The "esterase" activity of hormone-

The "esterase" activity of hormone-sensitive lipase (HSL) was studied using water-soluble p-nitrophenyl butyrate (PNPB) as a substrate. Bovine adipose tissue HSL was purified to near homogeneity by precipitation at pH 5.0, followed by chromatography on DEAE-cellulose, phenyl-Sepharose, and high performance ion-exchange columns on Mono Q and Mono S. The purified preparation hydrolyzed emulsified triolein and cholesteryl oleate (CO), and water-soluble PNPB. In the two last steps of purification, the elution profile of the CO-hydrolyzing activity coincided with that of PNPB-hydrolyzing activity. The HSL was adsorbed to heparin-Sepharose and the CO- and PNPB-hydrolyzing activities were eluted together in the same peak. Diisopropylfluorophosphate (DFP) strongly inhibited the HSL activities and the inhibition profiles of the triolein-; CO-, and PNPB-hydrolyzing activities were essentially identical. Only one polypeptide of Mr 84,000 in partial purified HSL fraction was labeled by affinity labeling with [3H]DFP. On digestion of the enzyme with trypsin, the triolein- and CO-hydrolyzing activities were lost more rapidly than the PNPB-hydrolyzing activity. Phosphorylation increased the triolein-hydrolyzing activity to 40% more than that of the control, but did not affect the CO- and PNPB-hydrolyzing activities.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรม "esterase" ของลับของฮอร์โมนเอนไซม์ไลเปส (HSL) ได้ศึกษาการใช้ butyrate ที่ละลายใน p-nitrophenyl (PNPB) เป็นพื้นผิว วัวมันเปลว HSL มีบริสุทธิ์ที่ใกล้ homogeneity โดยฝนที่ pH 5.0 ตาม chromatography DEAE-เซลลูโลส phenyl Sepharose และคอลัมน์การแลกเปลี่ยนไอออนประสิทธิภาพสูง Q โมโนและ Mono s ได้ เตรียมบริสุทธิ์ hydrolyzed emulsified triolein และ cholesteryl oleate (CO), และ PNPB ที่ละลายใน ในตอนสุดท้ายสองของฟอก โพ elution ของกิจกรรมร่วม hydrolyzing ร่วมกับการที่กิจกรรม PNPB hydrolyzing HSL จะถูก adsorbed Sepharose เฮพารินและ CO - และ PNPB-hydrolyzing กิจกรรมได้ eluted กันในช่วงเดียวกัน Diisopropylfluorophosphate (DFP) ขอห้ามกิจกรรม HSL และโพรไฟล์การยับยั้ง triolein- CO- และ PNPB hydrolyzing กิจกรรมก็เป็นเหมือนกัน Polypeptide เดียวของนาย 84,000 ในเศษ HSL บริสุทธิ์บางส่วนถูกกำหนดป้ายชื่อ โดยความสัมพันธ์ที่ติดฉลากด้วย [3H] DFP ในการย่อยอาหารของเอนไซม์กับทริปซิน hydrolyzing triolein และบริษัทกิจกรรมได้หายไปอย่างรวดเร็วมากขึ้นกว่ากิจกรรม PNPB hydrolyzing Phosphorylation เพิ่มกิจกรรม triolein hydrolyzing 40% มากกว่าที่ตัวควบคุม แต่ไม่มีผลต่อกิจกรรม CO - และ PNPB-hydrolyzing

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

"การ esterase" การทำงานของเอนไซม์ไลเปสที่ไวต่อฮอร์โมน (HSL) ได้ทำการศึกษาโดยใช้ butyrate พี Nitrophenyl ที่ละลายน้ำได้ (PNPB) เป็นสารตั้งต้น เนื้อเยื่อไขมันวัว HSL บริสุทธิ์จะเป็นเนื้อเดียวกันที่อยู่ใกล้โดยการตกตะกอนที่ pH 5.0 ตามด้วยโคใน DEAE-เซลลูโลส phenyl-Sepharose และคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนที่มีประสิทธิภาพสูงในโมโน Q และโมโนเอสเตรียมไฮโดรไลซ์บริสุทธิ์ emulsified triolein และ Cholesteryl oleate (CO) และ PNPB ที่ละลายน้ำได้ ในสองขั้นตอนสุดท้ายของการทำให้บริสุทธิ์รายละเอียดชะกิจกรรม CO-hydrolyzing ในเวลาใกล้เคียงกับที่ของกิจกรรม PNPB-hydrolyzing HSL ถูกดูดซับไปเฮ-Sepharose และร่วมและกิจกรรม PNPB-hydrolyzing ถูกชะกันในยอดเขาที่เดียวกัน Diisopropylfluorophosphate (DFP) ขอยับยั้งกิจกรรม HSL และรูปแบบการยับยั้งของ triolein- นั้น ร่วมและกิจกรรม PNPB-hydrolyzing เหมือนกันเป็นหลัก เพียงคนเดียวของนาย polypeptide 84,000 ในบางส่วนส่วน HSL บริสุทธิ์ถูกตราหน้าว่าโดยการติดฉลากที่มีความสัมพันธ์ [3H] DFP ในการย่อยของเอนไซม์ที่มี trypsin ที่ triolein- และกิจกรรม CO-hydrolyzing ถูกกลืนหายไปเร็วกว่ากิจกรรม PNPB-hydrolyzing phosphorylation เพิ่มกิจกรรม triolein-hydrolyzing ถึง 40% มากกว่าที่ของการควบคุม แต่ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อร่วมและกิจกรรม PNPB-hydrolyzing

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

" , " กิจกรรมของฮอร์โมนเอนไซม์ไลเปสที่สําคัญ ( HSL ) ศึกษาการใช้น้ำ p-nitrophenyl บิว ( pnpb ) เป็นสับสเตรท และเนื้อเยื่อไขมัน HSL ทำให้บริสุทธิ์โดยการตกตะกอนที่ pH 5.0 ใกล้ค่า ตามด้วยโครมาโตกราฟีบน DEAE เซลลูโลส ) เกี่ยวข้องและประสิทธิภาพสูง 2 คอลัมน์ใน Mono Q และ Mono Sการเตรียมไฮโดรไลซ์และบริสุทธิ์ที่มีไตรโอลี นให้เป็นโอลีเอท ( CO ) , ละลาย pnpb . ในอีกสองขั้นตอนของการฟอก , เจ๊สัวโปรไฟล์ของ CO การย่อยกิจกรรม ประจวบเหมาะกับที่ pnpb การย่อยกิจกรรม และ HSL ดูดซับเพื่อเกี่ยวข้องเฮปารินและ Co - และ pnpb การย่อยตัวอย่างกิจกรรมร่วมกันในช่วงเดียวกันทฤษฎีการสืบทอดข้ามพันธุ์ ( dfp ) ขอยับยั้ง HSL และกิจกรรมการยับยั้งโปรไฟล์ของไตรโอลี น - - ; Co , pnpb การย่อยและกิจกรรมหลักที่เหมือนกัน เพียงหนึ่งพอลิเพปไทด์ของนาย 84000 ที่บริสุทธิ์บางส่วนโดยการติดฉลาก HSL เศษส่วนถูกด้วย [ 3 ] dfp พี่น้องกัน . ในการย่อยด้วยเอนไซม์ของเอนไซม์ ,ส่วนไตรโอลี น - และร่วมกิจกรรมการย่อยหายไปอย่างรวดเร็วมากขึ้นกว่า pnpb การย่อยกิจกรรม ปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชันเพิ่มการย่อยไตรโอลี นกิจกรรม 40% มากกว่าที่ควบคุม แต่จะไม่มีผลต่อการย่อย pnpb Co - และกิจกรรมต่างๆ