Measurement of Anthocyanins, Phenol

Measurement of Anthocyanins, Phenolics, Ascorbate, and Antioxidant Capacity. Total anthocyanin content of the appropriately diluted extracts was determined by the spec- trophotometric method of Wrolstad (1976), and data were calculated using the extinction coefficient for malvidin 3-glu- coside (28 000). Total phenolic content was measured by the Folin-Ciocalteu method at 700 nm, using gallic acid as a standard (Singleton and Rossi, 1965).
Ascorbate homogenates were centrifuged at 12 000 rpm at 4 °C for 5 min. Ascorbate was analyzed by paired-ion RP- HPLC, with electrochemical detection (Martin and Frei, 1997). An aliquot of the acidic supernatant was chromatographed on an LC8 column (150 mm × 4.6 mm i.d., 3 μm particle size; Supelco, Bellefonte, PA) using deionized water containing 1% methanol in 40 mM sodium acetate and 1.5 mM dodecyltri- ammonium phosphate as the mobile phase (Q12 ion pair cocktails; Regis, Morton Grove, IL). Ascorbate was detected at an applied potential of +0.6 V by an LC 4B amperometric electrochemical detector (Bioanalytical Sytems, West Lafay- ette, IN).
Antioxidant capacity was measured as oxygen radical absorbing capacity (ORAC) according to the method of Cao et al. (1995) using a COBAS-FARA II centrifugal analyzer (Roche Diagnostic, Nutley, NJ). The ORAC assay (400 μL) contained 16.7 nM R-phycoerythrin (R-PE; Sigma, St. Louis MO), 4 mM AAPH, and 20 μL of sample. After initiation of the assay with AAPH, a peroxyl radical generator) fluorescence of R-PE was read on duplicate samples, blanks, and standards of Trolox, a water-soluble vitamin E analogue. Readings were taken at 2 min intervals over a 70 min period. The area under the curve was calculated and expressed as micromole equiva- lents of Trolox per gram of fresh weight.
Statistical Analysis. The analysis of variance procedure of Genstat 5 (Genstat 5 Committee, 1993) was used to analyze results. Unless otherwise indicated, only differences of P < 0.05 are discussed. Bivariate regression analysis was used to correlate anthocyanin, phenolic, ascorbate, and ORAC results.
RESULTS
Phenolics, Anthocyanins, Ascorbate, and Anti- oxidant Capacity. Strawberry, raspberry, highbush blueberry, and lowbush blueberry were different (P e 0.001) from each other in their contents of phenolics, anthocyanins, and ascorbate and their antioxidant capacity (Table 1). The total phenolic content of high- bush and lowbush blueberries was about 4-fold higher than in strawberries and raspberries. The anthocyanin content of the four species varied more than 25-fold

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัด Anthocyanins, Phenolics, Ascorbate และกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ เนื้อหามีโฟเลทสูงรวมสารสกัดจากแตกออกอย่างเหมาะสมถูกกำหนด โดยวิธีการ trophotometric ข้อมูลจำเพาะของ Wrolstad (1976), และข้อมูลถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ใน malvidin 3-glu-coside (28 000) เนื้อหารวมฟีนอถูกวัด โดยวิธี Folin Ciocalteu ที่ 700 nm ใช้กรด gallic เป็นมาตรฐาน (เดี่ยวและ Rossi, 1965)Ascorbate homogenates มี centrifuged ที่ 12 000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C สำหรับ 5 นาที Ascorbate ถูกวิเคราะห์ โดยไอออนคู่ RP - HPLC กับตรวจไฟฟ้า (มาร์ตินและ Frei, 1997) เป็นส่วนลงตัวของ supernatant เปรี้ยวถูก chromatographed เป็นคอลัมน์ LC8 (ประชาชน 150 มม. × 4.6 มม. 3 μm ขนาดอนุภาค Supelco, Bellefonte, PA) โดยใช้น้ำ deionized ประกอบด้วยเมทานอล 1% acetate โซเดียม 40 มม.และ 1.5 มม. dodecyltri แอมโมเนียฟอสเฟตเป็นเฟสเคลื่อนที่ (Q12 ไอออนคู่ค็อกเทล รีจิส มอร์ตันโกรฟ IL) Ascorbate พบที่ศักยภาพการใช้ของ +0.6 V โดยมี LC 4B amperometric ไฟฟ้าจับ (Bioanalytical Sytems, Lafay ette, IN ตะวันตก)ถูกวัดกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระเป็นออกซิเจนรุนแรงดูดซับกำลัง (ORAC) ตามวิธีของ Cao et al. (1995) ใช้กับ COBAS FARA II แรงเหวี่ยงวิเคราะห์ (วิเคราะห์โรช Nutley, NJ) ORAC assay (400 μL) อยู่ 16.7 nM R-phycoerythrin (R -PE ซิก St. Louis MO), 4 mM AAPH และ μL 20 ของตัวอย่าง หลังจากเริ่มต้นของการทดสอบกับ AAPH เครื่องกำเนิดไฟฟ้ารุนแรง peroxyl) fluorescence ของ R -PE ถูกอ่านซ้ำตัวอย่าง ช่อง และมาตรฐานของ Trolox อนาล็อกวิตามินที่ละลายในการ อ่านที่ถ่ายในช่วงเวลา 2 นาทีระยะเวลานาทีที่ 70 พื้นที่ภายใต้โค้งถูกคำนวณ และแสดงเป็น micromole equiva-lents ของ Trolox ต่อกรัมของน้ำหนักสดการวิเคราะห์ทางสถิติ วิเคราะห์ผลต่างของขั้นตอนที่ 5 Genstat (Genstat 5 กรรมการ 1993) ถูกใช้ในการวิเคราะห์ผล เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น เฉพาะส่วนต่างของ P < 0.05 จะกล่าวถึง วิเคราะห์การถดถอย bivariate ถูกใช้เพื่อเชื่อมโยงมีโฟเลทสูง ฟีนอ ascorbate และ ORAC ผลผลลัพธ์Phenolics, Anthocyanins, Ascorbate และกำลังต่อต้านอนุมูลอิสระ สตรอเบอร์รี่ ราสเบอร์รี่ บลูเบอร์รี่ highbush และ lowbush บลูเบอรี่แตกต่างกัน (P e 0.001) จากแต่ละอื่น ๆ ในเนื้อหา phenolics, anthocyanins และ ascorbate และกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ (ตาราง 1) ฟีนอเนื้อหารวมของบลูเบอร์รี่สูงบุชและ lowbush มีประมาณ 4-fold สูงกว่าสตรอเบอร์รี่และราสเบอร์รี่ เนื้อหามีโฟเลทสูงพันธุ์สี่แตกต่างกันมากกว่า 25-fold

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวัดผลของ anthocyanins ascorbate และความจุของสารต้านอนุมูลอิสระ ปริมาณแอนโธไซยานินของอย่างเหมาะสมเจือจางสารสกัดถูกกำหนดโดยสเป็ค - วิธี trophotometric ของ wrolstad ( 1976 ) และทำการคำนวณโดยใช้สัมประสิทธิ์การ malvidin 3-glu - coside ( 28 , 000 ) ปริมาณฟีนอลทั้งหมดวัดจาก folin ciocalteu วิธีที่ 700 นาโนเมตรการใช้เพิ่มขึ้นเป็นมาตรฐานโรงพยาบาล รอสซี่ , 1965 ) .
จาก homogenates เป็นระดับที่ 12 000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C เป็นเวลา 5 นาทีโดยใช้คู่ไอออน ascorbate RP - HPLC ที่มีการตรวจจับทางเคมีไฟฟ้า ( มาร์ติน ฟราย , 1997 ) เป็นส่วนลงตัวของนำกรดคือ chromatographed บน lc8 คอลัมน์ ( 150 มิลลิเมตร× 4.6 มม. บัตร 3 μ M ขนาดอนุภาค supelco bellefonte ; , ,PA ) ใช้คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำที่มี 1% โซเดียมอะซิเตต และเมทานอลใน 40 มม. 1.5 มม. dodecyltri - แอมโมเนียมฟอสเฟตเป็นเฟสเคลื่อนที่ ( Q12 คู่ไอออนค็อกเทล ; รีจิส , มอร์ตันโกรฟ , อิลลินอยส์ ) จากที่ตรวจพบในการประยุกต์ศักยภาพ 0.6 V โดย LC 4B สำคัญไฟฟ้าเคมีตรวจจับ ( bioanalytical ของตะวันตก lafay - ette
, )วัดออกซิเจนอนุมูลอิสระเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีความจุ ( ORAC ) ตามวิธีการของโจโฉ et al . ( 1995 ) การใช้ cobas-fara II แรงเหวี่ยงวิเคราะห์ ( โรชวินิจฉัย Nutley นิวเจอร์ซีย์ ) โดยวิธี ORAC ( 400 μ L ) ที่มีอยู่ 16.7 nm r-phycoerythrin ( r-pe ; Sigma , เซนต์ หลุยส์โม ) , aaph 4 มม. และ 20 μ L ของกลุ่มตัวอย่าง หลังจากที่เริ่มต้นของ aaph ตรวจสอบด้วย ,เป็น peroxyl หัวรุนแรง Generator ) เรืองแสงของ r-pe กำลังอ่านตัวอย่างที่ซ้ำกันหรือไม่ และมาตรฐานเป็นสารละลายวิตามินอีอะนาล็อก อ่านถูกถ่ายเมื่อ 2 นาทีช่วงเวลากว่า 70 นาทีระยะเวลา พื้นที่ใต้เส้นโค้งถูกคำนวณและแสดงเป็นไมโครโมล equiva - สาร lents ของ 1 กรัมน้ำหนักสด .
การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์ความแปรปรวนของขั้นตอน genstat 5 ( คณะกรรมการ genstat 5 1993 ) เพื่อวิเคราะห์ผล นอกจากที่ระบุ ความแตกต่างเพียง 0.05 ได้ถูก การวิเคราะห์การถดถอยโดยใช้ใช้ปริมาณแอนโธไซยานินฟีนอลจาก , และค่า ORAC .

ผลผลจาก anthocyanins และความสามารถต้านอนุมูลอิสระ highbush บลูเบอร์รี่ , สตรอเบอร์รี่ , ราสเบอร์รี่ ,lowbush บลูเบอร์รี่และแตกต่าง ( P e 0.001 ) จากแต่ละอื่น ๆในเนื้อหาของผลและแอนโทไซยานิน และสารต้านอนุมูลอิสระจากตน ( ตารางที่ 1 ) เนื้อหาทั้งหมดของบุชและฟีนอลสูง lowbush บลูเบอร์รี่ประมาณ 4 เท่าสูงกว่าในสตรอเบอรี่และราสเบอรี่ มีแอนโธไซยานินปริมาณ 4 ชนิดแตกต่างกันมากกว่า 25 พับ