2.4. Alfalfa juice fermentationsFer

2.4. Alfalfa juice fermentations
Fermentation experiments were typically conducted in serum
vials (appx volume 60 or 160 ml, depending on the experiment)
or Balch tubes (28 ml). Green or brown juice samples (9.8–
39.2 ml) were added to the tubes or vials using a volumetric pipette
modified by removing the tip to provide a wider bore for handling
liquid suspensions containing small plant particles. Culture
vessels were sealed with flanged butyl rubber stoppers secured
by aluminum crimp seals. Except where indicated, the only additions
to the vials were the juice and the bacterial inoculant (i.e.,
no additional nutrients or reducing agents were added to the vials).
The gas phase was exchanged with CO2 on a gassing manifold (15
evacuation and CO2 flushing cycles of 10 s ea, hereafter termed
‘‘CO2 gassed’’) to establish anaerobic conditions. Most experiments
were conducted without sterilization of vessels or juice, although
one experiment compared the fermentation with versus without
autoclaving (15 min, 121 C) of the sealed, juice-containing vessels
prior to inoculation (Table 1). Vials and tubes were incubated at
39 C without agitation for 12–72 h, depending on the experiment
(see Sections 3.2 and 3.3).
Two-stage fermentations were conducted on 60 mL of green
juice using different inocula, in triplicate. After 12–48 h incubation,
the vials were decapped, the pH measured and 50 ml of the resulting
brown juice was transferred to centrifuge tubes immersed in
ice. After removal of 1.5 ml for analysis of organic acids and sugars,
pH of the remaining suspension was adjusted with 10 N NaOH to
various pH values (5.0–6.8). Subsamples (5 ml) of these brown
juices were dispensed into quadruplicate Balch tubes, sealed with
butyl stoppers and aluminum crimp seals, and then gassed with
CO2. For each set of four tubes, two were inoculated with 0.10 ml
of M. elsdenii culture and the other two left as uninoculated controls
(but containing the microbial population of the original juice).
All tubes were incubated for 48 h.
For time course experiments, 2.8 ml samples were withdrawn
at each time interval (including zero-time) using a hypodermic syringe
and immediately added to ice-cold 20 mL glass vials while
measuring pH. Samples were divided between paired ice-cold
microcentrifuge tubes and after centrifugation (12,000g, 10 min,
4 C) supernatants were used for duplicate analysis of organic acids
and sugars.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 alfalfa น้ำหมักแหนมหมักได้โดยทั่วไปดำเนินการทดลองในซีรั่มvials (appx ปริมาตร 60 หรือ 160 มล. ขึ้นอยู่กับการทดลอง)หรือท่อ Balch (28 มล.) ตัวอย่างน้ำสีเขียว หรือสีน้ำตาล (9.8-39.2 ml) มีเพิ่มท่อหรือใช้เปตต์ volumetric vialsแก้ไข โดยเอาคำแนะนำเพื่อให้กระบอกสูบที่กว้างสำหรับการจัดการบริการของเหลวที่ประกอบด้วยอนุภาคขนาดเล็กโรงงาน วัฒนธรรมเรือถูกปิดผนึก ด้วยจุกยางด...-แบบหน้าแปลนที่ปลอดภัยโดยตราประทับใจคับอลูมิเนียม ยกเว้นที่ระบุ เพิ่มเท่านั้นการ vials มีน้ำในและ inoculant แบคทีเรีย (เช่นไม่มีสารอาหารเพิ่มเติมหรือลดลงตัวแทนถูกเพิ่ม vials)ระยะก๊าซถูกแลกเปลี่ยนกับ CO2 ในอเนก gassing (15อพยพและวงจรลบ CO2 ของ ea s 10 โดยเรียกว่านิ้ว CO2 gassed'') สร้างเงื่อนไขไม่ใช้ออกซิเจน การทดลองส่วนใหญ่ได้ดำเนินการโดยไม่ต้องฆ่าเชื้อโรคในน้ำ หรือเรือแม้ว่าการทดลองหนึ่งเปรียบเทียบหมักมีเทียบกับไม่มีautoclaving (15 นาที 121 C) ของหลอดที่ มีน้ำ ปิดผนึกก่อน inoculation (ตาราง 1) มี incubated vials และท่อที่C 39 ไม่ มีอาการกังวลต่อสำหรับ h 12 – 72 ขึ้นอยู่กับการทดลอง(ดูส่วน 3.2 และ 3.3) การหมักแหนมที่สองได้ดำเนินการใน 60 mL สีเขียวน้ำที่ใช้แตกต่างกัน inocula, triplicate หลังจากที่บ่ม 12 – 48 hvials ถูก decapped วัดค่า pH และ 50 ml ของงบน้ำสีน้ำตาลถูกถ่ายโอนไปเครื่องหมุนเหวี่ยงไปในท่อน้ำแข็ง หลังจากเอา 1.5 ml สำหรับการวิเคราะห์กรดอินทรีย์และน้ำตาลpH ของระบบกันสะเทือนที่เหลือถูกปรับปรุง ด้วย 10 N NaOH ให้(5.0-6.8) ค่า pH ต่าง ๆ Subsamples (5 ml) น้ำตาลเหล่านี้น้ำผลไม้มีคำเป็นหลอด Balch quadruplicate ปิดผนึกด้วยด...จุกอลูมิเนียมใจคับสัญลักษณ์ และ gassed แล้ว ด้วยCO2 สำหรับแต่ละชุดของสี่หลอด สองได้ inoculated กับ 0.10 mlของม. elsdenii วัฒนธรรมและอื่น ๆ ทั้งสองไปควบคุม uninoculated(แต่ประกอบด้วยประชากรจุลินทรีย์น้ำเดิม)หลอดทั้งหมดถูก incubated สำหรับ 48 hได้ถอนตัวอย่าง 2.8 ml ครั้งที่ทดลองหลักสูตรในแต่ละช่วงเวลา (รวมถึงเวลาศูนย์) โดยใช้เข็มฉีดยาและ 20 mL เพิ่มทันทีให้ฉ่ำแก้ว vials ขณะวัดค่า pH ตัวอย่างถูกแบ่งระหว่างคู่ฉ่ำท่อ microcentrifuge และ หลัง centrifugation (12, 000g, 10 นาที4 C) supernatants ใช้สำหรับวิเคราะห์ซ้ำของกรดอินทรีย์และน้ำตาล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 Alfalfa
น้ำหมักแหนมทดลองหมักได้ดำเนินการโดยทั่วไปในซีรั่มขวด
(ปริมาตร appx 60 หรือ 160 มล. ขึ้นอยู่กับการทดลอง)
หรือหลอด Balch (28 มล.) ตัวอย่างน้ำผลไม้สีเขียวหรือสีน้ำตาล (9.8-
39.2 มล.) ถูกเพิ่มเข้าไปในหลอดหรือขวดโดยใช้ปิเปตปริมาตรการแก้ไขโดยการเอาเคล็ดลับที่จะให้เจาะที่กว้างขึ้นสำหรับการจัดการสารแขวนลอยของเหลวที่มีอนุภาคขนาดเล็กโรงงาน วัฒนธรรมเรือถูกปิดผนึกด้วยจุกยางบิวทิแผงการรักษาความปลอดภัยจากอลูมิเนียมซีลจีบ ยกเว้นในกรณีที่ระบุการเพิ่มเพียงเพื่อขวดเป็นน้ำผลไม้และหัวเชื้อแบคทีเรีย(เช่นไม่มีสารอาหารเพิ่มเติมหรือรีดิวซ์ถูกเพิ่มเข้าไปในขวด). ในช่วงก๊าซได้แลกเปลี่ยนกับ CO2 ในท่อแก๊ส (ที่ 15 อพยพและล้าง CO2 รอบ? 10 วินาทีเอเรียกว่าต่อจากนี้'' CO2 แก๊ส '') เพื่อสร้างเงื่อนไขแบบไม่ใช้ออกซิเจน การทดลองส่วนใหญ่ได้ดำเนินการโดยไม่มีการฆ่าเชื้อของเรือหรือน้ำผลไม้แม้ว่าการทดลองเมื่อเทียบกับการหมักโดยไม่ต้องเทียบกับนึ่งฆ่าเชื้อ(15 นาที 121 C) ของปิดผนึกภาชนะที่มีน้ำผลไม้ก่อนที่จะมีการฉีดวัคซีน(ตารางที่ 1) หลอดและท่อถูกบ่มที่39 องศาเซลเซียสโดยไม่ต้องกวนสำหรับ 12-72 ชั่วโมงขึ้นอยู่กับการทดลอง(ดูมาตรา 3.2 และ 3.3). หมักแหนมสองขั้นตอนได้ดำเนินการใน 60 มิลลิลิตรของสีเขียวน้ำผลไม้โดยใช้inocula ที่แตกต่างกันในการเพิ่มขึ้นสามเท่า หลังจากบ่ม 12-48 ชั่วโมงขวดถูกdecapped ค่า pH ที่วัดได้และ 50 มิลลิลิตรที่เกิดน้ำผลไม้สีน้ำตาลถูกโอนไปยังหลอดcentrifuge แช่อยู่ในน้ำแข็ง หลังจากที่กำจัด 1.5 มล. สำหรับการวิเคราะห์ของกรดอินทรีย์และน้ำตาลเป็นกรดเป็นด่างของช่วงล่างที่เหลือได้รับการปรับปรุงด้วย10 N NaOH จะค่าpH ต่างๆ (5.0-6.8) subsamples (5 ml) สีน้ำตาลเหล่านี้น้ำผลไม้ที่ถูกจ่ายเข้าไปในท่อquadruplicate Balch, ปิดผนึกด้วยstoppers บิวทิลและอลูมิเนียมซีลจีบและแก๊สแล้วด้วยCO2 สำหรับชุดของสี่หลอดแต่ละสองคนเชื้อด้วย 0.10 มล. เอ็มวัฒนธรรม elsdenii และอีกสองที่เหลือเป็นตัวควบคุม uninoculated (แต่มีประชากรจุลินทรีย์ของน้ำผลไม้เดิม). หลอดทั้งหมดถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชม. สำหรับการทดสอบเวลาที่แน่นอน 2.8 มล. ตัวอย่างที่ถูกถอนออกในช่วงเวลาในแต่ละครั้ง(รวมทั้งศูนย์เวลา) โดยใช้เข็มฉีดยาและทันทีที่เพิ่มเข้ามาในเย็น20 มลขวดแก้วในขณะที่การวัดค่าpH ตัวอย่างถูกแบ่งระหว่างคู่เย็นหลอดไมโครและหลังการหมุนเหวี่ยง (12,000g, 10 นาที, 4 C) supernatants ถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์ซ้ำกันของกรดอินทรีย์และน้ำตาล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . fermentations น้ำอัลฟัลฟาการทดลองหมักมักจะดำเนินการในซีรั่มขวด ( appx ในปริมาณ 60 หรือ 160 มล. ขึ้นอยู่กับการทดลอง )หรือแบลช์หลอด ( 28 กรัม ) สีเขียวหรือสีน้ำตาลตัวอย่างน้ำผลไม้ ( 9.8 )39.2 มิลลิลิตรเพิ่มท่อหรือหลอดที่ใช้หลอดปริมาตรแก้ไขโดยการเอาปลายให้เจาะกว้างสำหรับการจัดการของเหลวที่มีอนุภาคแขวนลอยพืชขนาดเล็ก วัฒนธรรมเรือถูกผนึกด้วย Flanged stoppers ยางบิวมีความปลอดภัยอลูมิเนียมดัดด้วยสัญลักษณ์ นอกจากที่ระบุ การเพิ่มเท่านั้นกับขวดถูกน้ำและ Inoculant แบคทีเรีย ( เช่นไม่มีสารอาหารเพิ่มเติม หรือลดจำนวนตัวแทนเพิ่มหลอด )ก๊าซระยะที่แลกเปลี่ยนกับ CO2 ใน gassing อเนก ( 15การอพยพและ CO2 ล้างรอบ 10 ea ต่อที่เรียกว่า' 'co2 gassed ' ' ) เพื่อสร้างเงื่อนไขแบบไม่ใช้ออกซิเจน การทดลองมากที่สุดการไม่ทำหมันเรือหรือน้ำผลไม้ , แม้ว่าหนึ่งการทดลองเปรียบเทียบการหมักด้วยและไม่อัตราส่วนโฟกัส ( 121 องศาเซลเซียส 15 นาที ) ของน้ำผลไม้ที่มีภาชนะปิดผนึกก่อนการฉีดวัคซีน ( ตารางที่ 1 ) หลอดและท่ออุณหภูมิ39 องศาเซลเซียส โดยไม่มีการกวน 12 - 72 ชั่วโมง ขึ้นอยู่กับการทดลอง( ดูส่วนที่ 3.2 และ 3.3 )สองขั้นตอน fermentations จำนวน 60 ml ของสีเขียวน้ำผลไม้ใช้ inocula ต่าง , ทั้งสามใบ หลังจาก 12 – 48 ชั่วโมงระยะเวลาขวดถูก decapped , pH ที่วัดได้ 50 มิลลิลิตร ที่เกิดขึ้นน้ําตาลย้ายมาแช่ในหลอดปั่นเหวี่ยงน้ำแข็ง หลังจากเอาของ 1.5 ml สำหรับการวิเคราะห์กรดอินทรีย์ และน้ำตาลปรับ pH ของช่วงล่างที่เหลือ 10 N NaOH กับค่า pH ต่างๆ ( 5.0 - 5.5 ) subsamples ( 5 ml ) เหล่านี้ บราวน์ผลไม้ที่ถูกจ่ายเข้าไปในท่อซึ่งเป็นสี่เท่าแบลช์ ผนึกกับจุกและอลูมิเนียมจีบ ซีล แล้วปล่อยก๊าซด้วยCO2 ชุดละสี่หลอด สองคนที่ใส่ 0.10 มิลลิลิตรวัฒนธรรมของม. elsdenii และอีกสองด้านซ้ายเป็นตัวควบคุมการ( แต่ที่มีประชากรจุลินทรีย์ของน้ำเดิม )ทั้งหมดท่อ คือ บ่ม 48 ชั่วโมงสำหรับการทดลองหลักสูตรเวลา 2.8 ml จำนวนถอนในแต่ละช่วงเวลา ( รวมทั้งศูนย์เวลา ) การใช้เข็มฉีดยาและเพิ่มทันทีน้ำแข็งหลอดแก้วเย็น 20 ml ในขณะที่ตัวอย่างการวัด pH แบ่งระหว่างคู่เย็นหลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ และหลังการปั่นเหวี่ยง ( 12000g , 10 นาที4 C ) supernatants วิเคราะห์ซ้ำของกรดอินทรีย์และ น้ำตาล