The plasmids from the transformed E

The plasmids from the transformed E. coli DH5a white colonies were confirmed for the presence of recombinant construct pTZ57R/T – cry2A using PCR and restriction analysis. Sin- gle digestion with EcoRI resulted in 4.7 kb fragment and double
digestion with EcoRI and HindIII released vector (2.8 kb) and insert (1.9 kb). The recombinant plasmid was sequenced using M13/pUC forward sequencing primer ( 20) and M13/pUC reverse sequencing primer ( 26) using DNA sequencer (ABI 3730xl Genetic) at Xcel- ris Labs Ltd, Gujarat, India. The open reading frame of gene consisted of 1902 bases. The PCR product was digested in vitro with a non- cutter (HindIII) and cutter (EcoRII) endonuclease as revealed by in silico digestion (web cutter 2.0; http://bio.biomedicine.gu.se/ cutter2) of previously reported cry2A type sequences and our newly obtained cry2A gene sequence.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Plasmids จาก coli E. แปรรูปขาวอาณานิคมได้รับการยืนยันการมีอยู่ของ recombinant DH5a สร้าง pTZ57R T – cry2A ใช้ PCR และข้อจำกัดการวิเคราะห์ บาปวย่อย ด้วย EcoRI ผล ในส่วน 4.7 kb และเตียงคู่ย่อยอาหาร ด้วย EcoRI และ HindIII ออกแบบเวกเตอร์ (2.8 kb) และแทรก (1.9 kb) Recombinant plasmid ถูกเรียงลำดับโดยใช้ M13/pUC ไปข้างหน้าในการจัดลำดับสีรองพื้น (20) และ M13/pUC ลำดับย้อนหลังรองพื้น (26) ใช้ DNA sequencer (ABI 3730xl ทางพันธุกรรม) ที่ Xcel ris Labs Ltd, Gujarat อินเดีย เปิดอ่านกรอบของยีนประกอบด้วยฐาน 1902 ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย่อยในหลอดทดลองกับเครื่องไม่ใช่ตัด (HindIII) และ endonuclease ตัด (EcoRII) เปิดเผยโดยในการย่อยอาหารรูปดอกไม้ (ตัดเว็บ 2.0; http://bio.biomedicine.gu.se/ cutter2) ของรายงานลำดับชนิด cry2A และลำดับยีนของเรา cry2A ได้รับใหม่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พลาสมิดจากเชื้อ E. coli เปลี่ยน DH5a อาณานิคมสีขาวได้รับการยืนยันการปรากฏตัวของ recombinant สร้าง pTZ57R / T - cry2A ใช้วิธี PCR และการวิเคราะห์ข้อ จำกัด การย่อยอาหาร GLE บาปกับ EcoRI 4.7 ส่งผลให้ชิ้นส่วน KB และดับเบิล
ย่อยด้วยเวกเตอร์ EcoRI และ HindIII ปล่อยออกมา (2.8 KB) และแทรก (1.9 KB) พลาสมิด recombinant ถูกติดใจใช้ M13 / PUC ไปข้างหน้าไพรเมอร์ลำดับ (20) และ M13 / PUC ลำดับย้อนกลับไพรเมอร์ (26) โดยใช้ดีเอ็นเอซีเควน (ABI 3730xl ทางพันธุกรรม) ที่ Xcel- RIS Labs จำกัด รัฐคุชราตอินเดีย กรอบเปิดอ่านยีนประกอบด้วยฐาน 1902 ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย่อยในหลอดทดลองด้วยเครื่องตัดไม่ใช่ (HindIII) และเครื่องตัด (EcoRII) endonuclease เป็นเปิดเผยโดยใน silico ย่อยอาหาร (เว็บตัด 2.0 http://bio.biomedicine.gu.se/ cutter2) ของการรายงานก่อนหน้านี้ cry2A ลำดับประเภทใหม่และได้รับยีนของเรา cry2A

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พลาสมิดจากแปลง E . coli dh5a โคโลนีสีขาวยืนยันการแสดงตนของโปรตีนที่สร้าง ptz57r / T cry2a –การใช้ PCR และการวิเคราะห์ข้อจำกัด บาป GLE การย่อยอาหารด้วย ( 4.7 กิโลเบส และสองตัดด้วย EcoRI และ - ออกเวกเตอร์ ( 2.8 กิโลไบต์ ) และแทรก ( 1.9 กิโล ) การรีคอมบิแนนท์พลาสมิดนี้ใช้ M13 / puc ส่งต่อจัดลำดับ ไพรเมอร์ ( 20 ) และ M13 / โภคลำดับย้อนกลับ ( 26 ) โดยใช้ไพรเมอร์ซีเควน DNA ( ABI 3730xl พันธุกรรม ) ที่ Xcel - Labs RIS Ltd , Gujarat , อินเดีย เปิดอ่านกรอบของยีน ประกอบด้วยฐานอาเซียน ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย่อยในหลอดทดลองกับไม่ตัด ( สายพันธุ์ ) และตัด ( ecorii ) เอนโดนิวคลีเอสเปิดเผยว่า โดยในการย่อยอาหาร ( เว็บสำหรับเครื่อง 2.0 ; http://bio.biomedicine.gu.se/ cutter2 ) จากรายงานก่อนหน้านี้ cry2a ประเภทลำดับและของเราเพิ่งได้รับ cry2a ยีน ลำดับ