1. Plant materialsGnetum gnemon Lin

1. Plant materials
Gnetum gnemon Linn. leaves used in this study were collected from the orchard in Bang
Khan, Nakhon Si Thammarat Province, Thailand.
2. Chemicals and reagents
2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH) and butylated hydroxytoluene (BHT) were
purchased from Sigma Chemical Co., Ltd (St. Louis, MO, USA). Folin-Ciocalteu’s phenol reagent, 2,2´-
azinobis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), 2,4,6-tri(2-pyridyl)-s-triazine (TPTZ), (6-
hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2- carboxylic acid) Trolox and Gallic acid were purchased from
Fluka Chemie AG (Buchs, Switzerland). The other chemicals and solvents used in this experiment
were analytical grade.
3. Preparation of plant material
The fresh samples were collected from the orchard in Nakhon Si Thammarat Province and
kept in plastic bag in the dark room at 40
C until extraction. The raw plant materials were washed and
separated into three parts: apex, young leaves and old leaves. The color of each part was recorded
using CIE-Lab system, “a” values were considered as the visual parameter to separate the samples;
apex: a>0, young leave: (-10)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. วัสดุโรงงานสกุลมะเมื่อย gnemon Linn ใบไม้ที่ใช้ในการศึกษานี้ได้รวบรวมจากสวนในบางเชียงคาน จังหวัดนครศรีธรรมราช ไทย2. สารเคมีและสาร2.2 ได-1-picrylhydrazyl อนุมูล (DPPH) และ butylated hydroxytoluene (บาท)ซื้อจาก Sigma เคมี Co., Ltd (St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) สารฟีนอลท่อง-Ciocalteu, 2, 2´-azinobis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic กรด) (รเรียน), 2,4,6-tri(2-pyridyl)-s-triazine (TPTZ), (6-ไฮดร็อกซี่-2,5,7,8-tetramethylchroman-2 - กรดคาร์) Trolox และกรด Gallic ซื้อจากFluka Chemie AG (Buchs สวิตเซอร์แลนด์) สารเคมีและตัวทำละลายที่ใช้ในการทดลองนี้อื่น ๆได้เกรดวิเคราะห์3. เตรียมวัสดุโรงงานตัวอย่างสดที่เก็บมาจากสวนในจังหวัดนครศรีธรรมราช และเก็บไว้ในถุงพลาสติกในห้องมืดที่ 40C จนถึงแยก วัสดุดิบพืชถูกล้าง และแบ่งออกเป็นสามส่วน: เอเพ็กซ์ ใบอ่อน และใบเก่า บันทึกสีของแต่ละส่วนใช้ระบบ CIE Lab ค่า "a" ได้รับการพิจารณาเป็นพารามิเตอร์ภาพแยกตัวอย่างเอเพ็กซ์: > ปล่อยหนุ่ม 0 : (-10)(-10) คลอโรฟิลถูกแยกตามการคำอธิบาย โดย Hojnik et al. (2007) 10 กรัมบดตัวอย่างสดที่สกัด ด้วยขนาด 100 มล.ของ 90% เอทานอล และ sonicated ที่ 40° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ยาต้มที่กรอง รวบรวม และระเหยและอบแห้ง โดยการเป่าหยุด เก็บไว้ในขวดแก้ว และเก็บไว้ที่ 4° C จนถึงใช้สารสกัด4. กำหนดคลอโรฟิลล์รวมเนื้อหาสารสกัดที่ผสมในอะซีโตน 80% และมีวัด absorbance ของสารสกัดที่ 663 และ 645 nm ใช้ UV spectrophotometer (V-530, Jasco ญี่ปุ่น) ดำเนินการทดลองในสภาพมืดเพื่อลดการทำลายภาพของสี ต่อไปนี้สมการที่ใช้สำหรับการคำนวณปริมาณของเม็ดสี (มิลลิกรัม Chl L-1): Chl (a + b) = 20.21 A645 + 8.02 A663Chl (a) = 12.72 A663 – 2.69 A645Chl (b) = 22.87 A645 – 4.68 A663เป็นค่า absorbance ที่ความยาวคลื่นเท่ากัน คลอโรฟิลเนื้อหาได้แล้วแสดงน้ำหนักแห้ง (มิลลิกรัม Chl g-1) (Marcano et. al. 2005)5. การกำหนดเนื้อหาฟีนอรวมกำหนดเนื้อหาฟีนอรวมของสารสกัด ethanolic โดยท่อง – Ciocalteauวิธีการสี (Vernon et. al. 1999) บันทึก absorbance ที่ 765 nm ใช้เป็นMicroplate Reader (PowerWaveX, Biotek สหรัฐอเมริกา) และใช้กรด Gallic เป็นมาตรฐาน ผลลัพธ์ ถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากรด gallic (GAE) ต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง (dw) ทั้งหมดดำเนินการวิเคราะห์ปริมาณลข้อ (n = 3)6. วัดปริมาณของสารต้านอนุมูลอิสระทดสอบ DPPH ทำตามวิธีการของดะ et al. (1999) บางการปรับเปลี่ยน ลด absorbance ของโซลูชันได้ถูกตรวจสอบที่ 520 nm มีการMicroplate Reader (PowerWaveX, Biotek สหรัฐอเมริกา) สารสกัดจากพืชอยู่อย่างว่างเปล่าเจือจาง โดยตัวอย่าง DPPH และควบคุมอยู่โซลูชัน DPPH โดยสกัดจากพืช แต่ละคอมโพสิตอย่างถูกวิเคราะห์ลข้อ และชิ้นส่วนแต่ละใบถูกจำลองน้อยสามครั้งบาทถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก คำนวณค่าเปอร์เซ็นต์ยับยั้งตามสมการต่อไปนี้:กิจกรรม scavenging อนุมูล DPPH (%)= [Abscontrol - (Abssample - Absblank)] / Abscontrol × 100สำหรับรเรียน assay การอธิบาย โดย Arnao et al. (2001) ABTS• + รุนแรงได้สร้างขึ้น โดยปฏิกิริยาของ 7.4 มม. ABTS• + แก้ไขด้วยโซลูชัน persulfate โพแทสเซียม 2.6 มม.โดยผสมสองวิธีแก้ไขสินค้าในปริมาณที่เท่า ๆ กันและให้การตอบสนองสำหรับ 12-16 ชั่วโมงที่ห้องอุณหภูมิในสภาพมืด อนุมูลมีเสถียรภาพในแบบฟอร์มนี้มากกว่า 2 วันเมื่อเก็บที่อุณหภูมิห้องในสภาพมืด แล้วถูกเจือจางผสมปฏิกิริยา ด้วยเมทานอลให้ absorbance ของ 1.1 ± 0.02 หน่วยที่ 734 nm สารสกัดจากพืช (15 μl) ได้รับอนุญาตให้ทำปฏิกิริยากับ285 μl งก ABTS• + 2 ชั่วโมงในสภาพมืด แล้วถ่ายที่ absorbance ที่ 734 nmใช้อ่าน Microplate (PowerWaveX, Biotek สหรัฐอเมริกา) กราฟมาตรฐานเป็นเชิงเส้นในการช่วง 25-600 มม. Trolox ผลลัพธ์จะแสดงในรายการเทียบเท่า Trolox ไมครอนต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง(ไมโครโมล TE/g dw) ต้องเจือจางเพิ่มเติมถ้าค่ารเรียนที่วัดช่วงเชิงเส้นของกราฟมาตรฐานการ แต่ละอย่างประกอบถูกวิเคราะห์ลข้อ และชิ้นส่วนแต่ละใบได้จำลองน้อยสามครั้งทำการทดสอบ FRAP Benzie และสายพันธุ์ (1996) มีเอเจนต์ FRAPเตรียม โดยผสมบัฟเฟอร์อะซิเตท (300 มม. pH 3.6), การแก้ไขปัญหาของ 10 มม. TPTZ ใน HCl 40 มม. และ 20มม. FeCl3•6H2O 10:1:1 (v/v/v) และห้องอบอุ่นที่ 37 ° C ก่อนที่จะใช้ มีสารสกัดจากพืช (15 μl)สามารถทำปฏิกิริยากับ μl 285 ของเอเจนต์ FRAP 30 นาทีในสภาพมืด Absorbance ของผสมการถ่ายที่ 593 นาโนเมตร ใช้ FRAP เอเจนต์โซลูชันว่างไว้ กราฟมาตรฐานเป็นเชิงเส้นตั้งแต่ 25-800 มม. Trolox ค่า absorbance ได้ converte

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. วัสดุพืช
ผักเหมียงลินน์ ใบใช้ในการศึกษานี้ได้ถูกรวบรวมจากสวนผลไม้ในแบง
ข่านจังหวัดนครศรีธรรมราช, ไทย.
2 สารเคมีและสารเคมี
2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl รุนแรง (DPPH) และ butylated hydroxytoluene (บาท) ได้รับการ
สั่งซื้อจากซิกเคมิคอล จำกัด ( St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา) สารฟีนอล Folin-Ciocalteu ของ 2,2'-
azinobis (3 ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) (ABTS) 2,4,6-Tri (2 pyridyl) -s-triazine (TPTZ), (6-
ไฮดรอกซี -2,5,7,8-tetramethylchroman-2- กรดคาร์บอกซิ) Trolox และกรดแกลลิคที่ซื้อมาจาก
Fluka Chemie AG (Buchs วิตเซอร์แลนด์) สารเคมีอื่น ๆ และตัวทำละลายที่ใช้ในการทดลองนี้
เป็นเกรดวิเคราะห์.
3 เตรียมความพร้อมของวัสดุจากพืช
กลุ่มตัวอย่างสดถูกรวบรวมมาจากสวนผลไม้ในจังหวัดนครศรีธรรมราชและ
เก็บไว้ในถุงพลาสติกในห้องมืดที่ 40
C จนกระทั่งสกัด วัสดุพืชดิบถูกล้างและ
แยกออกเป็นสามส่วนคือเอเพ็กซ์, ใบอ่อนและใบเก่า สีของแต่ละส่วนได้รับการบันทึก
การใช้ระบบ CIE-Lab, "A" ค่าได้รับการพิจารณาเป็นพารามิเตอร์ที่ภาพเพื่อแยกกลุ่มตัวอย่าง;
เอเพ็กซ์: A> 0, ลาสาว: (-10)(-10) คลอโรฟิลถูกสกัดตาม
คำอธิบายโดย Hojnik et อัล (2007) สิบกรัมบดตัวอย่างสดถูกสกัดด้วย 100 มล.
ของเอทานอล 90% และ sonicated ที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ยาต้มถูกกรองเก็บรวบรวมและระเหย
แล้วแห้งโดยเครื่องเป่าแช่แข็ง สารสกัดถูกเก็บไว้ในขวดแก้วและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนถึงการใช้งาน.
4 การหาปริมาณคลอโรฟิลรวม
สารสกัดถูกเจือจางใน 80% อะซีโตนและการดูดกลืนแสงของสารสกัดที่ถูกวัด
ที่ 663 และ 645 นาโนเมตรโดยใช้ UV-spectrophotometer (V-530, Jasco ญี่ปุ่น) การทดลองดำเนิน
การในที่มืดเพื่อลดการทำลายภาพของเม็ดสี ต่อไปนี้
สมการถูกนำมาใช้สำหรับการคำนวณปริมาณของเม็ดสี (MG Chl L-1):
Chl (A + B) = 20.21 A645 + 8.02 A663
Chl (ก) = 12.72 A663 - 2.69 A645
Chl (ข) = 22.87 A645 - 4.68 A663
ไหนให้ค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น x เนื้อหาคลอโรฟิลจากนั้นก็
แสดงบนน้ำหนักแห้ง (MG Chl G-1) (Marcano et. al., 2005).
5 การหาปริมาณฟีนอลรวม
เนื้อหาฟีนอลรวมของสารสกัดเอทานอลที่ถูกกำหนดโดย Folin-Ciocalteau
วิธีการสี (Vernon et. al., 1999) ค่าการดูดกลืนเป็นบันทึกที่ 765 นาโนเมตรโดยใช้
ไมโครอ่าน (PowerWaveX, Biotek, สหรัฐอเมริกา) และการใช้กรดฝรั่งเศสเป็นมาตรฐาน ผล
ที่ได้รับแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากรดแกลลิ (GAE) ต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง (DW) ทั้งหมด
หาความถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า (n = 3).
6 ความมุ่งมั่นของกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระ
การวิเคราะห์ DPPH ได้ทำตามวิธีการของมาสุดะ et al, (1999) กับบางส่วน
ปรับเปลี่ยน การลดลงของการดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นคือการตรวจสอบที่ 520 นาโนเมตรที่มี
ไมโครอ่าน (PowerWaveX, Biotek, สหรัฐอเมริกา) กลุ่มตัวอย่างที่ว่างเปล่าที่มีสารสกัดจากพืช
เจือจางโดยไม่ต้อง DPPH และการควบคุมตัวอย่างวิธีการแก้ปัญหาที่มีอยู่ได้โดยไม่ต้อง DPPH สารสกัดจากพืช แต่ละ
ตัวอย่างคอมโพสิตวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่าและแต่ละส่วนใบที่ถูกจำลองแบบอย่างน้อยสามครั้ง.
บาทได้ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก มูลค่าการยับยั้งอัตราร้อยละที่คำนวณได้ตาม
สมการต่อไป:
DPPH กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ (%)
= [Abscontrol - (Abssample - Absblank)] / Abscontrol × 100
สำหรับ ABTS assay ขั้นตอนที่อธิบายโดย Arnao et อัล (2001) หัวรุนแรง ABTS • + ถูก
สร้างขึ้นจากปฏิกิริยาของ 7.4 มิลลิ ABTS • + แก้ปัญหาด้วยวิธีการแก้ปัญหา 2.6 มิลลิโพแทสเซียมเพอร์ซัลเฟตโดย
การผสมสองโซลูชั่นหุ้นในปริมาณที่เท่ากันและช่วยให้พวกเขาที่จะตอบสนองสำหรับ 12-16 ชั่วโมงที่ห้อง
อุณหภูมิในสภาพที่มืด หัวรุนแรงมีเสถียรภาพในรูปแบบนี้มานานกว่าสองวันเมื่อ
เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องอยู่ในสภาพที่มืด ผสมปฏิกิริยาถูกเจือจางแล้วกับเมทานอล
เพื่อให้การดูดกลืนแสง 1.1 ± 0.02 หน่วยที่ 734 นาโนเมตร สารสกัดจากพืช (15 ไมโครลิตร) ได้รับอนุญาตให้ทำปฏิกิริยากับ
285 ไมโครลิตรของ ABTS • + โซลูชันเป็นเวลา 2 ชั่วโมงในสภาพที่มืด จากนั้นดูดกลืนแสงที่ถูกนำมาที่ 734 นาโนเมตร
โดยใช้ไมโครอ่าน (PowerWaveX, Biotek, สหรัฐอเมริกา) เส้นโค้งมาตรฐานเชิงเส้นใน
ช่วงของ 25-600 มิลลิ Trolox ผลการค้นหาจะแสดงในเทียบเท่าไมครอน Trolox ต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง
(ไมโครโมล TE / g DW) เจือจางเพิ่มเติมเป็นสิ่งที่จำเป็นถ้าค่า ABTS วัดเป็นช่วงเชิงเส้น
ของเส้นโค้งมาตรฐาน แต่ละตัวอย่างคอมโพสิตวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่าและแต่ละส่วนใบที่ถูก
จำลองแบบอย่างน้อยสามครั้ง.
การวิเคราะห์ FRAP ได้ทำตาม Benzie และความเครียด (1996) น้ำยา FRAP ถูก
จัดทำขึ้นโดยการผสมบัฟเฟอร์อะซิเตท (300 มิลลิเมตรมีค่า pH 3.6), การแก้ปัญหา 10 มิลลิเมตร TPTZ ใน 40 มิลลิเมตร HCl และ 20
มิลลิ FeCl3 • 6H2O ที่ 10: 1: 1 (v / v / v) แล้วอบอุ่น ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสก่อนที่จะใช้ สารสกัดจากพืช (15 ไมโครลิตร) ได้รับ
อนุญาตให้ทำปฏิกิริยากับ 285 ไมโครลิตรของสาร FRAP เป็นเวลา 30 นาทีในสภาพที่มืด ค่าการดูดกลืนของ
ผสมที่ถูกนำมา 593 นาโนเมตรใช้วิธี FRAP น้ำยาเปล่า เส้นโค้งมาตรฐานเชิงเส้น
ช่วง 25-800 มิลลิ Trolox ค่าการดูดกลืนแสงได้ Converte