3.2. MS/MS acquisition parametersTh

3.2. MS/MS acquisition parameters
The optimization of acquisition parameters was carried out by series of flow injection experiments, and the optimal Fragmentor and Collision Energy (CE) are stated in Table 1.
The BA derivatives exhibit intense protonated molecular ions [M+H]+ in MS spectra, and [M+Na]+ is also observed.
For the MS/MS spectra, the main fragment ions from d0-MASC labeled BAs are at m/z 208 and m/z 224, and d3-MASC labeled BAs give fragment ions at m/z 211 and m/z 227.
The representative MS/MS of (d0-MASC)2-TRY and (d3-MASC)2-TRY are shown in Fig. 2(A). As can be seen from
Fig. 2(A), the most abundant fragment at m/z 208 or m/z 211 is 10-methylacridone cation which can be expressed as [d0-MA]+ or [d3-MA]+.
And the MRM transitions of [M+H]+?[MA]+ were used for quantification analysis in our experiments. In addition, the
whole HPLC–MS/MS run were divided into three segments.
Segment I is set to waste, avoiding high concentration of 10-methyl-acridone-2-sulfonyl acid (MASC-OH) contaminate ion source.
Segment II and III are set to source, acquiring MRM signals of BAs derivatives.

3.3. Analytical characters
The method was validated by a series of BAs standards labeled with the MASC under the optimized derivatization conditions.
The analysis characters such as the linearity, detection and quantification limits, precision and accuracy were studied and the results are summarized in Table 2.
Calibration curves for each BA were constructed by plotting peak area against the concentration over the range of 0.001– 1.0 mM.
The excellent linearity were observed with correlation coefficients of 0.9994 or higher (Table 2).
Sensitivity was evaluated by determining the limits of detection (LODs) and limits of quantitation (LOQs).
LOD was defined as the lowest concentration of analytes with a signal-to-noise ratio of 3, and LOQ was defined as the
lowest concentration of analytes with a signal-to-noise ratio of 10, respectively. As listed in Table 2, the obtained LODs range from 0.15 to 0.27 lM, and the LOQs are in the range of 0.50–0.85 lM.
To validate the precision of the proposed method, the relative standard deviations (RSDs) of peak areas were calculated for intra-day and inter-day variations.
The intra-day variation was measured by analyzing BAs standards at 0.05 mM in triplicate within one day, and the inter-day variation was tested by analyzing the same BAs standards on three different days.
As shown in Table 2, the intra-day and inter-day precision are in the range of 0.98–2.54% and 2.11–3.87%, separately.
BAs standards at three concentration levels (0.005, 0.05 and 0.5 mM) were subjected to the MASC-derivatization-HPLC–MS/MS procedure to evaluate the accuracy.
The accuracy was expressed as percentage of calculated value to the nominal concentration, and the results are shown in Table 2.
The accuracy for the seven BAs at levels of 0.005, 0.05 and 0.5 mM ranged from 97.9% to 102.1%, from 97.6% to 102.3%, and from 98.7% to 102.5%, respectively.
The results indicated that the described method was sufficiently precise and accurate for routine analysis of BAs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2. MS/MS acquisition parametersThe optimization of acquisition parameters was carried out by series of flow injection experiments, and the optimal Fragmentor and Collision Energy (CE) are stated in Table 1. The BA derivatives exhibit intense protonated molecular ions [M+H]+ in MS spectra, and [M+Na]+ is also observed. For the MS/MS spectra, the main fragment ions from d0-MASC labeled BAs are at m/z 208 and m/z 224, and d3-MASC labeled BAs give fragment ions at m/z 211 and m/z 227. The representative MS/MS of (d0-MASC)2-TRY and (d3-MASC)2-TRY are shown in Fig. 2(A). As can be seen fromFig. 2(A), the most abundant fragment at m/z 208 or m/z 211 is 10-methylacridone cation which can be expressed as [d0-MA]+ or [d3-MA]+. And the MRM transitions of [M+H]+?[MA]+ were used for quantification analysis in our experiments. In addition, thewhole HPLC–MS/MS run were divided into three segments. Segment I is set to waste, avoiding high concentration of 10-methyl-acridone-2-sulfonyl acid (MASC-OH) contaminate ion source. Segment II and III are set to source, acquiring MRM signals of BAs derivatives.3.3. Analytical charactersThe method was validated by a series of BAs standards labeled with the MASC under the optimized derivatization conditions. The analysis characters such as the linearity, detection and quantification limits, precision and accuracy were studied and the results are summarized in Table 2. กราฟสอบเทียบสำหรับ BA แต่ละถูกสร้างขึ้น โดยวางแผนพื้นที่สูงสุดกับความเข้มข้นผ่านช่วง 0.001 – 1.0 มิลลิเมตร ข้อสังเกตเชิงเส้นดี ด้วยสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ ของ 0.9994 หรือสูงกว่า (ตารางที่ 2) ความไวถูกประเมิน โดยกำหนดขีดจำกัดของการตรวจสอบ (LODs) และข้อจำกัดของการวิเคราะห์หาปริมาณ (LOQs) กำหนดลอดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของวิเคราะห์ด้วยอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวน 3 และของ LOQ ถูกกำหนดเป็นการความเข้มข้นต่ำสุดของวิเคราะห์ ด้วยอัตราสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนของ 10 ตามลำดับ ตามที่แสดงในตารางที่ 2 ได้รับ LODs ตั้งแต่ 0.15-0.27 lM และ LOQs อยู่ในช่วง 0.50 – 0.85 lMเพื่อตรวจสอบความแม่นยำของวิธีการนำเสนอ การสัมพัทธ์ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน (RSDs) พื้นที่สูงสุดมีคำนวณสำหรับการเปลี่ยนแปลงระหว่างวัน และระหว่างวัน การเปลี่ยนแปลงระหว่างวันโดยวัดจากการวิเคราะห์มาตรฐาน BAs 0.05 มม.ลข้อภายในหนึ่งวัน และทดสอบการเปลี่ยนแปลงระหว่างวัน โดยการวิเคราะห์มาตรฐาน BAs เหมือนกันแตกต่างกันสามวัน ดังแสดงในตารางที่ 2 ความแม่นยำระหว่างวัน และระหว่างวันอยู่ในช่วง 0.98-2.54% และ 2.11 – 3.87% แยกต่างหาก BAs มาตรฐานสามระดับ (0.005, 0.05 และ 0.5 mM) ถูกต้องตอน MASC-derivatization-HPLC – MS/MS เพื่อประเมินความถูกต้อง ความถูกต้องถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของค่าความเข้มข้นเล็กน้อยคำนวณ และผลลัพธ์ที่แสดงในตารางที่ 2 ความถูกต้องสำหรับ BAs เจ็ดที่ระดับ 0.005, 0.05 และ 0.5 มม.อยู่จาก 97.9%% 102.1 จาก 97.6% 102.3% และ 98.7% 102.5% ตามลำดับ ผลระบุว่า วิธีการอธิบายไว้อย่างถูกต้อง และแม่นยำสำหรับการวิเคราะห์ประจำวันของ BAs อยู่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 MS / MS
พารามิเตอร์การเข้าซื้อกิจการเพิ่มประสิทธิภาพของพารามิเตอร์การเข้าซื้อกิจการที่ได้รับการดำเนินการโดยชุดการทดลองฉีดไหลและFragmentor ที่ดีที่สุดและการปะทะกันพลังงาน (CE) แสดงในตารางที่ 1
อนุพันธ์ BA แสดงไอออนโมเลกุลรุนแรงโปรโตเนต [M + H] + ใน MS สเปกตรัมและ [M + นา] + ยังเป็นที่สังเกต.
สำหรับ MS / MS สเปกตรัม, ไอออนส่วนหลักจาก d0-masc ติดป้าย BAs อยู่ที่ม. / z 208 และ m / z 224 และ d3-masc ติดป้าย BAs ให้ไอออนส่วนที่ม. / z 211 และ m / z 227
ตัวแทน MS / MS ของ (d0-masc) 2 TRY และ (d3-masc) 2 TRY จะแสดงในรูป 2 (A)
ที่สามารถเห็นได้จากรูป 2 (A) ส่วนที่อุดมสมบูรณ์มากที่สุดในม. / z 208 หรือม. / z 211 เป็นไอออนบวก 10 methylacridone ซึ่งสามารถแสดงเป็น [d0-MA] + หรือ [d3-MA] +.
และการเปลี่ยน MRM ของ [M + H] + [MA] + ถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณในการทดลองของเรา นอกจากนี้ทั้ง HPLC-MS / MS วิ่งถูกแบ่งออกเป็นสามส่วน. ฉันส่วนงานมีการตั้งค่าที่จะเสียหลีกเลี่ยงความเข้มข้นสูงของกรด 10-methyl-acridone-2-sulfonyl (masc-OH) ปนเปื้อนแหล่งกำเนิดไอออน. ส่วนงานที่สองและ III มีการกำหนดให้แหล่งที่มาที่ได้รับสัญญาณ MRM อนุพันธ์ BAs. 3.3 ตัวอักษรวิเคราะห์วิธีการที่ได้รับการตรวจสอบโดยชุดของมาตรฐาน BAs ติดป้ายกับ masc ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุด derivatization. ตัวละครเช่นการวิเคราะห์เชิงเส้นการตรวจสอบและข้อ จำกัด ปริมาณความแม่นยำและความถูกต้องมีการศึกษาและผลที่ได้สรุปไว้ในตารางที่ 2 การสอบเทียบ เส้นโค้งสำหรับแต่ละบริติชแอร์เวย์ที่ถูกสร้างขึ้นโดยการวางแผนพื้นที่สูงสุดกับความเข้มข้นในช่วง 0.001- 1.0 มม. เชิงเส้นที่ดีถูกตั้งข้อสังเกตที่มีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ 0.9994 หรือสูงกว่า (ตารางที่ 2). ความไวแสงได้รับการประเมินโดยการกำหนดขอบเขตของการตรวจสอบ (LODs ) และข้อ จำกัด ของปริมาณ (LOQs). ล็อดได้รับการกำหนดให้เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของการวิเคราะห์ด้วยสัญญาณต่อเสียงรบกวนอัตราส่วน 3 และ LOQ ได้รับการกำหนดให้เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของการวิเคราะห์ด้วยสัญญาณต่อเสียงรบกวนอัตราส่วน10, ตามลำดับ ตามที่ระบุไว้ในตารางที่ 2 ที่ได้รับ LODs ช่วง 0.15-0.27 LM และ LOQs ที่อยู่ในช่วงของการ 0.50-0.85 LM ได้. ต้องการตรวจสอบความแม่นยำของวิธีการที่นำเสนอที่เบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSDs) พื้นที่ยอดเขาที่ถูกคำนวณ สำหรับภายในวันและรูปแบบระหว่างวัน. การเปลี่ยนแปลงภายในวันวัดโดยการวิเคราะห์มาตรฐาน BAs ที่ 0.05 มิลลิในเพิ่มขึ้นสามเท่าภายในหนึ่งวันและการเปลี่ยนแปลงระหว่างวันได้รับการทดสอบโดยการวิเคราะห์เดียวกันมาตรฐาน BAs ในสามวันที่แตกต่างกัน. ในฐานะที่เป็น แสดงในตารางที่ 2 ภายในวันและความแม่นยำระหว่างวันอยู่ในช่วง 0.98-2.54% ของและ 2.11-3.87% แยกต่างหาก. มาตรฐาน BAs ที่สามระดับความเข้มข้น (0.005, 0.05 และ 0.5 มิลลิเมตร) ถูกยัดเยียดไป masc -derivatization-HPLC-MS / MS ขั้นตอนในการประเมินความถูกต้อง. ความถูกต้องที่ได้รับการแสดงเป็นร้อยละของมูลค่าคำนวณความเข้มข้นน้อยและผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงในตารางที่ 2 ความถูกต้องสำหรับเจ็ด BAs ในระดับ 0.005 ที่ 0.05 และ 0.5 มิลลิตั้งแต่ 97.9% มาอยู่ที่ 102.1% จาก 97.6% มาอยู่ที่ 102.3% และจาก 98.7% มาอยู่ที่ 102.5% ตามลำดับ. ผลการวิจัยพบว่าวิธีการที่อธิบายไว้เป็นพอแม่นยำและถูกต้องสำหรับการวิเคราะห์ตามปกติของ BAs

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . MS / MS ) พารามิเตอร์การเพิ่มประสิทธิภาพของพารามิเตอร์การกระทำโดยชุดของการทดลองการฉีด และเหมาะสม fragmentor และพลังงานการชน ( CE ) ที่ระบุไว้ในตารางที่ 1BA เข้มข้นโมเลกุลอนุพันธ์จัดแสดง protonated ไอออน [ M + H ] + MS spectra และ [ M ] + + และยังพบ .สำหรับ MS / MS spectra , หลักส่วนอิออน + masc ติดป้าย bas ที่ m / z และ M / Z 224 และ D3 masc ติดป้าย bas ให้จำเพาะไอออนที่ m / z แล้ว M / Z 227 .ตัวแทนของ MS / MS ( + masc ) 2-try ( D3 masc ) 2-try แสดงในรูปที่ 2 ( ก ) ดังจะเห็นได้จากรูปที่ 2 ( ก ) ส่วนชุกชุมมากที่สุดที่ m / z 208 หรือ M / Z 211 เป็น 10 methylacridone ประจุบวกซึ่งสามารถแสดงเป็น [ [ D3 ] + + มาหรือมา ] +และ mrm เปลี่ยน [ M + H ] + ? [ MA ] + วิเคราะห์ปริมาณในการทดลองของเรา นอกจากนี้ทั้ง HPLC MS / MS และวิ่งออกเป็นสามกลุ่มส่วนผมตั้งเสียหลีกเลี่ยงความเข้มข้นสูงของกรด 10-methyl-acridone-2-sulfonyl ( masc-oh ) ปนเปื้อนแหล่งกำเนิดไอออนส่วนที่ 2 และ 3 มีการตั้งค่าไปยังแหล่งรับสัญญาณของอนุพันธ์ mrm bas .3.3 . ตัววิเคราะห์วิธีตรวจสอบโดยชุดของบาสมาตรฐาน มีป้ายกับ masc ภายใต้เหมาะกับเงื่อนไขการวิเคราะห์ตัวละครเช่นเส้นตรง , การตรวจสอบและการบอกจำนวนจำกัด มีความแม่นยำและความถูกต้องได้ศึกษาและการทดลองสรุปได้ในตารางที่ 2เส้นโค้งสอบเทียบแต่ละบาถูกสร้างโดยวางแผนพื้นที่กับความเข้มข้นสูงสุดในช่วงที่ 001 - 1.0 มม.ถึงยอดเยี่ยมพบกับสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ 0.9994 หรือสูงกว่า ( ตารางที่ 2 )ความไวคือการประเมินโดยการกำหนดขีดจำกัดของการตรวจหา ( ล็อดส์ ) และข้อ จำกัด ของเซลล์ ( loqs )แต่ถูกกำหนดไว้เป็นค่าความเข้มข้นของสารที่มีอัตราส่วนสัญญาณ 3 และ loq ถูกกำหนดไว้เป็นค่าความเข้มข้นของสารที่มีอัตราส่วนของสัญญาณ 10 ตามลำดับ ตามที่ระบุไว้ใน ตารางที่ 2 , ได้รับล็อดส์ตั้งแต่ 0.15 0.27 LM และ loqs ในช่วง 0.50 - 1.00 อิมการตรวจสอบความถูกต้องของวิธีที่นำเสนอ , ญาติส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานเทคโนโลยีของพื้นที่สูงสุดได้ สำหรับภายในวัน และระหว่างวัน รูปแบบภายในวันทำการเปลี่ยนแปลงโดยการวิเคราะห์มาตรฐาน bas 0.05 mm ทั้งสามใบภายใน 1 วัน และระหว่างวันของการทดสอบโดยการวิเคราะห์เดียวกันมีมาตรฐานในสามวันที่แตกต่างกันดังแสดงในตารางที่ 2 ภายในวัน และระหว่างวันแน่นอน อยู่ในช่วงของ 0.98 และ 2.54 % และ 2.11 – 3.87 % , แยกมาตรฐานมี 3 ระดับความเข้มข้น ( 0.005 , 0.01 และ 0.5 มม. ) อยู่ภายใต้การ masc กับ HPLC MS / MS และขั้นตอนการประเมินความถูกต้องความถูกต้องจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการคำนวณค่าความเข้มข้นน้อย และผลลัพธ์จะแสดงในตารางที่ 2ความถูกต้องสำหรับเจ็ด bas ที่ระดับ 0.005 , 0.01 และ 0.5 มม. มีค่า 97.9 % 102.1 % จาก 97.6 % 102.3 % และจาก 98.7% ถึง 102.5 % ตามลำดับผลการศึกษา พบว่า มีเพียงพอแน่นอน และอธิบายวิธีที่ถูกต้องในการวิเคราะห์ขั้นตอนคุณ .