2.3. L. monocytogenes detection and

2.3. L. monocytogenes detection and enumeration
L. monocytogenes was detected both by qualitative and quantitative
analyses according to ISO 11290-1 (1996) and ISO 11290-2
(1998) respectively. For quantitative determination, different aliquots
of samples were taken in relation to the overall volume of
the samples to be considered: in particular 5 g aliquots for MCT I
and 25 g aliquots for MCT II were blended at a 1:10 ratio in Ringer's
solution (Oxoid). The suspensions were then stored at room
temperature for 1 h and then decimally diluted for
L. monocytogenes enumeration on Agar Listeria according to
Ottaviani & Agosti (ALOA), supplemented with ALOA enrichmentselective
supplements (Biolife Italiana, Teramo, Italy) and incubated
at 37 C for 24e48 h. All of the plates were incubated in
aerobic conditions. Typical L. monocytogenes colonies were
confirmed by rapid test Monocytogenes ID Disk (Biolife) following
manufacturer instructions. The colony counts were performed in
triplicates, and the average values ± standard deviations were
calculated (International Standards Organization 11290-2, 1998)
as representative of each sample. In addition to the quantitative
analysis, qualitative determination of the presence of
L. monocytogenes in the samples was performed to detect bacteria
that were present at levels less than the limit of detection of the
quantitative analysis. For primary enrichment, 25 g of each sample
V. Bernini et al. / Food Control 61 (2016) 54e61 55
were blended in 225 ml of Fraser Broth added to Half Fraser
supplement (HFB) (Oxoid) and were incubated at 30 C for 24 h.
Then, 0.1 ml of the first enrichment culture were transferred to
10 ml of Fraser Broth added to Fraser supplement (FB) (Oxoid) and
were aerobically incubated at 37 C for 48 h for secondary
enrichment. Subcultures of both enrichment stages were plated
on ALOA (Biolife Italiana) (Leclercq, 2004; Vlaemynck, Lafarge, &
Scotter, 2000) and incubated at 37 C for 24e48 h to determine
the presence of colonies (International Standards Organization
11290-1, 1996).
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 L. monocytogenes
ตรวจสอบและนับลิตร monocytogenes
ที่ตรวจพบทั้งเชิงปริมาณและคุณภาพการวิเคราะห์ตามมาตรฐานISO 11290-1 (1996) และ ISO 11290-2
(1998) ตามลำดับ สำหรับการกำหนดปริมาณ aliquots
ที่แตกต่างกันของกลุ่มตัวอย่างถูกนำมาในความสัมพันธ์กับปริมาณโดยรวมของกลุ่มตัวอย่างได้รับการพิจารณา:
โดยเฉพาะ 5 aliquots กรัมเพราะเรา MCT
และ 25 กรัม aliquots MCT ครั้งที่สองผสมในอัตราส่วน 01:10 ใน Ringer
ของการแก้ปัญหา( Oxoid) แขวนลอยที่ถูกเก็บไว้ในห้องที่อุณหภูมิเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและจากนั้นปรับลด decimally สำหรับลิตร monocytogenes นับบนวุ้น Listeria ตามOttaviani และ Agosti (อาหาร ALOA) เสริมด้วยอาหาร ALOA enrichmentselective อาหารเสริม (BioLife Italiana, Teramo, อิตาลี) และบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24e48 ชั่วโมง ทุกจานถูกบ่มในเงื่อนไขแอโรบิก อาณานิคมทั่วไป L. monocytogenes ได้รับการยืนยันโดยการทดสอบอย่างรวดเร็วmonocytogenes ID ดิสก์ (BioLife) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต นับอาณานิคมได้ดำเนินการในtriplicates และค่าเฉลี่ย±ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานได้รับการคำนวณ(องค์การมาตรฐานระหว่างประเทศ 11290-2, 1998) ในฐานะตัวแทนของแต่ละตัวอย่าง นอกจากนี้ยังมีปริมาณการวิเคราะห์การกำหนดคุณภาพของการปรากฏตัวของแอล monocytogenes ในกลุ่มตัวอย่างที่ได้ดำเนินการในการตรวจสอบเชื้อแบคทีเรียที่อยู่ในปัจจุบันอยู่ในระดับที่น้อยกว่าขีดจำกัด ของการตรวจสอบของการวิเคราะห์เชิงปริมาณ สำหรับการเพิ่มคุณค่าหลัก 25 กรัมของแต่ละตัวอย่างโวลต์ Bernini et al, / การควบคุมอาหาร 61 (2016) 54e61 55 ถูกผสมใน 225 มล. ของเฟรเซอร์น้ำซุปเพิ่มลงในครึ่งเฟรเซอร์เสริม(HFB) (Oxoid) และได้รับการบ่มที่ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชม. แล้ว 0.1 มล. ของวัฒนธรรมการตกแต่งครั้งแรกที่มีการถ่ายโอน10 มล. ของเฟรเซอร์น้ำซุปเพิ่มให้กับผลิตภัณฑ์เสริมเฟรเซอร์ (FB) (Oxoid) และถูกบ่มaerobically ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงสำหรับรองเพิ่มคุณค่า วัฒนธรรมของขั้นตอนทั้งการตกแต่งถูกชุบบนอาหาร ALOA (BioLife Italiana) (Leclercq 2004; Vlaemynck, ลาฟาร์จและ scotter, 2000) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24e48 ชั่วโมงเพื่อตรวจสอบสถานะของอาณานิคม(มาตรฐานสากลองค์การ11290-1, 1996 ). 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การตรวจหาและการ monocytogenes L
L monocytogenes ที่ตรวจพบทั้งเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ
วิเคราะห์ตามมาตรฐาน ISO 11290-1 ( 1996 ) และ ISO 11290-2
( 1998 ) ตามลำดับ วิเคราะห์ปริมาณแตกต่างกันเฉยๆ
ตัวอย่างถูกในความสัมพันธ์กับปริมาณโดยรวมของ
ตัวอย่างจะถูกพิจารณาโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับทีผม
5 g เฉยๆและ 25 กรัมเฉยๆสำหรับที 2 ผสมในอัตราส่วน 1 : 10 ในสั่นของ
โซลูชั่น ( oxoid ) สารแขวนลอยแล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
1 H แล้ว decimally เจือจางสำหรับ
แจง . monocytogenes บนอาหารวุ้น Listeria ตาม
ottaviani &สิงหาคม ( aloa ) เสริมด้วย aloa enrichmentselective
อาหารเสริม ( biolife จาก Teramo , อิตาลี , และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24e48
hทุกจานถูกบ่มใน
เงื่อนไขแอโรบิก . ปกติผม monocytogenes อาณานิคมได้ถูกยืนยันโดยการทดสอบ monocytogenes ID
อย่างรวดเร็วดิสก์ ( biolife ) ทำตามคำแนะนำ
ผู้ผลิต อาณานิคมครั้งถูกดำเนินการใน
3 ซ้ำ และค่าเฉลี่ย ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน±
คำนวณระหว่างมาตรฐานองค์กร 11290-2 , 1998 )
เป็นตัวแทนของแต่ละตัวอย่างนอกเหนือไปจากการวิเคราะห์เชิงปริมาณ
, ความมุ่งมั่นเชิงคุณภาพของการแสดงตนของ
monocytogenes . ในตัวอย่างได้ทำการตรวจหาแบคทีเรีย
ที่อยู่ในระดับต่ำกว่าขีด จำกัด ของการตรวจหา
การวิเคราะห์เชิงปริมาณ วัดหลัก 25 กรัมของแต่ละตัวอย่าง
V Bernini et al . อาหารควบคุม / 61 ( 2016 ) 54e61 55
225 มิลลิลิตร ผสมใน Fraser broth เพิ่มเสริมครึ่งเฟรเซอร์
( HFB ) ( oxoid ) และอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
แล้ว 0.1 มิลลิลิตรวัฒนธรรมเสริมก่อนโอน

10 ml ของ Fraser broth เพิ่มเฟรเซอร์เสริม ( FB ) ( oxoid )
) aerobically อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง สำหรับระดับ
เสริมสมรรถนะ ทั้งการพัฒนาจนขั้นชุบ
ใน aloa ( biolife จาก ) ( leclercq , 2004 ; vlaemynck อย่างไรก็ตาม& , ,
scotter , 2000 ) และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียส 24e48 H เพื่อตรวจสอบสถานะของอาณานิคม (

11290-1 องค์การมาตรฐานระหว่างประเทศ , 1996 )
2