In addition, two earlier developmen

In addition, two earlier developmental stages (stages 10 and 7;
Ojeda et al., 2012a,b) were analyzed for two species, L. japonicus
and L. berthelotii with the purpose of characterizing the early gene
expression of the same set of genes. RNA was extracted using the
Pure LinkTM Plant RNA Reagent from Invitrogen following the manufacturer’s
protocol. RNA was treated with DNAse, visualized on an
agarose gel (2%) and its concentration measured using a Nanodrop
spectrophotometer (ND-1000 Spectrophotometer, Thermo Scientific).
RNA was converted to cDNA using similar amount of RNA
across all the samples using the RevertAidTM H Minus First Strand
cDNA Synthesis Kit from Fermentas using a random hexamer
primer according to manufacturer’s protocol. Genomic contamination
was assessed using the CYCLOIDEA 2 (LjCYC2) intron in L.
japonicus. The initial amount of cDNA was adjusted for each sample
analyzed and an internal control of endogenous expression was
assessed by the constitutive expression of L. japonicus Ubiquitin
(LjUbi) using LjUbiF/R (Feng et al., 2006).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นอกจากนี้การพัฒนาสองขั้นตอนก่อนหน้านี้ (10 ขั้นตอนและ 7.
โอเจเอตอัล, 2012a, b) การวิเคราะห์สำหรับสองชนิดลิตร japonicus
และลิตร berthelotii กับจุดมุ่งหมายของพัฒนาการในช่วงต้นของยีน
แสดงออกของชุดเดียวกันของยีน RNA ถูกสกัดโดยใช้
บริสุทธิ์พืช linktm RNA สารจาก Invitrogen
ต่อไปนี้โปรโตคอลของผู้ผลิต อาร์เอ็นเอได้รับการรักษาด้วย DNAse, มองเห็นบน
เจล agarose (2%) และความเข้มข้นของวัดโดยใช้ nanodrop
Spectrophotometer (ND-1000 Spectrophotometer วิทยาศาสตร์เทอร์โม).
อาร์เอ็นเอที่ถูกดัดแปลงยีนโดยใช้จำนวนเงินที่คล้ายกันของอาร์เอ็นเอ
ทั่วทุกตัวอย่างโดยใช้ชั่วโมง revertaidtm ลบแรกสาระ
cDNA ชุดการสังเคราะห์จาก fermentas ใช้สุ่ม hexamer
ไพรเมอร์ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต จีโนมการปนเปื้อน
ได้รับการประเมินโดยใช้ cycloidea 2 (ljcyc2) intron ในลิตร.
japonicus จำนวนเงินที่เริ่มต้นของยีนมีการปรับสำหรับแต่ละตัวอย่าง
วิเคราะห์และการควบคุมภายในของการแสดงออกภายนอกได้รับการประเมินโดย
การแสดงออกที่เป็นส่วนประกอบของลิตร japonicus ubiquitin
(Ljubi) โดยใช้ ljubif / r (ฮ et al,. 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นอกจากนี้ สองก่อนหน้านี้พัฒนาระยะ (ระยะ 10 และ 7;
Ojeda et al., 2012a, b) ได้วิเคราะห์ในสองพันธุ์ L. japonicus
และ L. berthelotii โดยมีวัตถุประสงค์การกำหนดลักษณะของยีนต้น
ของยีนชุดเดียวกัน อาร์เอ็นเอที่สกัดโดยใช้การ
รีบริสุทธิ์ LinkTM พืชอาร์เอ็นเอเอเจนต์จาก Invitrogen ตามของผู้ผลิต
โพรโทคอลการ อาร์เอ็นเอได้รับ DNAse, visualized บนการ
agarose เจล (2%) และความเข้มข้นของวัดโดยใช้การ Nanodrop
เครื่องทดสอบกรดด่าง(เครื่องทดสอบกรด ND-1000 ด่าง วิทยาศาสตร์เทอร์โม) .
ถูกแปลงเป็นอาร์เอ็นเอ cDNA ที่ใช้ยอดคล้ายของอาร์เอ็นเอ
ในกลุ่มตัวอย่างทั้งหมดที่ใช้ใน RevertAidTM H ลบแรกสาระ
cDNA ชุดสังเคราะห์จาก Fermentas ใช้ hexamer สุ่ม
พื้นตามโพรโทคอลของบริษัทผู้ผลิต ปน genomic
ถูกประเมินโดยใช้ intron 2 CYCLOIDEA (LjCYC2) ใน L.
japonicus ยอดเงินเริ่มต้นของ cDNA ถูกปรับปรุงสำหรับแต่ละตัวอย่าง
วิเคราะห์ และการควบคุมภายในของ endogenous นิพจน์ถูก
ประเมิน โดยนิพจน์ขึ้นของ japonicus L. Ubiquitin
(LjUbi) ใช้ LjUbiF/R (เฟิงและ al., 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการเพิ่มระยะสองก่อนหน้าการพัฒนาการ(ระยะ 10 และ 7
ojeda et al . 2012 B )ได้วิเคราะห์สำหรับสองสายพันธุ์แอล japonicus
และ L . berthelotii โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อโฮสต์ช่วงต้นยีน
ซึ่งจะช่วยการแสดงออกของชุดเดียวกันของยีน rna สกัดการใช้พืช rna ยาซัด
บริสุทธิ์ linktm จาก invitrogen ต่อไปนี้' smanufacturer ที่
โปรโตคอล rna เป็นการปฏิบัติด้วย dnase เคียงข้างใน
ตามมาตรฐานagarose เจล( 2% )และที่วัดได้โดยใช้ความเข้มข้นที่ใช้ใน nanodrop
( Nd - 1000 ที่มีหน่วยความจำตรวจสอบ,ความร้อนทางด้านวิทยาศาสตร์)..
rna เป็นแปลงเป็น cdna โดยใช้ความเหมือนของ rna
ทั้งหมดในตัวอย่างโดยใช้ revertaidtm H ลบครั้งแรกเกลียว
cdna การสังเคราะห์ชุดจาก fermentas โดยใช้แบบสุ่ม hexamer
เชื้อปะทุตามผู้ผลิตของโปรโตคอล. การเปื้อนสิ่งสกปรก genomic
ตามมาตรฐานมีการประเมินโดยใช้ cycloidea 2 ( ljcyc 2 ) intron ใน japonicus แอล
ที่เริ่มต้นจำนวนของ cdna ก็ปรับได้สำหรับแต่ละตัวอย่าง
ซึ่งจะช่วยวิเคราะห์และการควบคุม ภายใน ของเองในระยะยาวการแสดงออกทางความคิดเห็น
ซึ่งจะช่วยเป็นการประเมินโดยจัดตั้งการแสดงออกของ L . japonicus ubiquitin
( ljubi )โดยใช้ ljubif / R (ฮวงจุ้ย et al ., 2006 )