We have developed a novel PCR-based

We have developed a novel PCR-based assay for individual and simultaneous detection of three major pathogens (microsporidians, nucleopolyhedrovirus (NPV) and densovirus (DNV)) infecting the silkworm, Bombyx mori. Multiplex PCR, using three primer pairs, two of which were designed from the conserved regions of 16S small subunit ribosomal RNA gene of microsporidians, and polyhedrin gene of NPVs respectively, and a third primer pair designed from the internal sequences of B. mori DNVs (BmDNV), showed discrete and pathogen specific PCR products. The assay showed high specificity and sensitivity for the pathogenic DNA. Under optimized PCR conditions, the assay yielded a 794 bp DNA fragment from Nosema bombycis, 471 bp fragment from B. mori NPV (BmNPV) and 391 bp fragment from BmDNV. Further, this detection method was successfully applied to other silkworm species such as Antheraea mylitta and Samia cynthia ricini, in detecting same or similar pathogens infecting them. This method is a valuable supplement to the conventional microscopic diagnostic methods and can be used for the early detection of pathogens infecting silkworms. Furthermore it can assist research and extension centers for the safe supply of disease-free silkworms to farmers.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราได้พัฒนานวนิยายผลทดสอบตรวจพร้อมกัน และแต่ละโรคหลักสาม (microsporidians, nucleopolyhedrovirus (NPV) และ densovirus (DNV)) ติดไหม ไหม Multiplex PCR ใช้รองพื้นคู่สามและคู่รองพื้นสาม สองซึ่งถูกออกแบบมาจากแคว้น 16S ย่อยเล็ก ribosomal อาร์เอ็นเอยีนของ microsporidians และยีน polyhedrin ของ NPVs นำตามลำดับ การออกแบบจากลำดับภายในของโมริเกิด DNVs (BmDNV), พบเดี่ยว ๆ และศึกษาเฉพาะ PCR วิเคราะห์การพบ specificity สูงและความไวของดีเอ็นเอ pathogenic สภาวะให้เหมาะ PCR การวิเคราะห์หาส่วนดีเอ็นเอของ bp 794 Nosema bombycis ส่วน bp 471 จากโมริเกิด NPV (BmNPV) และส่วน bp 391 จาก BmDNV เพิ่มเติม วิธีนี้ตรวจหาเสร็จเรียบร้อยแล้วใช้สปีชีส์อื่น ๆ ไหม Antheraea mylitta และ Samia cynthia ricini ในการตรวจหาโรคเดียวกัน หรือคล้ายกันติดได้ วิธีการนี้เป็นอาหารเสริมมีวิธีวินิจฉัยด้วยกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา และสามารถใช้สำหรับการตรวจพบโรคติด silkworms ต้น นอกจากนี้ยัง สามารถช่วยงานวิจัยและขยายศูนย์สำหรับการจัดหาปลอดภัยปราศจากโรค silkworms กับเกษตรกรได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้มีการพัฒนาทดสอบนวนิยาย PCR ที่ใช้สำหรับการตรวจสอบบุคคลและพร้อมกันของสามเชื้อโรคที่สำคัญ (microsporidians, nucleopolyhedrovirus (NPV) และ densovirus (DNV)) ติดไวรัสไหม, Bombyx สุดตา multiplex PCR โดยใช้ไพรเมอร์สามคู่สองซึ่งได้รับการออกแบบจากบริเวณป่าสงวนของ 16S ขนาดเล็ก subunit ยีนโซมอลอาร์เอ็นเอของ microsporidians และยีน polyhedrin ของ NPVs ตามลำดับและคู่ไพรเมอร์ที่สามได้รับการออกแบบจากลำดับภายในของบีมอริ DNVs ( BmDNV) แสดงให้เห็นต่อเนื่องและการติดเชื้อเฉพาะผลิตภัณฑ์ PCR การทดสอบแสดงให้เห็นความจำเพาะสูงและความไวในการตรวจดีเอ็นเอที่ทำให้เกิดโรค ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดวิธี PCR, ให้ผลการทดสอบชิ้นส่วนดีเอ็นเอ 794 bp จาก nosema bombycis ชิ้น 471 bp จากบีสุดตา NPV (BmNPV) และชิ้นส่วน 391 bp จาก BmDNV นอกจากนี้วิธีการตรวจสอบนี้ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จในสายพันธุ์ไหมอื่น ๆ เช่น mylitta Antheraea และ Samia cynthia ricini ในการตรวจสอบเชื้อโรคเดียวกันหรือคล้ายกันพวกเขาติดไวรัส วิธีการนี​​้เป็นอาหารเสริมที่มีคุณค่าให้กับวิธีการวินิจฉัยด้วยกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาและสามารถนำมาใช้สำหรับการตรวจหาการติดเชื้อของเชื้อโรคดักแด้ นอกจากนี้มันสามารถช่วยให้ศูนย์การวิจัยและส่วนขยายสำหรับการจัดหาที่ปลอดภัยของดักแด้ปลอดโรคให้กับเกษตรกร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เจ้าหน้าที่รักษาความปลอดภัย