The estrogenic activity of the samp

The estrogenic activity of the samples was investigated using E-screen assay. Human breast cancer MCF-7
cells were initially cultured in RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS). They were
then plated onto 96-well plates at 1×103 cells/well and allowed to attach for 24 h. The medium was removed
and the wastewater samples at 5, 10 and 20% (V/V) final concentrations, in addition to 17-β-estradiol (E2) (29
nM final concentration) as positive control, were diluted in phenol-free RPMI medium supplemented with 10%
charcoal-treated FBS and then added to the cells. A separate experiment was carried out to adjust the effects of
various concentrations (Phosphate Buffer Solution PBS (-) at 5%, 10% and 20%) on the survival and
proliferation of MCF-7 cells. The cells were incubated for 6 days and the medium changed, after which 10 μL
of 5 mg/mL 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H -tetrazolium bromide (MTT) (Dojindo) was added to
each well followed by incubation for 24 h. Sodium dodecyl sulfate (SDS, 10%) was then added at 100 μL per
well, followed by incubation for another 24 h. The absorbance was then determined at 570 nm using a
multidetection microplate reader (Powerscan® HT, Biotek Instruments).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรม estrogenic ตัวอย่างถูกสอบสวนโดยใช้การทดสอบหน้าจอ E มะเร็งเต้านมมนุษย์ MCF-7เซลล์ได้เริ่มอ่างใน RPMI เสริม ด้วย serum วัว 10% และทารกในครรภ์ (FBS) พวกเขาแล้วชุบลงในแผ่นดี 96 ที่ 1 × 103 เซลล์/ดี และอนุญาตให้แนบใน 24 ชม สื่อที่ถูกเอาออกและการบำบัดน้ำเสียตัวอย่างที่ 5, 10 และ 20% (V/V) สุดท้ายความเข้ม ข้น แห่งการ 17-β-estradiol (E2) (29เข้มข้นสุดท้าย nM) เป็นตัวควบคุมบวก ถูกทำให้เจือจางในฟรีวาง RPMI เสริม ด้วย 10%ถ่านถือว่า FBS และเพิ่มเข้าไปในเซลล์ ทดลองแยกได้ดำเนินการปรับเปลี่ยนลักษณะพิเศษของ(ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชัน PBS (-) ที่ 5%, 10% และ 20%) ความเข้มข้นต่าง ๆ ในการอยู่รอด และการงอกของเซลล์ MCF-7 เซลล์ถูก incubated ใน 6 วัน และสื่อ เปลี่ยน หลังจากที่ μL 10ของ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H 5 mg/mL - tetrazolium โบรไมด์ (MTT) (Dojindo) ถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละกันตามคณะทันตแพทยศาสตร์สำหรับ 24 h. dodecyl โซเดียมซัลเฟต (SDS, 10%) แล้วเพิ่มที่ μL 100 ต่อดี ตาม ด้วยฟักตัวในอีก 24 ชม แล้วกำหนดที่ absorbance ที่ 570 nm ใช้เป็นmultidetection microplate reader (เอชที Powerscan ® Biotek เครื่องมือ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรม estrogenic ของกลุ่มตัวอย่างได้รับการตรวจสอบโดยใช้การทดสอบ E-หน้าจอ โรคมะเร็งเต้านมของมนุษย์ MCF-7
เป็นครั้งแรกเซลล์เพาะเลี้ยงในกลาง RPMI เสริมด้วยซีรั่มวัว 10% ของทารกในครรภ์ (FBS) พวกเขาถูก
ชุบแล้วใส่ลงในจาน 96 หลุมที่ 1 × 103 เซลล์ / ดีและได้รับอนุญาตให้แนบเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สื่อจะถูกลบออก
และตัวอย่างน้ำเสียที่ 5, 10 และ 20% (V / V) ความเข้มข้นสุดท้ายนอกเหนือไปจาก 17 β-estradiol (E2) (29
นาโนเมตรความเข้มข้นสุดท้าย) ควบคุมบวกถูกเจือจางในฟีนอลฟรี กลาง RPMI เสริมด้วย 10%
FBS ถ่านได้รับการรักษาแล้วเพิ่มเข้าไปในเซลล์ การทดลองแยกได้ดำเนินการในการปรับผลกระทบของ
ความเข้มข้นต่างๆ (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชั่นพีบีเอส (-) ที่ 5%, 10% และ 20%) ในการอยู่รอดและ
การแพร่กระจายของ MCF-7 เซลล์ เซลล์ถูกบ่มเป็นเวลา 6 วันและขนาดกลางมีการเปลี่ยนแปลงหลังจากที่ 10 ไมโครลิตร
5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5-diphenyl-2H -tetrazolium โบรไมด์ (MTT) (Dojindo ) ถูกบันทึกอยู่ใน
แต่ละตามอย่างดีจากการบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS, 10%) ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วที่ 100 ไมโครลิตรต่อ
กันตามมาด้วยการบ่มอีก 24 ชั่วโมง การดูดกลืนแสงที่ถูกกำหนดแล้วที่ 570 นาโนเมตรโดยใช้
ผู้อ่าน microplate multidetection (Powerscan® HT, Biotek Instruments)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรม estrogenic ของตัวอย่างที่ถูกตรวจสอบการใช้ e-screen ตามลำดับ มะเร็งเต้านมของมนุษย์ mcf-7
เซลล์เริ่มต้นที่เพาะเลี้ยงในอาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย RPMI 10% fetal bovine serum ( FBS ) พวกเขา
แล้วชุบลงบนจานที่ 96 ดี 1 × 103 เซลล์ / ดี และได้รับอนุญาตให้แนบเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สื่อถูกลบออก
และน้ำเสียตัวอย่างที่ 5 , 10 และ 20 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) และสุดท้ายนอกจาก 17 - บีตา - ออล ( E2 ) ( 29
nm สุดท้ายความเข้มข้น ) เป็นตัวควบคุมบวก ลดในฟีนอลฟรี RPMI เติมถ่าน 10 %
ถือว่า FBS และจากนั้นเพิ่มไปยังเซลล์ การทดลองแยกมีวัตถุประสงค์เพื่อปรับผลของ
ความเข้มข้นต่างๆ ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์สารละลาย PBS ( - ) ที่ 5% , 10% และ 20% ) ในการอยู่รอดและ
mcf-7 proliferation ของเซลล์เซลล์ที่ถูกบ่มเป็นเวลา 6 วัน และสื่อเปลี่ยนไป หลังจากนั้น 10 μ L
5 mg / ml 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2,5-diphenyl-2h - tetrazolium โบรไมด์ ( MTT ) ( dojindo ) คือเพิ่ม

แต่ละดีตามบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS , 10% ) ถูกเพิ่มที่ ลิตรต่อ 100 μ
แล้วตามด้วยการบ่มเพาะอีก 24 ชั่วโมง นถูกกำหนดที่ 570 nm ใช้
พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อ่าน multidetection powerscan ® HT , biotek เครื่องมือ )