2.3. Random Amplified Polymorphic D

2.3. Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) analysis
RAPD–PCR was performed using 17 10-mer random primers
selected from the Operon kit (Table 2). PCR reactions were
carried out in 25 ll volumes containing 75 ng of template
DNA, 1· reaction buffer, 1.5 mM MgCl2, 200 lM dNTPs,
1.5 lM of the primer and 1 U of the Taq DNA polymerase
(Promega). PCR amplification was performed using Biometra
gradient Thermolcycler for 35 cycles at 94 C for 1 min, 30 C
for 1 min and 72 C for 1 min. The program was preceded by a
denaturation step at 94 C for 7 min and followed by an elongation
step at 72 C for 7 min. The PCR products were
separated on 1.5% ethidium bromide stained agarose gels
and were photographed on gel documentation system

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 Amplified Polymorphic DNA ( RAPD ) วิเคราะห์โดยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสโดยใช้
– 17 10 เมอร์แบบสุ่มชนิด
เลือกจากโอเปอรอน Kit ( ตารางที่ 2 ) ปฏิกิริยา PCR ถูก
ออกมา 25 จะไดรฟ์ที่มี 75 ของดีเอ็นเอแม่แบบ
, บัฟเฟอร์ด้วยปฏิกิริยา 1 , 200 ชุด dntps 1.5 มม. , LM , 1.5 ของรองพื้น LM
1 U ของทัค DNA polymerase
( promega ) การใช้ biometra
( ดีเอ็นเอการไล่ระดับสี thermolcycler 35 รอบที่ 94  C เป็นเวลา 1 นาที 30  C
1 นาที 72  องศาเซลเซียสนาน 1 นาที โปรแกรมจะถูกนำหน้าโดย
( ขั้นตอนที่ 94  C เป็นเวลา 7 นาที และตามด้วยการยืด
ขั้นตอนที่ 72  องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ที่เพิ่มปริมาณ
แยกบน ทิเดียมโบรไมด์ , 1.5% เปื้อนเจล
และถ่ายภาพในระบบเอกสาร เจล