Binding to the solid phase may be a

Binding to the solid phase may be achieved by column chromatography whereby the solid medium is packed onto a column, the initial mixture run through the column to allow setting, a wash buffer run through the column and the elution buffer subsequently applied to the column and collected. These steps are usually done at ambient pressure. Alternatively, binding may be achieved using a batch treatment, for example, by adding the initial mixture to the solid phase in a vessel, mixing, separating the solid phase, removing the liquid phase, washing, re-centrifuging, adding the elution buffer, re-centrifuging and removing the eluate.

Sometimes a hybrid method is employed such that the binding is done by the batch method, but the solid phase with the target molecule bound is packed onto a column and washing and elution are done on the column.

A third method, expanded bed adsorption, which combines the advantages of the two methods mentioned above, has also been developed. The solid phase particles are placed in a column where liquid phase is pumped in from the bottom and exits at the top. The gravity of the particles ensure that the solid phase does not exit the column with the liquid phase.

Affinity columns can be eluted by changing salt concentrations, pH, pI, charge and ionic strength directly or through a gradient to resolve the particles of interest.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รวมเข้ากับเฟสของแข็งอาจทำได้ โดยโดยบรรจุกลางทึบบนคอลัมน์ chromatography คอลัมน์ส่วนผสมเริ่มต้นรันผ่านคอลัมน์ให้ตั้งค่า ล้างบัฟเฟอร์รันผ่านคอลัมน์และบัฟเฟอร์ elution กับคอลัมน์ และรวบรวมมาได้ ขั้นตอนเหล่านี้มักจะเสร็จที่สภาวะความดัน หรือ ผูกอาจได้ใช้รักษาชุด เช่น โดยเพิ่มส่วนผสมเริ่มแข็งระยะในเรือ ผสม แยกเฟสของแข็ง เอาเฟสของเหลว ซักผ้า centrifuging ใหม่ เพิ่มบัฟเฟอร์ elution, centrifuging ใหม่ และเอา eluateบางครั้งวิธีการผสมเป็นลูกจ้างเช่นว่าการรวมจะทำ โดยวิธีชุด แต่เฟสของแข็งกับโมเลกุลเป้าหมายที่ผูกจะบรรจุลงในคอลัมน์ และ elution และซักผ้าเสร็จบนคอลัมน์วิธีที่สาม ขยายเตียงดูดซับ ซึ่งรวมข้อดีของวิธีการสองวิธีที่กล่าวถึงข้างต้น ยังได้รับการพัฒนาขึ้น อนุภาคของแข็งเฟสอยู่ในคอลัมน์ที่มีสูบในเฟสของเหลวจากด้านล่างและออกจากด้านบน แรงโน้มถ่วงของอนุภาคทำให้แน่ใจว่า ที่เฟสของแข็งออกจากคอลัมน์ที่ มีเฟสของเหลวคอลัมน์ความสัมพันธ์สามารถเป็น eluted โดยการเปลี่ยนความเข้มข้นเกลือ ค่า pH ปี่ ค่า และความแรงของ ionic โดยตรง หรือ ผ่านไล่แก้ไขอนุภาคน่าสนใจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผูกพันกับของแข็งอาจทำได้โดยคอลัมน์โดยสื่อที่เป็นของแข็งเป็นที่บรรจุลงในคอลัมน์ส่วนผสมเริ่มต้นทำงานผ่านคอลัมน์เพื่อให้การตั้งค่าบัฟเฟอร์ล้างวิ่งผ่านคอลัมน์และบัฟเฟอร์ชะนำมาใช้ต่อมาคอลัมน์และเก็บรวบรวม . ขั้นตอนเหล่านี้มักจะทำที่ความดันบรรยากาศ อีกทางเลือกหนึ่งที่มีผลผูกพันอาจทำได้โดยใช้ชุดรักษาตัวอย่างเช่นโดยการเพิ่มส่วนผสมเริ่มต้นเฟสของแข็งในเรือผสมแยกของแข็งเอาของเหลวล้างอีกครั้งปั่นแยกเพิ่มบัฟเฟอร์ชะ, อีกครั้งปั่นแยกและลบ eluate. บางครั้งวิธีการไฮบริดเป็นลูกจ้างดังกล่าวที่มีผลผูกพันจะกระทำโดยวิธีการแบทช์ แต่ช่วงที่เป็นของแข็งที่มีโมเลกุลเป้าหมายที่ถูกผูกไว้จะเต็มไปลงคอลัมน์และซักผ้าและชะจะทำในคอลัมน์. วิธีที่สามการดูดซับเตียงขยายตัวซึ่งรวมข้อดีของทั้งสองวิธีดังกล่าวข้างต้นยังได้รับการพัฒนา อนุภาคของแข็งจะอยู่ในคอลัมน์ที่ของเหลวจะถูกสูบเข้ามาจากด้านล่างและออกที่ด้านบน แรงโน้มถ่วงของอนุภาคให้แน่ใจว่าช่วงที่เป็นของแข็งไม่ได้ออกจากคอลัมน์ที่มีของเหลว. คอลัมน์ Affinity สามารถชะโดยการเปลี่ยนความเข้มข้นของเกลือพีเอชพี, ค่าใช้จ่ายและความแข็งแรงของอิออนโดยตรงหรือผ่านทางลาดเพื่อแก้ไขอนุภาคที่น่าสนใจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผูกกับเฟสของแข็งอาจทำได้โดยวิธีคอลัมน์โครมาโตกราฟฟี โดยตัวกลางที่เป็นของแข็งที่บรรจุลงในคอลัมน์ ใช้ส่วนผสมที่เริ่มต้นผ่านทางคอลัมน์เพื่อให้การตั้งค่าบัฟเฟอร์ซักวิ่งผ่านคอลัมน์และใช้บัฟเฟอร์ที่ใช้ในภายหลัง ในคอลัมน์ และรวบรวม ขั้นตอนเหล่านี้มักจะทำที่ความดันบรรยากาศ . อีกวิธีหนึ่งคือผูกได้โดยใช้ชุดการรักษา เช่น การเพิ่มส่วนผสมเริ่มต้นเฟสของแข็งในภาชนะ , การผสม , การแยกเฟสของแข็ง เอาเฟสของเหลวซักผ้า เป็นสารเพิ่มชนิดสารบัฟเฟอร์อีกครั้งและเอาสารละลาย ( eluate ) .

บางครั้งวิธีไฮบริดที่ใช้เช่น เป็นความผูกพันที่ทำโดยกลุ่ม วิธีการแต่เฟสของแข็งกับเป้าหมายโมเลกุลผูกแน่นลงบนเสา และล้าง และใช้ทำในคอลัมน์

วิธีที่สามการขยายเตียงที่ผสมผสานข้อดีของทั้งสองวิธีที่กล่าวข้างต้น ยังได้รับการพัฒนา อนุภาคเฟสของแข็งจะอยู่ในคอลัมน์ที่สูบในเฟสของเหลวจากด้านล่าง และทางออกที่ด้านบนแรงโน้มถ่วงของอนุภาคให้เฟสของแข็งไม่ได้ออกจากคอลัมน์ที่มีเฟสของเหลว

affinity คอลัมน์สามารถตัวอย่าง โดยการเปลี่ยนความเข้มข้น เกลือ ด่าง ปี่ ประจุ และความแรงของไอออนโดยตรง หรือผ่านการแก้ไขอนุภาคของดอกเบี้ย