Anaerobic digestion experiment was

Anaerobic digestion experiment was conducted using modified biochemical methane potential (BMP) procedures (Owen et al., 1979; Shelton and Tiedje, 1984) with glucose (at a final concentration of 1 g/L) as a substrate. The anaerobic sludge samples were treated (in duplicates) with NZVI or ZVI powder at the final concentrations of 0, 1, 10, 30 mM NZVI (or
1680 mg Fe/L), and 30 mM ZVI powder (70 mesh,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไม่ใช้ย่อยอาหารทดลองได้ดำเนินการใช้มีเทนชีวเคมีปรับเปลี่ยนศักยภาพ (Owen et al., 1979 ขั้นตอน (BMP) เชลตันและ Tiedje, 1984) กับกลูโคส (ที่เข้มข้นสุดท้ายของ 1 g/L) เป็นพื้นผิว ตัวอย่างตะกอนที่ไม่ใช้ออกซิเจนได้รับการรักษา (ในซ้ำ) NZVI หรือ ZVI ผงที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 0, 1, 10, 30 mM NZVI (หรือ
1680 มิลลิกรัม Fe/L), และผง ZVI 30 มม. (ตาข่าย 70, < 212 mm, Acros) พร้อมกับลบตัวควบคุม (ไม่มีน้ำตาลกลูโคส NZVI/ZVI ไม่) ตัวควบคุม abiotic และตะกอนไม่ใช้ความร้อนฆ่า (80 C สำหรับ
30 นาที) ประกอบด้วย 30 มม. NZVI ได้เตรียมที่จะเปรียบเทียบอัตราการผลิตไฮโดรเจนและไฮโดรเจนสะสมก๊าซ vol-ออฟฟิศที่ตะกอนจุลินทรีย์ไร้อากาศแบบรับ 30 มม. NZVI สมาธิเหล็กสูง (30 mM) ได้รับเลือกตามข้อเท็จจริงของ NZVI ใช้ประสบความสำเร็จในการลด TCE ที่ความเข้มข้นสูงสุดของ 1500 mg/L (Kirschling et al., 2010) Headspace ของตะกอนขวดถูกลบ ด้วยก๊าซไนโตรเจนบริสุทธิ์สำหรับ 5 นาทีก่อนขวดปิดผนึก และผสมประมาณ 14 วัน ชำระ (ที่ 300 รอบต่อนาที) ในช่วงเวลาที่ผลิตก๊าซชีวภาพและปริมาณก๊าซชีวภาพที่สะสมถูกบันทึกไว้โดยอัตโนมัติทุก 10 นาที โพผลิตมีเทนที่สะสมได้รับ โดยรวมของการผลิตมีเทน (¼ก๊าซชีวภาพผลิตปริมาณมีเทนเศษในการผลิตก๊าซ) ที่ลำดับใน-tervals (เช่น ในวันที่ 0, 1, 2, 3, 5, 8, 12, 14) ในทำนองเดียวกัน โพรไฟล์การผลิตไฮโดรเจนถูกสร้างหลังจากกำหนดความเข้มข้นไฮโดรเจนในการผลิตก๊าซระหว่างก๊าซแต่ละเชนระยะการ

2.3 ผลกระทบของ NZVI ไม่ใช้ย่อยอาหารใต้ยับยั้งการ methanogenesis สมบูรณ์

methanogens และแบคทีเรียสามารถแย่งก๊าซไฮโดรเจนภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน (Kotsyurbenko และ al., 2001) การ elucidate ผลของ NZVI เหล่านี้สำคัญทางชีวภาพโป-cesses ในการย่อยอาหารที่ไม่ใช้ออกซิเจน โซเดียม 2-bromoethanesulfonate (ด้านข้าง), แอนะล็อก coenzyme M ที่ยับยั้ง methanogenesis (Gunsalus et al., 1978 Kotsyurbenko และ al., 2001), ถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละตัวอย่างตะกอนที่เข้มข้นสุดท้ายของ 50 มม.ให้ยับยั้งการ methanogenesis สมบูรณ์ (Parameswaran et al.,
2009 Zinder et al., 1984) มีดำเนินการออกแบบการทดลองเดียวกันอีกครั้งที่อธิบายข้างต้นแต่ทั้งหมดรักษา-ments อยู่ 50 มม.ด้านข้าง

2.4 วิเคราะห์องค์ประกอบและสารเคมีแก๊ส

เนื้อหาไฮโดรเจนและมีเทนในก๊าซชีวภาพได้วิเคราะห์ โดย chromatography ก๊าซ (GC, Shimadzu, 2014) พร้อมกับตรวจการนำความร้อน (TCD) ใช้ ShinCarbon ST 80 /
100 คอลัมน์ (Restek PA) เป็นตัวแยกคอลัมน์และฮีเลียมก๊าซเป็นก๊าซผู้ขนส่ง พารามิเตอร์การปฏิบัติ GC มีดังนี้: ฉีดอุณหภูมิ C 100 อัตราการไหล 10 mL/min ที่อุณหภูมิคอลัมน์ 40 C สำหรับนาที 3 แล้วเพิ่มขึ้น
C 140 ที่ 25 C/นาที และที่ C 140 สำหรับ 3.5 นาทีขณะ
TCD อุณหภูมิจัดขึ้นที่ 200 C.
สำหรับการวิเคราะห์ทางเคมี aliquots (8 mL) ของสารละลายของเหลวที่ผสมได้มาจากตัวอย่างในวันที่ 0, 0.17 (4 h), 1, 2, 3, 5, 8, 12 และ 14 การละลาย COD (SCOD), ค่า pH, VFAs วัดตามวิธีมาตรฐาน (อาภา et al., 2005) ออกซิเดชันและลดศักยภาพ (ORP) ผสมตะกอนเหล้าหลังจากย่อยอาหารถูกกำหนด โดยเครื่องวัดค่า pH/OPR (Fisher XL-

15 m) ร่วมกับการไฟฟ้า ORP มีการอธิบายรายละเอียดวิเคราะห์ในผู้แต่งสำหรับ VFAs อื่น ๆ (Yang et al.,
2012a) มีดำเนินการสุ่มตัวอย่างทั้งหมดในกล่องถุงมือ anoxic (Coy ปฏิบัติผลิตภัณฑ์ อิงค์ MI) ที่มี 5% H2 และ 95% N2 เพื่อหลีกเลี่ยงการสัมผัสออกซิเจน เหล็กละลายเข้มข้นในสารกรองสารละลายของเหลวผสมหลังจากผ่านการกำหนด โดยมีแกรไฟต์เตาปรมาณู absor-bance เครื่องทดสอบกรดด่าง (GFAAS บัค 220 GF บัค Inc, CT) 45 มม.กรองใช้โซลูชัน 0.2% HNO3 เป็นโซลูชันเจือจาง ก่อนการวิเคราะห์เหล็ก การ aliquot ของ (120 mL) 1 บัญชี MgNO3 ปรับเป็นเมตริกซ์ มีเพิ่มแต่ละมาตรฐานและตัวอย่างการลดการผลิต carbides เนื่องจากสถานะของคาร์บอนอินทรีย์ตามคู่มือของผู้ผลิต ขีดจำกัดการตรวจเหล็กล่างของ GFAAS มี 5 mg/L. การหลีกเลี่ยงเป็นการปนเปื้อนโลหะ แก้วทั้งหมดถูกนำไปแช่ใน 10% กรดไนตริกโซลูชัน และ rinsed น้ำ DI ก่อนใช้แล้ว

2.5 วิเคราะห์ ESEM EDS

สิ่งแวดล้อมแกน microscopy อิเล็กตรอน (ESEM เฝ่ย Quanta 600F หรือ) ควบคู่กับพลังงาน dispersive เอกซเรย์สเปค-troscopy (EDS) ถูกใช้เพื่อกำหนดองค์ประกอบทางเคมีของตะกอนไม่ใช้หลังการรักษา NZVI ตัวอย่างสารละลายของเหลวผสมถูกเก็บรวบรวมที่สุดของชุดทดลองย่อยอาหารที่ไม่ใช้ออกซิเจน แต่ละตัวอย่างมีเพิ่มโดยตรงบนขั้วตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ ESEM EDS รูปภาพของตัวอย่างที่ถ่ายที่แรงดันไฟฟ้าระหว่าง 7 และ 10 keV ภายใต้โหมดการดูดที่สูงของการดำเนินงาน

2.6 Methanogenic ประชากรวิเคราะห์หลังจาก NZVI
แสงและไม่ใช้ออกซิเจนย่อยอาหาร

เพื่อกำหนดชุมชน methanogenic และพลศาสตร์ของสเตรชัน popula ในระหว่างการย่อยอาหารที่ไม่ใช้ออกซิเจน โดยปฏิกิริยาลูกโซ่เชิงปริมาณ po-lymerase (qPCR), ตัวอย่างตะกอนถูกรวบรวมสำหรับสกัดดีเอ็นเอก่อน และ หลังการย่อยอาหารที่ไม่ใช้ออกซิเจน รวม genomic DNA ที่สกัดจาก 1.5 mL ของสารละลายของเหลวผสมที่ใช้ใน MoBio Ultra CleanTM ดินดีเอ็นเอแยกชุด (ห้องปฏิบัติการ MoBio, Inc. คาร์ลส CA) ดีเอ็นเอถูก quantified โดย Nanodrop ND1000 (NanoDrop เทคโนโลยี วิลมิ NC สหรัฐอเมริกา) และความบริสุทธิ์ได้ตามอัตราส่วน 260/280 nm absorbance ที่วัด ตัวอย่างดีเอ็นเอแยกถูกเก็บไว้ที่ 20 C ก่อนที่จะใช้
2 ชั้นของ methanogens acetoclastic (Methanosaeta และ Methanosarcina) ที่แปลง acetate เป็นมีเทนและสามใบสั่ง hydrogenotrophic methanogens (จาก anobacteriales Methanococci และ Methanomicrobiales) ที่แปลงไฮโดรเจนและคาร์บอนไดออกไซด์เป็นมีเทนมีบทบาทสำคัญในการย่อยอาหารที่ไม่ใช้ออกซิเจน (Garrity, 2001) Methanococci ไม่ได้ศึกษา เพราะพวกเขามักจะไม่พบในระบบย่อยอาหาร และส่วนใหญ่อยู่ที่ความเข้มข้นเกลือสูง (Garrity, 2001 ลีเอส al., 2009) qPCR assays ได้ดำเนินการระบบการ ABI 7500 Real Time PCR และวิเคราะห์ ด้วยซอฟต์แวร์ระบบ SDS 7500 (รุ่น 1.4, Biosystems ใช้ CA) ข้อมูลรายละเอียดเกี่ยวกับไพรเมอร์ 4 ชุดโพรบที่ใช้ใน qPCR มาตรฐานภายในเตรียมจาก 16S การโคลนยีน rRNA ของกลุ่มชื่อดังจาก-anogenic และโค้งมาตรฐาน qPCR ตาม plasmids สำหรับแต่ละกลุ่ม methanogenic อธิบายอื่น ๆ (Yang et al., 2012b) .

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Anaerobic digestion experiment was conducted using modified biochemical methane potential (BMP) procedures (Owen et al., 1979; Shelton and Tiedje, 1984) with glucose (at a final concentration of 1 g/L) as a substrate. The anaerobic sludge samples were treated (in duplicates) with NZVI or ZVI powder at the final concentrations of 0, 1, 10, 30 mM NZVI (or
1680 mg Fe/L), and 30 mM ZVI powder (70 mesh, <212 mm, Acros) along with negative controls (no glucose, no NZVI/ZVI). An abiotic control and a heat-killed anaerobic sludge (80 C for
30 min) containing 30 mM NZVI were prepared to compare the hydrogen production rate and cumulative hydrogen gas vol- ume with that of the anaerobic sludge treated with 30 mM NZVI. The highest iron concentration (30 mM) was chosen based on the fact of successful use of NZVI in TCE reduction at the highest concentration of 1500 mg/L (Kirschling et al., 2010). The headspace of sludge bottle was purged with pure nitrogen gas for 5 min before the bottle was sealed and mixed magnetically (at 300 rpm) for about 14 days, during which time biogas production and the cumulative biogas volume were automatically recorded every 10 min. The cumulative methane production profile was obtained by the summation of methane production (¼ biogas production volume methane fraction in the biogas) at sequential in- tervals (e.g., on days 0, 1, 2, 3, 5, 8, 12, 14). Similarly, the hydrogen production profile was generated after determining the hydrogen concentration in the biogas during each gas sampling period.

2.3. Impact of NZVI on anaerobic digestion under complete methanogenesis inhibition

Bacteria and methanogens can compete for hydrogen gas under anaerobic conditions (Kotsyurbenko et al., 2001). To elucidate the effect of NZVI on these important biological pro- cesses in anaerobic digestion, sodium 2-bromoethanesulfonate (BES), a coenzyme M analog that inhibits methanogenesis (Gunsalus et al., 1978; Kotsyurbenko et al., 2001), was added to each sludge sample at a final concentration of 50 mM to ensure complete methanogenesis inhibition (Parameswaran et al.,
2009; Zinder et al., 1984). The same experimental design was executed again as described above except that all the treat- ments contained 50 mM BES.

2.4. Gas composition and chemical analysis

Hydrogen and methane contents in the biogas were analyzed by gas chromatography (GC, Shimadzu, 2014) equipped with a thermal conductivity detector (TCD) using ShinCarbon ST 80/
100 Column (Restek, PA) as a separation column and helium gas as a carrier gas. The GC operating parameters were as follows: injection temperature, 100 C; flow rate, 10 mL/min; column temperature, held at 40 C for 3 min, then increased to
140 C at 25 C/min and held at 140 C for 3.5 min while the
TCD temperature was held at 200 C.
For chemical analysis, aliquots (8 mL) of mixed liquid slurry were taken from the samples on day 0, 0.17 (4 h), 1, 2, 3, 5, 8, 12, and 14 for soluble COD (SCOD), pH, and VFAs measurements according to the standard methods (APHA et al., 2005). The oxidation and reduction potential (ORP) in mixed sludge liquor after digestion was determined by a pH/OPR meter (Fisher XL-

15 m) combined with an ORP electrode. Detailed analytical in- formation for VFAs has been described elsewhere (Yang et al.,
2012a). All sampling was conducted in an anoxic glove box (Coy Laboratory Products Inc., MI) containing 5% H2 and 95% N2 to avoid oxygen exposure. Dissolved iron concentration in the filtrate of the mixed liquid slurry after passing through a 0.45- mm filter was determined by a graphite furnace atomic absor- bance spectrophotometer (GFAAS, BUCK 220 GF, Buck Inc, CT) using 0.2% HNO3 solution as a dilution solution. Before iron analysis, an aliquot of (120 mL) 1 g/L MgNO3, a matrix modifier, was added to each standard and sample in order to reduce the production of carbides due to the presence of organic carbon according to the manufacturer’s manual. The lower iron detection limit of the GFAAS was 5 mg/L. To avoid potential metal contamination, all glassware was soaked in a 10% nitric acid solution and then rinsed with DI water before use.

2.5. ESEM-EDS analysis

Environmental scanning electron microscopy (ESEM, FEI Quanta 600F, OR) coupled with energy dispersive X-ray spec- troscopy (EDS) was applied to determine the chemical composition of anaerobic sludge after NZVI treatment. The mixed liquid slurry samples were collected at the end of batch anaerobic digestion experiments. Each sample was directly added onto a specimen stub for ESEM-EDS analysis. Images of the sample were taken at a voltage between 7 and 10 keV under a high vacuum mode of operation.

2.6. Methanogenic population analysis after NZVI
exposure and anaerobic digestion

To determine methanogenic communities and their popula- tion dynamics during anaerobic digestion by quantitative po- lymerase chain reaction (qPCR), Sludge samples were collected for DNA extraction before and after the anaerobic digestion process. Total genomic DNA was extracted from 1.5 mL of the mixed liquid slurry using the MoBio Ultra CleanTM Soil DNA isolation kit (MoBio Laboratories, Inc., Carlsbad, CA). The DNA was quantified by Nanodrop ND1000 (NanoDrop Technologies, Wilmington, NC, USA) and its purity was determined by measuring the 260/280 nm absorbance ratio. The extracted DNA samples were stored at 20 C before use.
Two classes of acetoclastic methanogens (Methanosaeta and Methanosarcina) that convert acetate into methane and three orders of hydrogenotrophic methanogens (Meth- anobacteriales, Methanococci and Methanomicrobiales) that convert hydrogen and carbon dioxide into methane play an important role in anaerobic digestion (Garrity, 2001). The Methanococci were not studied because they are often not detected in the digestion systems and mainly exist at high salt concentrations (Garrity, 2001; Lee et al., 2009). qPCR assays were performed on an ABI 7500 Real Time PCR System and analyzed with the 7500 SDS system software (version 1.4, Applied Biosystems, CA). Detailed information about the four primers and probe sets used in qPCR, the internal standards prepared from the 16S rRNA gene clones of known meth- anogenic groups, and the qPCR standard curves based on plasmids for each methanogenic group has been described elsewhere (Yang et al., 2012b).

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดลองย่อยไร้อากาศจำนวนแก้ไขมีศักยภาพทางชีวเคมี ( BMP ) วิธีการ ( Owen et al . , 1979 ; เชลตัน และ tiedje , 1984 ) กับกลูโคสที่ความเข้มข้นสุดท้าย 1 กรัม / ลิตร ) เป็นสับสเตรท ตัวอย่างตะกอนบำบัดรักษา ( ซ้ํา ) กับ nzvi หรือ zvi ผงที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 0 , 1 , 10 , 30 มม. nzvi ( หรือ
1680 มิลลิกรัม Fe / L )และ 30 มม. zvi ผง ( 70 mesh , < 212 มิลลิเมตร acros ) พร้อมกับการควบคุมเชิงลบ ( ไม่มีกลูโคส ไม่ nzvi / zvi ) มีการทดลองการควบคุมและใช้ความร้อนฆ่ากาก ( 80 C
30 นาที ) ที่มี nzvi 30 มม. เตรียมที่จะเปรียบเทียบอัตราการผลิตก๊าซไฮโดรเจนและก๊าซไฮโดรเจนสะสม Vol - อุเมะกับของกากตะกอนบำบัดรักษาด้วย nzvi 30 มิลลิเมตรปริมาณเหล็กสูงที่สุด ( 30 มม. ) ถูกเลือกบนพื้นฐานของข้อเท็จจริงของความสำเร็จในการใช้ nzvi TCE ที่ความเข้มข้นสูงสุด 1500 mg / l ( kirschling et al . , 2010 ) ส่วนเฮดสเปซของตะกอนเป็นขวดล้างด้วยแก๊สไนโตรเจนบริสุทธิ์สำหรับ 5 นาทีก่อนที่จะถูกผนึกขวดผสมแม่เหล็ก ( ที่ 300 รอบต่อนาที ) ประมาณ 14 วันในช่วงเวลาที่การผลิตก๊าซชีวภาพและปริมาณก๊าซชีวภาพรวมถูกบันทึกไว้โดยอัตโนมัติทุก 10 นาที วิเคราะห์ปริมาณก๊าซมีเทนสะสมได้โดยรวมของการผลิตก๊าซมีเทน ( ¼ก๊าซชีวภาพปริมาณการผลิตก๊าซมีเทนในก๊าซชีวภาพแบบเศษส่วน ) ใน tervals ( เช่น ในวันที่ 0 , 1 , 2 , 3 , 5 , 8 , 12 14 ) ในทํานองเดียวกันการผลิตไฮโดรเจนโปรไฟล์ถูกสร้างขึ้นหลังจากการกำหนดความเข้มข้นของไฮโดรเจนในก๊าซชีวภาพในแต่ละช่วงเวลาการสุ่มตัวอย่างแก๊ส

2.3 ผลกระทบของ nzvi บนย่อยไร้อากาศใต้เสร็จช้า ยับยั้งแบคทีเรียสร้างมีเทนสามารถแข่งขัน

และไฮโดรเจนก๊าซภายใต้สภาวะไร้อากาศ ( kotsyurbenko et al . , 2001 )เพื่อศึกษาผลของ nzvi เหล่านี้สำคัญทางชีววิทยา โปร - cesses ในการหมัก , โซเดียม 2-bromoethanesulfonate ( BES ) เป็นโคเอนไซม์ที่ยับยั้ง M แบบช้า ( gunsalus et al . , 1978 ; kotsyurbenko et al . , 2001 ) , ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตะกอนตัวอย่างที่ความเข้มข้นสุดท้าย 50 มม. เพื่อให้สมบูรณ์และช้า ( parameswaran et al . ,
2009 zinder et al . , 1984 )การออกแบบการทดลองเดียวกันถูกประหารชีวิตอีกครั้งตามที่อธิบายไว้ข้างต้นยกเว้นว่ารักษา - ments ที่มีอยู่ 50 mm อยู่

2.4 . ก๊าซองค์ประกอบ และการวิเคราะห์ทางเคมี

เนื้อหาไฮโดรเจนและมีเทนในก๊าซชีวภาพ โดยใช้แก๊สโครมาโทกราฟี ( GC , Shimadzu 2557 ) พร้อมตรวจจับการนำความร้อน ( TCD ) ใช้ shincarbon St 80 /
( restek 100 , คอลัมน์PA ) เป็นแยกคอลัมน์และก๊าซฮีเลียมเป็นแก๊สตัวพา GC พารามิเตอร์ต่างๆ ได้แก่ การฉีด อุณหภูมิ 100 C ; อัตราการไหล 10 มล. / นาที อุณหภูมิของคอลัมน์ที่จัดขึ้นที่ 40 องศาเซลเซียสนาน 3 นาที แล้วเพิ่มเป็น 140 C
ที่ 25 องศาเซลเซียส / นาทีและจัดขึ้นที่ 140 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 3.5 นาทีในขณะที่
Tb ที่อุณหภูมิ 200 C .
ที่จัดขึ้นที่ การวิเคราะห์ทางเคมีเฉยๆ ( 8 มิลลิลิตร ) ผสมสารละลายเหลว นำมาจากตัวอย่างในวันที่ 0 , 0.17 ( 4 ชั่วโมง ) 1 , 2 , 3 , 5 , 8 , 12 และ 14 สำหรับปลาที่ละลายน้ำได้ ( 20 ) , pH และ vfas การวัดตามวิธีมาตรฐาน ( apha et al . , 2005 ) ออกซิเดชันและการลดศักยภาพ ( ORP ) ในกากตะกอนผสมเหล้าหลังจากการย่อยโดยการวัดพีเอชมิเตอร์ / ที่หน่วย ตรวจสอบฯ ( Fisher XL -

15 เมตร ) รวมกับ ORP อิเล็กโทรดรายละเอียดการวิเคราะห์ในการสำหรับ vfas ได้ถูกอธิบายไว้ในที่อื่น ( หยาง et al . ,
2012a ) ทั้งหมดเพื่อดำเนินการในกล่องถุงมือซิก ( เขินห้องปฏิบัติการผลิตภัณฑ์อิงค์ มิประกอบด้วย H2 ) 5% และ 95 % N2 เพื่อหลีกเลี่ยงการสัมผัสออกซิเจน ความเข้มข้นของเหล็กที่ละลายในสารละลายผสมของของเหลว โดยหลังจากผ่าน 045 - กรองมม. ถูกกำหนดโดยเตากราไฟต์ ปรมาณู absor - bance Spectrophotometer ( gfaas บัคบัค 220 GF , Inc , CT ) โดยใช้สารละลายกรดดินประสิว 0.2% เป็นสารละลายเจือจาง ก่อนการวิเคราะห์เหล็กเป็นส่วนลงตัวของ ( 120 มล. ) 1 กรัมต่อลิตร mgno3 , เมทริกซ์ที่ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละมาตรฐาน และตัวอย่างที่ใช้ในการลดการผลิตของคาร์ไบด์เนื่องจากการแสดงตนของอินทรีย์คาร์บอนตามคู่มือของผู้ผลิต ราคาเหล็ก ขีดจำกัดของ gfaas คือ 5 มิลลิกรัมต่อลิตร เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนโลหะที่อาจเกิดขึ้นทุกแก้วมันถูกแช่ในสารละลาย 10% กรดไนตริกและจากนั้นล้างด้วยน้ำ DI ก่อนใช้

2.5

esem-eds การวิเคราะห์สิ่งแวดล้อมกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( ESEM เฟย Quanta , 600f หรือ ) ควบคู่ไปกับพลังงานกระจายตัวรังสีสเป็ค - troscopy ( EDS ) ถูกนำมาใช้เพื่อหาองค์ประกอบทางเคมีของตะกอนหลังจาก nzvi บำบัดรักษา ตัวอย่างสารละลายของเหลวผสมเก็บในตอนท้ายของชุดย่อยไร้อากาศของการทดลอง แต่ละตัวอย่างได้โดยตรงเพิ่มลงบนตัวอย่างต้นขั้วสำหรับการวิเคราะห์ esem-eds .ภาพตัวอย่างถ่ายที่แรงดันไฟฟ้าระหว่าง 7 และ 10 เคฟภายใต้สุญญากาศสูง โหมดของการดำเนินงาน .

2.6 การวิเคราะห์หลังการ nzvi ประชากรจุลินทรีย์ย่อยไร้อากาศ


และเพื่อศึกษาชุมชนและพลวัตประชากรของจุลินทรีย์ - tion ในระหว่างการหมัก โดยปริมาณโป - ปฏิกิริยาลูกโซ่ lymerase ( qpcr )การเก็บรวบรวมตัวอย่างสลัดจ์สำหรับการสกัดดีเอ็นเอก่อนและหลังกระบวนการย่อยสลายแบบไม่ใช้ออกซิเจน รวมจีโนมดีเอ็นเอจาก 1.5 มิลลิลิตรของสารละลายของเหลวผสมโดยใช้ mobio Ultra cleantm ดินการสกัดดีเอ็นเอ Kit ( mobio ห้องปฏิบัติการ , Inc , Carlsbad , CA ) ดีเอ็นเอ quantified โดย nanodrop nd1000 ( เทคโนโลยี nanodrop Wilmington , NC ,สหรัฐอเมริกา ) และความบริสุทธิ์ของตนถูกกำหนดโดยการวัด 260 / 280 nm ค่าอัตราส่วน สกัด ดีเอ็นเอ ที่อุณหภูมิ 20 C ก่อนที่จะใช้ .
2 ห้องเรียน acetoclastic เมทาโนเจน ( methanosaeta อะซิเตทในการแปลงและ ) ก๊าซมีเทนและคำสั่งของ hydrogenotrophic เมทาโนเจน 3 - anobacteriales ( ยาบ้า ,methanococci methanomicrobiales ) และแปลงไฮโดรเจนและคาร์บอนไดออกไซด์เป็นก๊าซมีเทนมีบทบาทสำคัญในการหมัก ( Garrity , 2001 ) การ methanococci ไม่ได้เรียนเพราะพวกเขามักจะไม่พบในระบบการย่อยอาหาร และส่วนใหญ่อยู่ในระดับความเข้มข้นเกลือสูง ( Garrity , 2001 ; ลี et al . , 2009 )qpcr ) จำนวนการ abi 7500 เวลา PCR จริงระบบวิเคราะห์และเปรียบเทียบกับ 7500 SDS ซอฟแวร์ระบบ ( รุ่น 1.4 , Applied Biosystems , CA ) ข้อมูลรายละเอียดเกี่ยวกับสี่ชนิดที่ใช้ในการตรวจสอบชุด qpcr , มาตรฐานภายในจาก 16S rRNA ยีนที่โคลนไว้รู้จักยาบ้า - anogenic กลุ่มและ qpcr มาตรฐานเส้นโค้งบนพื้นฐานสำหรับแต่ละกลุ่ม 8 ) ได้ถูกอธิบายไว้ในที่อื่น ( หยาง et al . ,
2012b )