The specimens of Canthigaster figueiredoi (Moura & Castro, 2002)
(n=11; 4 females, 7 juveniles) were collected on the coast of Bahia
(12o58′S, 38o31′W), NE of Brazil. They underwent mitotic stimulation
using the technique proposed by Molina (2001), for 24 to 48 h. All
specimens were then anesthetized with clove oil (Eugenol) and
sacrificed for extraction of the cephalic kidney. Mitotic chromosome
preparations were obtained according to the methodology described
by Gold et al., (1990). The silver impregnation technique developed
by Howell & Black (1980) was used to detect active ribosomal sites.
Heterochromatic patterns were determined using the C-banding
method (Sumner, 1972), while fluorochrome staining with DAPI/
CMA3 followed the Schweizer (1980) protocol. In situ fluorescent
hybridization was based on the procedure adopted by Pinkel et al.,
(1986) with slight alterations. The 18 S rDNA probes were obtained by
polymerase chain reaction (PCR) amplification of the DNA of
Prochilodus argenteus (Hatanaka & Galetti, 2004) and were marked
with biotin-11-dATP, using nick translation, and the BionickKTM
Labeling System kit (Gibco.BRL), following the manufacturer specifications.
The metaphases were photographed with a DP70 digital
camera system coupled to an Olympus BX50 epiflorescence microscope
using DPController 1.2.1.108 (Olympus) software. The chromosomes
were classified as to centromere position into metacentric (m),
submetacentric (sm), subtelocentric (st) and acrocentric (a).
ไว้เป็นตัวอย่างของ figueiredoi Canthigaster (Moura & Castro, 2002)(n =หญิง 11; 4, 7 juveniles) ถูกรวบรวมไว้บนชายฝั่งของเฮีย(12o58′S, 38o31′W), NE ของบราซิล พวกเขาผ่านการกระตุ้น mitoticใช้เทคนิคการนำเสนอ โดย Molina (2001), สำหรับ h. 24-48 ทั้งหมดไว้เป็นตัวอย่างได้แล้วด้วยกับน้ำมันกานพลู (ยูเจนอล) และเสียสละสำหรับสกัดไตเซฟาลิค โครโมโซม mitoticเตรียมได้รับตามวิธีที่อธิบายไว้โดยทองร้อยเอ็ด al., (1990) เทคนิคทำให้มีขึ้นเงินพัฒนาHowell และดำ (1980) ใช้ในการตรวจสอบไซต์ ribosomal ใช้งานรูปแบบ heterochromatic ได้กำหนดใช้ใน C-แถบวิธี (ซัมเนอร์ 1972), ในขณะที่ย้อมสี ด้วย DAPI fluorochrome /CMA3 ตามโพรโทคอล Schweizer (1980) ในซิเรืองแสงhybridization เป็นไปตามขั้นตอนที่นำโดย Pinkel et al.,(1986) มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย คลิปปากตะเข้ rDNA S ที่ 18 ได้รับโดยพอลิเมอเรสขยายปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ของดีเอ็นเอของArgenteus Prochilodus (Hatanaka & Galetti, 2004) และถูกทำเครื่องหมายมีไบโอติน-11-dATP ใช้นิคแปล และ BionickKTMติดฉลากชุดระบบ (Gibco.BRL), ตามข้อกำหนดของผู้ผลิตMetaphases ได้ถ่ายรูปกับ DP70 ที่ดิจิตอลระบบกล้องควบคู่ไปกับการ Olympus BX50 epiflorescence กล้องจุลทรรศน์DPController 1.2.1.108 (Olympus) โดยใช้ซอฟต์แวร์ Chromosomesถูกจัดเป็นตำแหน่ง centromere เป็น metacentric (m),submetacentric (sm), subtelocentric (st) และ acrocentric (a)
การแปล กรุณารอสักครู่..
The specimens of Canthigaster figueiredoi (Moura & Castro, 2002)
(n=11; 4 females, 7 juveniles) were collected on the coast of Bahia
(12o58′S, 38o31′W), NE of Brazil. They underwent mitotic stimulation
using the technique proposed by Molina (2001), for 24 to 48 h. All
specimens were then anesthetized with clove oil (Eugenol) and
sacrificed for extraction of the cephalic kidney. Mitotic chromosome
preparations were obtained according to the methodology described
by Gold et al., (1990). The silver impregnation technique developed
by Howell & Black (1980) was used to detect active ribosomal sites.
Heterochromatic patterns were determined using the C-banding
method (Sumner, 1972), while fluorochrome staining with DAPI/
CMA3 followed the Schweizer (1980) protocol. In situ fluorescent
hybridization was based on the procedure adopted by Pinkel et al.,
(1986) with slight alterations. The 18 S rDNA probes were obtained by
polymerase chain reaction (PCR) amplification of the DNA of
Prochilodus argenteus (Hatanaka & Galetti, 2004) and were marked
with biotin-11-dATP, using nick translation, and the BionickKTM
Labeling System kit (Gibco.BRL), following the manufacturer specifications.
The metaphases were photographed with a DP70 digital
camera system coupled to an Olympus BX50 epiflorescence microscope
using DPController 1.2.1.108 (Olympus) software. The chromosomes
were classified as to centromere position into metacentric (m),
submetacentric (sm), subtelocentric (st) and acrocentric (a).
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตัวอย่างของ canthigaster figueiredoi ( Moura & Castro , 2002 )
( n = 11 ; 4 หญิง 7 เยาวชน ) ถูกเก็บบนชายฝั่งของเฮีย
( 12o58 ’’ 38o31 , W ) , NE ของบราซิล พวกเขาได้รับการกระตุ้นเส้นใย
โดยใช้เทคนิคที่เสนอโดย โมลินา ( 2001 ) , 24 ถึง 48 ชั่วโมง ทุกชิ้นงาน แล้ววางยาสลบด้วย
( eugenol ) และน้ำมันกานพลูและเสียสละเพื่อสกัดไตศีรษะ .บรรจุด้วยการเตรียมโครโมโซม
ได้ตามวิธีการที่อธิบาย
ทอง et al . , ( 1990 ) เงินเคลือบเทคนิคพัฒนา
โดย Howell &สีดำ ( 1980 ) คือใช้ตรวจสอบการใช้งานเว็บไซต์ไรโบโซม .
heterochromatic รูปแบบคำนวณโดยใช้วิธี c-banding
( ซัมเนอร์ , 1972 ) ในขณะที่ฟลู โรโครมย้อมด้วย dapi /
cma3 ตามชไวเซอร์ ( 1980 ) โปรโตคอลใน situ hybridization เรืองแสง
ขึ้นอยู่กับขั้นตอนที่รับรองโดยพิงเคิล et al . ,
( 1986 ) มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย . 18 ชนิดของฟิวส์ที่ได้รับจาก
ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) เพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของ
prochilodus argenteus ( ฮาตานากะ& galetti , 2004 ) และมีเครื่องหมาย
กับ biotin-11-datp ใช้นิคการแปล และ bionickktm
ชุดระบบการติดฉลาก ( gibco . BRL )ตามสเปคของผู้ผลิต .
metaphases ได้ถ่ายภาพด้วยกล้องระบบดิจิตอล
dp70 คู่กับ Olympus bx50 epiflorescence กล้องจุลทรรศน์
ใช้ dpcontroller 1.2.1.108 ( Olympus ) ซอฟต์แวร์ โครโมโซมจำแนกตามตำแหน่งเซนโตรเมียร์
เป็นเมตาเซนตริก ( M )
สับเมตาเซนตริก ( SM ) subtelocentric ( ST ) และอะโครเซนตริก (
)
การแปล กรุณารอสักครู่..