2.5. Histological analysisIntestina

2.5. Histological analysis
Intestinal samples were fixed in 10% neutral buffered formalin for 24 h and then transferred to 70% ethanol.
Samples were then dehydrated through a graded series of ethanol (70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%) using a tissue processor (TP 1020, Leica, USA), cleared (CitriSolv, Fisherbrand, USA) and embedded in paraffin wax.
Transverse sections (~7 μm) were prepared using a rotary microtome (Mod. 820, American Optical, USA), mounted onto slides and processed for staining with hematoxylin and eosin (H&E).
Slides were viewed under light microscopy (BX51, Olympus America Inc., USA) and photographed with a digital camera (DCM580, Motic, Canada).
The intestine of fish fed the FM100 treatmentwere considered to be normal (i.e., no signs of enteritis), and changes in morphology were assessed based on deviations from this appearance.
Five morphological parameters were evaluated using a semi-quantitative scoring system (Baeverfjord and Krogdahl, 1996; Urán et al., 2008).
Scores for each parameter were assigned based on a scale of 1 to 5 (where 1 indicated a normal condition and 5 the most evident signs of enteritis) and included: tissue integrity and length of the mucosal folds (MF), abundance of goblet cells (GC), width of the lamina propria (LP), presence and size of supranuclear vacuolization (SNV) in the mucosal folds, and thickness of the sub-epithelial mucosa (SM).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. ลักษณะวิเคราะห์ตัวอย่างลำไส้ถูกแก้ไขใน 10% formalin บัฟเฟอร์กลางใน 24 h และโอนไป 70% เอทานอล ตัวอย่าง แล้วอบแห้งผ่านชุดจัดระดับของเอทานอล (70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%) โดยใช้ตัวประมวลผลเนื้อเยื่อ (TP 1020 ไลก้า สหรัฐอเมริกา), เคลียร์ (CitriSolv, Fisherbrand สหรัฐอเมริกา) และฝังในพาราฟิน ส่วนขวาง (~ 7 ไมครอน) ถูกเตรียมใช้เครื่องโรตารี่ microtome (820 Mod. อเมริกันออปติคอล สหรัฐอเมริกา), ติดตั้งลงในภาพนิ่ง และการประมวลผลสำหรับการย้อมสี hematoxylin และ eosin (H & E) ภาพนิ่งถูกแสดงภายใต้แสงไมโครสโค (BX51, Olympus อเมริกา อิงค์ สหรัฐอเมริกา) และถ่ายภาพ ด้วยกล้องดิจิทัล (DCM580, Motic แคนาดา) ลำไส้ของปลาเลี้ยง treatmentwere FM100 ที่ถือว่าเป็นปกติ (เช่น ไม่มีสัญญาณของ enteritis), และการเปลี่ยนแปลงในลักษณะทางสัณฐานวิทยาได้ประเมินตามความแตกต่างจากลักษณะนี้ พารามิเตอร์สัณฐานห้าได้ถูกประเมินโดยใช้ระบบการให้คะแนนเชิงกึ่งปริมาณ (Baeverfjord และ Krogdahl, 1996 Urán et al. 2008) กำหนดคะแนนสำหรับแต่ละพารามิเตอร์บนสเกล 1-5 (ที่ 1 ระบุเงื่อนไขปกติและ 5 สัญญาณชัดเจนที่สุดของ enteritis) และรวม: ความสมบูรณ์ของเนื้อเยื่อและความยาวเท่า mucosal (MF), ความอุดมสมบูรณ์ของเซลล์เว็ท (GC), ความกว้างของแผ่นใบ propria (LP), สถานะ และขนาดของ supranuclear vacuolization (เข็ม) จีบ mucosal และความหนาของเยื่อบุผิวย่อย mucosa (SM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวิเคราะห์ทางจุลกายวิภาค
ตัวอย่างลำไส้ได้รับการแก้ไขใน 10% ฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ที่เป็นกลางเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและจากนั้นโอนถึง 70% เอทานอล.
กลุ่มตัวอย่างเป็นแล้วคายน้ำผ่านชุดอย่างช้า ๆ ของเอทานอล (70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100 %) โดยใช้หน่วยประมวลผลเนื้อเยื่อ (TP 1020 Leica, USA) ล้าง (CitriSolv, Fisherbrand, สหรัฐอเมริกา) และฝังตัวอยู่ในพาราฟิน.
ส่วนขวาง (~ 7 ไมครอน) ได้จัดทำขึ้นโดยใช้ไมโครโรตารี (Mod. 820, อเมริกันออปติคอล, USA) ติดตั้งลงบนสไลด์และประมวลผลสำหรับการย้อมสีด้วย hematoxylin และ Eosin (H & E).
สไลด์ถูกมองภายใต้กล้องจุลทรรศน์ (BX51 โอลิมปัอเมริกาอิงค์สหรัฐอเมริกา) และถ่ายภาพด้วยกล้องดิจิตอล (DCM580, MOTIC แคนาดา).
ลำไส้ ของปลาที่เลี้ยง FM100 treatmentwere ถือว่าเป็นปกติ (เช่นไม่มีสัญญาณของลำไส้) และการเปลี่ยนแปลงในลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่ถูกประเมินบนพื้นฐานของการเบี่ยงเบนจากลักษณะนี้.
ห้าพารามิเตอร์ทางสัณฐานวิทยาได้รับการประเมินโดยใช้กึ่งเชิงปริมาณระบบการให้คะแนน (Baeverfjord และ Krogdahl 1996 .. Uran et al, 2008)
คะแนนสำหรับแต่ละพารามิเตอร์ที่ได้รับมอบหมายตามในระดับ 1 ถึง 5 (ที่ 1 แสดงให้เห็นสภาพปกติและ 5 สัญญาณที่เห็นได้ชัดที่สุดของลำไส้) และรวม: ความสมบูรณ์ของเนื้อเยื่อและความยาวของการพับกระดาษเยื่อเมือก (MF) ความอุดมสมบูรณ์ของเซลล์แก้ว (GC), ความกว้างของบาง propria (LP) การปรากฏตัวและขนาดของ supranuclear vacuolization (SNV) ในการพับกระดาษเยื่อเมือก, และความหนาของเยื่อบุย่อยเยื่อบุผิว (SM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การวิเคราะห์ผลตัวอย่างไส้ถูกกำหนดใน 10% ฟอร์มาลินเป็นกลางใน 24 H และโอนให้กับ แอลกอฮอล์ 70%จำนวนแล้วอบแห้งผ่านระดับชุดของเอทานอล ( 70% , 80% , 85% 90% , 95% , 100% ) โดยใช้เนื้อเยื่อหน่วยประมวลผลกลาง ( TP 885 , Leica , USA ) , ลบ ( citrisolv fisherbrand , USA ) และฝังอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟินส่วนตามขวาง ( ~ 7 μ M ) เตรียมใช้เครื่องตัดชิ้นเนื้อหมุน ( mod 820 , American Optical , USA ) , ติดบนสไลด์ และประมวลผลเพื่อการศึกษาย้อมและ eosin ( H & E )ภาพนิ่งยังดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง ( USA bx51 , Olympus America Inc . ) และถ่ายภาพด้วยกล้องดิจิตอล ( dcm580 motic , แคนาดา )ลำไส้ของปลาที่ได้รับ fm100 treatmentwere ถือว่าเป็นปกติ ( เช่น ไม่มีอาการของลำไส้อักเสบ ) , และการเปลี่ยนแปลงในโครงสร้างจะถูกประเมินตามการเบี่ยงเบนจากลักษณะนี้ห้าของพารามิเตอร์ ได้แก่ การใช้ระบบการให้คะแนน ( และกึ่งปริมาณ baeverfjord krogdahl , 1996 ; ur . kgm n et al . , 2008 )คะแนนสำหรับแต่ละพารามิเตอร์ที่ได้รับมอบหมายตามระดับของ 1 ถึง 5 ( ที่ 1 แสดงภาพปกติและ 5 สัญญาณที่เห็นได้ชัดที่สุดของลำไส้อักเสบ ) และมีความสมบูรณ์และความยาวของการพับ ( ( MF ) , ความอุดมสมบูรณ์ของถ้วยเซลล์ ( GC ) , ความกว้างของแผ่นกล้ามเนื้อ ( LP ) , การแสดงและ ขนาดของ supranuclear หลัง ( snv ) ในบริเวณช่องคลอด และความหนาของเยื่อบุผิวเยื่อเมือกย่อย ( SM )