเกิด ลำดับของ A และ B มาจากแยก asymmetric ลำดับ G quadruplex (TTAGGG) 4 สร้างขึ้นในต่อหน้าของ Cu2 ทั้ง G quadruplex ลำดับ A-B โดยไข่เคมีของ A และ B ผ่านทองแดงไอออนกระบวนแอลไคน์-azide cycloaddition ออกจากแม่แบบ โดยแทนที่เดอะ toehold และเป็นความมั่นคงภายในโมเลกุล G-quadruplex ที่ binds กับ CV เพื่อสร้างสัญญาณฟลูออเรสแข็งแรง ดังนั้น Oppositely, fluorescence อ่อนกล่าว โดย Cu2 เพราะเสถียร intermolecular G-quadruplex ก่อตั้งขึ้น โดย A และ B และขาดด้านข้างเชื่อมต่อลูป ดังนั้น Cu2 สามารถ sensitively และโดยเฉพาะพบ fluorescence ของ CV สี G-quadruplex จำนวนต่ำสุดที่ตรวจ 65nM และ 0.1-3μM ช่วงเชิงเส้น วิธีนี้ลูกรวมสังเคราะห์ DNA templated และ G-quadruplex โครงสร้างสลับ การนำเสนอวิธีการง่าย และกำหนดการพัฒนา biosensor © 2013 Elsevier b.v

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซ็นเซอร์เรืองแสงนวนิยายคุณสมบัติเหมือนกันกับสัญญาณในการตรวจสอบของ Cu2 + ได้รับการพัฒนาอยู่บนพื้นฐานของภายในโมเลกุล G-quadruplex เกิดจากปฏิกิริยาคลิกดีเอ็นเอแม่แบบและสีม่วงคริสตัล (CV) เป็นป้ายฟรีนักข่าวสัญญาณ สอบสวนดีเอ็นเอคลิกประกอบด้วยสองเส้น G-รวย (A และ B) azide แบกและกลุ่ม alkyne ตามลำดับและสาระแม่ (C) ตำแหน่งสองสารตั้งต้นใกล้เคียงโดยการจับคู่กับ A และ B ลำดับของ A และ B จะได้มา จากแยกไม่สมมาตรของลำดับ G-quadruplex (TTAGGG) 4 ในการปรากฏตัวของ Cu2 +, ทั้ง G-quadruplex ลำดับ AB ถูกสร้างขึ้นโดย ligation เคมีของ A และ B ผ่านทองแดงไอออนเร่ง alkyne-azide cycloaddition แล้​​วปล่อยออกมาจากแม่โดยการกำจัดซอกสาระและทำให้เกิดความมั่นคงภายในโมเลกุล G -quadruplex ซึ่งผูกกับประวัติในการสร้างสัญญาณเรืองแสงที่แข็งแกร่ง oppositely, เรืองแสงอ่อนได้โดยไม่ต้อง Cu2 + เพราะความไม่แน่นอนระหว่างโมเลกุล G-quadruplex เกิดจาก A และ B และขาดการเชื่อมต่อห่วงด้านข้าง ดังนั้น Cu2 + สามารถละม่อมและตรวจพบโดยเฉพาะการเรืองแสงของสี CV-G-quadruplex มีวงเงินการตรวจสอบต่ำของ 65nm และช่วงเชิงเส้น 0.1-3μM วิธีการนี​​้จะมีเหตุผลแบบบูรณาการสังเคราะห์ดีเอ็นเอแม่แบบและ G-quadruplex โครงสร้างสวิทช์นำเสนอวิธีการที่ง่ายและมีแนวโน้มในการพัฒนาไบโอเซนเซอร์ © 2013 เอลส์ BV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นวนิยาย homogenous เรืองแสงสำหรับสัญญาณเซ็นเซอร์ตรวจจับ CU2 ได้รับการพัฒนาบนพื้นฐานของ g-quadruplex ภายในโมเลกุลดีเอ็นเอ templated คลิกที่เกิดขึ้นจากปฏิกิริยาและคริสตัลสีม่วง ( CV ) เป็นป้ายชื่อฟรีสัญญาณนักข่าว ตรวจดีเอ็นเอคลิกได้ประกอบด้วยสองเส้น g-rich ( A และ B ) เรืองไซด์และอัลไคน์กลุ่มตามลำดับและแม่แบบเกลียว ( C ) การค้นหาสองใกล้ชิดก๊าซโดยจับคู่กับ A และ B ลำดับ A และ B ที่ได้มาจากการแยกของ g-quadruplex ลำดับ ( ttaggg ) 4 . ในการแสดงตนของ CU2 ทั้งหมดถูกสร้างขึ้นโดยลำดับ g-quadruplex AB Ligation เคมีของ A และ B ผ่านไอออนทองแดงเร่ง cycloaddition แอลไคน์ไซด์ ,จากนั้นออกจากแม่แบบโดยการ toehold เกลียวและจึงสร้างมั่นคงภายในโมเลกุล g-quadruplex ซึ่งผูกกับพันธุ์เพื่อสร้างแข็งแรง หลอดสัญญาณ ในทางตรงข้ามกัน เรืองอ่อนได้โดยไม่ต้อง CU2 เพราะไม่แน่นอน์ g-quadruplex รูปแบบโดย A และ B และขาดด้านข้าง ห่วงเชื่อม ดังนั้นซึ่งสามารถตรวจพบโดยเฉพาะ CU2 sensitively และโดยการเรืองแสงของ CV ที่เปื้อน g-quadruplex กับต่ำขีดจำกัดของรหัสและช่วงเชิงเส้นของ 0.1-3 μเมตร วิธีการนี้ได้รวมดีเอ็นเอ templated การสังเคราะห์และเปลี่ยนโครงสร้าง g-quadruplex นำเสนอวิธีการง่ายและมีแนวโน้มในการพัฒนาไบโอเซนเซอร์ . สงวนลิขสิทธิ์ 2555 ลดลงจาก