Results and DiscussionThe DPPH assa

Results and Discussion
The DPPH assay, originally developed by Blois [17], is widely used for the measurement of free radical scavenging capacity. DPPH is a free radical that easily accepts an electron or hydrogen radical to become a stable diamagnetic molecule.
The IC50s for DPPH scavenging activity and results of the Folin Ciocalteu assay found for the extracts prepared with the different solvents are presented in table 1. The extractive solvent which resulted in the highest activity was ethanol:water (7:3), and thus it was selected for further preparation of C. sativa extract. Even though the antioxidant activity of polyphenols is widely reported [18,19] and the extract with high activity presented the highest phenolic content and the one with the lowest phenolic content was the least active (table 1), a linear correlation between DPPH scavenging activity and polyphenolic content was not found. One explanation could be the presence of other reducing com- pounds such as sugars, aminoacids and specially ascorbic acid that are known to interfere with the Folin Ciocalteu assay [20]. Additionally, contribution of non-phenolic compounds to antioxidant effects should also be taken into consideration.
The UV spectra of most flavonoids exhibit two major absorption peaks. Band I usually occurs in the range 300– 350 nm and Band II in the range 240–285 nm [21]. Benzoic acids present absorption maxima at around 280 nm [22]. The extraction method was selected based on the absorbance at the wavelengths 280 and 350 nm, which was taken as an indicator of polyphenol extraction. The influence of the number of extraction steps and extraction time on the extraction efficiency is shown in fig. 1A. The effect of the time on the extraction efficiency was less important than the number of extractions. After performing 12 short extractions (120 min.), higher extraction efficiency was obtained than after three longer extractions (195 min., around 85% of the previous). Results obtained at 280 nm were similar to those at 350 nm (data not shown). After five extractions, a result of around 86% extraction efficiency was obtained. Further extraction steps resulted in minor increments. Temperature was shown to influence the extraction process as higher extraction efficiency was observed at 40° than at room temperature, being this effect more relevant on the first three extractions (fig. 1B). Similar relative increases were found at 280 and 350 nm. From these results, the extraction method adopted consisted in five short extractions, of 10 min. each, performed at 40°. When preparing the extract following this optimized method, higher DPPH scavenging activity and higher total phenolic content were obtained (table 1), thus confirming the validity of the undertaken optimization approach.
The C. sativa leaf ethanol:water (7:3) extract presented an IC50 for the scavenging of DPPH of 12.58±0.54μg/ml (mean ± S.E.M.), while rutin and ascorbic acid presented IC50s of 9.92 ± 0.53 and 4.93 ± 0.36 μg/ml, respectively. Ferrozine quantitatively forms complexes with Fe2+. In the presence of chelating agents, the complex formation is disrupted result- ing in a decrease of the complex red colour [23]. The IC50 found for the iron chelation assay was 132.9 ± 9.72 μg/ml (mean ± S.E.M.) and EDTA presented an IC50 of 12.6 ± 0.29 μg/ml. The optimized C. sativa leaf ethanol:water (7:3) extract prevented DPPH discoloration (fig. 2A) and chelated iron ions (fig. 2B) in a concentration-dependent manner.
It is interesting to compare data obtained on C. sativa with other plant species obtained using the same assaying systems. This study has revealed that the DPPH antioxidant activity of C. sativa leaf ethanol:water (7:3) extract is relatively high compared to results in similar studies performed with Lamiaceae species (IC50s range from 300 to 600 μg/ml) [24], with Brazilian plants (IC50s range from 11.6 to 158.9 μg/ml) [25] and with Bolivian plants (IC50s range from 15.0 to 124.0 μg/ml) [26]. The DPPH scavenging activity of the extract studied in this work is comparable to green tea (IC50 = 11.8 μg/ml). The observed metal-chelating activity is also relatively potent when compared to results obtained with similar assay performed with Cinnamomum verum leaf extract (IC50 in the range 400–600 μg/ml) [14] and with Lamiaceae species (IC50s range from 0.8 to 1.40 mg/ml) [24]. The extract also presents strong absorption at 280nm (UVB). This evidence suggests the possible effectiveness of chestnut leaf extract topical administration to prevent UV radiation-induced skin damage with a multiple mechanism.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลและการสนทนาทดสอบ DPPH เดิม พัฒนา โดย Blois [17], เหสำหรับวัดอนุมูลอิสระ scavenging กำลังการผลิต DPPH เป็นอนุมูลอิสระที่ยอมรับได้เป็นอิเล็กตรอนหรือไฮโดรเจนรุนแรงเป็น โมเลกุล diamagnetic มั่นคงIC50s สำหรับ DPPH scavenging กิจกรรมและผลการทดสอบ Folin Ciocalteu พบสารสกัดพร้อมหรือสารทำละลายต่าง ๆ จะแสดงในตาราง 1 ตัวทำละลาย extractive ซึ่งส่งผลให้กิจกรรมสูงสุดคือ เอทานอล: น้ำ (7:3), และจึง จะถูกเลือกสำหรับการเตรียมการของสารสกัดซีซา แม้ว่ากิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระของโพลีฟีนมีรายงานอย่างกว้างขวาง [18,19] และสารสกัด มีกิจกรรมสูงนำเสนอเนื้อหาฟีนอสูงสุดหนึ่งที่ มีเนื้อหาฟีนอราคาถูกใช้งานน้อย (ตาราง 1), ไม่พบความสัมพันธ์เชิงเส้นระหว่าง DPPH scavenging กิจกรรมและ polyphenolic เนื้อหา คำอธิบายหนึ่งอาจเป็นของอื่น ๆ ลดลง com-ปอนด์เช่นน้ำตาล aminoacids และกรดแอสคอร์บิคเป็นที่ทราบว่ารบกวนวิเคราะห์ Folin Ciocalteu [20] นอกจากนี้ ส่วนม่อฮ่อมที่เปลี่ยนมือไม่ได้ให้ผลต้านอนุมูลอิสระควรยังสามารถนำมาพิจารณาแรมสเป็คตรา UV ของ flavonoids ส่วนใหญ่แสดงยอดดูดซับหลักสอง วงดนตรีที่ฉันมักเกิดขึ้นในช่วง 300 – 350 nm และวงที่สองในช่วง 240 – 285 nm [21] กรด benzoic ปัจจุบันดูดซึมแมกที่ประมาณ 280 nm [22] มีเลือกวิธีสกัดตาม absorbance ที่ความยาวคลื่น 280 และ 350 nm ซึ่งถูกนำมาเป็นตัวบ่งชี้ของ polyphenol สกัด อิทธิพลของหมายเลขของขั้นตอนการสกัดและแยกเวลาประสิทธิภาพสกัดจะแสดงใน fig. 1A ผลของเวลาประสิทธิภาพสกัดสำคัญน้อยกว่าจำนวนสกัดได้ หลังจากที่ทำการสกัดสั้น 12 (120 นาที), ประสิทธิภาพการสกัดสูงถูกจัดได้มากกว่าหลังจากสกัดยาวสาม (195 นาที ประมาณ 85% ของก่อนหน้า) ผลรับที่ 280 nm ได้คล้ายกับที่ 350 nm (ข้อมูลไม่แสดง) หลังจากสกัดห้า ผลประมาณ 86% ประสิทธิภาพในการสกัดได้รับการ ขั้นตอนการสกัดผลทีละน้อย อุณหภูมิที่แสดงจะมีอิทธิพลต่อกระบวนการสกัดมีประสิทธิภาพการสกัดสูงถูกสังเกตที่ 40° กว่าที่อุณหภูมิห้อง มีผลนี้เกี่ยวข้องกับการสกัดครั้งแรกสาม (fig. 1B) พบญาติขึ้นคล้ายที่ 280 และ 350 nm จากผลลัพธ์เหล่านี้ วิธีการสกัดนำประกอบด้วยในห้าสั้นสกัด ของแต่ละ 10 นาที 40° เมื่อเตรียมสารสกัดตามวิธีนี้ให้เหมาะ สูง DPPH scavenging กิจกรรมและเนื้อหาฟีนอรวมสูงถูกได้รับ (ตาราง 1), จึงยืนยันถูกต้องของวิธีการเพิ่มประสิทธิภาพดำเนินการซาซีลีเอทานอล: น้ำ (7:3) สารสกัดนำเสนอ IC50 สำหรับ scavenging ของ DPPH ของ 12.58±0.54μg/ml (เฉลี่ย± S.E.M.), ในขณะที่ rutin และกรดแอสคอร์บิค IC50s 9.92 ± 0.53 และ 4.93 ± 0.36 μg/ml การนำเสนอตามลำดับ Ferrozine quantitatively แบบคอมเพล็กซ์กับ Fe2 + ในต่อหน้าของ chelating ตัวแทน ผู้แต่งซับซ้อนอยู่ระหว่างสองวันผล-ing ในการลดความซับซ้อนสีแดง [23] IC50 พบสำหรับทดสอบ chelation เหล็กเป็น 132.9 ± 9.72 μg/ml (เฉลี่ย± S.E.M.) และ EDTA แสดง IC50 12.6 ± 0.29 μg/ml สารสกัดเอทานอล: น้ำ (7:3) ลีซาซีเพิ่มประสิทธิภาพป้องกันกระ DPPH (fig. 2A) และ chelated เหล็กประจุ (fig. 2B) ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นเป็นที่น่าสนใจเพื่อเปรียบเทียบข้อมูลที่ได้บนซีซากับชนิดพืชอื่น ๆ ได้โดยใช้ระบบ assaying เดียวกัน การศึกษานี้ได้เปิดเผยว่า กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระ DPPH ของซีซาลีฟเอทานอล: น้ำ (7:3) สกัดเป็นค่อนข้างสูงเมื่อเทียบกับผลลัพธ์ในการศึกษาคล้ายกันทำ ด้วยพันธุ์วงศ์กะเพรา (IC50s ช่วงจาก 300 600 μg ml) [24], กับบราซิลพืช (IC50s ช่วงจาก 11.6 ml ละ 158.9 μg) [25] และโบลิเวียพืช (IC50s ช่วงจาก 15.0 124.0 μg ml) [26] DPPH scavenging กิจกรรมของการดึงข้อมูลที่ศึกษาในงานนี้จะเทียบได้กับชาเขียว (IC50 = μg 11.8 ml) กิจกรรมสังเกต chelating โลหะก็ค่อนข้างมีศักยภาพเมื่อเปรียบเทียบกับผลลัพธ์ที่ได้ ด้วยการวิเคราะห์คล้ายกันทำ ด้วย Cinnamomum verum ใบแยก (IC50 ในช่วง 400 – 600 μg/ml) [14] และพันธุ์วงศ์กะเพรา (IC50s ช่วงตั้งแต่ 0.8 ถึง 1.40 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) [24] การดึงข้อมูลยังแสดงแข็งแรงดูดซึมที่ 280nm (UVB) หลักฐานนี้แนะนำใบไม้ chestnut ประสิทธิภาพสามารถแยกจัดการเฉพาะเพื่อป้องกันความเสียหายของผิวที่เกิดจากรังสี UV ด้วยกลไกหลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลและการอภิปราย
dpph โดยพัฒนาเดิมโดยมะระ [ 17 ] , มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการวัดของการต้านอนุมูลอิสระสูงสุด dpph เป็นอนุมูลอิสระที่สามารถรับอิเล็กตรอนหรือไฮโดรเจนที่รุนแรงที่จะกลายเป็นมีเสถียรภาพไดอะแมกเนติก
โมเลกุลการ ic50s สำหรับ dpph การกิจกรรมและผลลัพธ์ของ folin ciocalteu assay พบสารสกัดด้วยตัวทำละลายต่าง ๆเตรียมจะแสดงในตารางที่ 1 ในการสกัดตัวทำละลายซึ่งส่งผลให้เกิดกิจกรรมสูงสุดคือเอทานอล : น้ำ ( 7 : 3 ) , และดังนั้นจึงถูกเลือกสำหรับการเตรียมการของ C . sativa สารสกัดเพิ่มเติม แม้ว่าสารต้านอนุมูลอิสระโพลีฟีนอลมีรายงานอย่างกว้างขวาง [ 1819 ] และสารสกัดที่มีกิจกรรมสูงที่นำเสนอเนื้อหาฟีนอลสูงสุดและหนึ่งที่มีเนื้อหาฟีนอลสุดอย่างน้อยปราดเปรียว ( ตารางที่ 1 ) ความสัมพันธ์เชิงเส้นระหว่างการจัดกิจกรรม และเนื้อหา dpph พรไม่พบ คำอธิบายหนึ่งอาจมีอื่น ๆลด com - ปอนด์ เช่น น้ำตาลว่าวิตามินซีและกรดพิเศษที่เป็นที่รู้จักกันในเรื่อง folin ciocalteu ) [ 20 ] นอกจากนี้ ผลงานของที่ไม่ใช่สารประกอบฟีนอลต่อต้านอนุมูลอิสระ นอกจากนี้ยังควรคำนึงถึง
UV สเปกตรัมของ flavonoids ส่วนใหญ่แสดงสองยอดการดูดซึมที่สำคัญ วงดนตรีก็มักจะเกิดขึ้นในช่วง 300 - 350 nm และวงที่สองในช่วง 240 – 285 นาโนเมตร [ 21 ]การดูดซึมกรดเบนโซอิกาแม็กซิม่าที่ประมาณ 280 nm [ 22 ] วิธีการสกัดถูกเลือกตามค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 280 และ 350 nm ซึ่งถูกนำมาเป็นตัวบ่งชี้ของการสกัดโพลี . อิทธิพลของหมายเลขของขั้นตอนการสกัด และเวลาที่ใช้ในการสกัด คือ แสดงในรูปที่ 1 .ผลของเวลาในการสกัดที่สำคัญน้อยกว่าจำนวนของทีม . หลังจากแสดง 12 ทีมสั้น ( 120 นาที ) , ประสิทธิภาพการสกัดสูงได้กว่าสามอีกต่อไปหลังจากการสกัด ( 195 นาที ประมาณ 85% ของเดิม ) ผลที่ 280 nm ก็คล้ายกับที่ 350 nm ( ข้อมูลไม่แสดง ) หลังจากห้าการสกัดผลของการสกัดประมาณร้อยละ 86 ได้ . ขั้นตอนการสกัดเพิ่มเติม ส่งผลในการเพิ่มขึ้นเล็กน้อย อุณหภูมิที่แสดงที่มีอิทธิพลต่อกระบวนการสกัด เช่น ประสิทธิภาพการสกัดสูงพบว่า 40 องศากว่าที่อุณหภูมิ ห้อง นี้เป็นผลที่เกี่ยวข้องกับสามทีมแรก ( รูปที่ 1A ) เพิ่มญาติที่คล้ายกันอยู่ที่ 280 และ 350 nm .จากผลการสกัดด้วยอุปการะประกอบด้วยห้าสั้นสกัด 10 นาที แต่ละคนแสดงที่ 40 องศา . เมื่อเตรียมสารสกัดประสิทธิภาพสูง dpph ดังต่อไปนี้วิธีการจัดกิจกรรม และเนื้อหา โดยรวมสูงกว่าฟีโนลิก ( ตารางที่ 1 ) จึงยืนยันความถูกต้องของการเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการ
C . sativa ใบเอทานอล : น้ำ ( 7 :3 ) นำเสนอเป็นสารสกัดจาก ic50 สำหรับการของ dpph ของ 12.58 ± 0.54 μ g / ml ( หมายถึง± s.e.m. ) ในขณะที่รูตินและกรดแอสคอร์บิกา ic50s ของการดำเนิน± 0.53 และ 4.93 ± 0.36 μกรัม / มิลลิลิตร ตามลำดับ ferrozine หรือรูปแบบเชิงซ้อนที่มี fe2 . ในการปรากฏตัวของสารคีเลต , เชิงซ้อนกระจัดกระจายผล - ไอเอ็นจีในการลดลงของสีแดงซับซ้อน [ 23 ]การ ic50 พบว่าเหล็กเป็น 132.9 chelation ± 9.72 μ g / ml ( หมายถึง± s.e.m. ) และ EDTA แสดงเป็น ic50 ของภาค± 0.29 μ g / ml ปรับ C . sativa ใบเอทานอล : น้ำ ( 7 : 3 ) สารป้องกัน dpph กระ ( รูปที่ 2A ) และไอออนเหล็กคีเลท ( รูปที่ 2B ) ในความเข้มข้น ขึ้นอยู่กับลักษณะ .
มันเป็นที่น่าสนใจเพื่อเปรียบเทียบข้อมูลใน C, กับอื่น ๆชนิดพืชได้ใช้เหมือนกัน assaying ระบบ จากการศึกษาพบว่าสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม dpph C . sativa ใบ ( 7 : 3 ) สารสกัดเอทานอล : น้ำค่อนข้างสูงเมื่อเปรียบเทียบกับผลการศึกษาที่คล้ายกันดำเนินการกับสปีชีส์ในวงศ์กะเพรา ( ic50s ตั้งแต่ 300 ถึง 600 μกรัม / มิลลิลิตร ) [ 24 ] กับโรงงานของบราซิล ( ic50s ตั้งแต่ 11.6 ถึง 158 .9 μกรัม / มิลลิลิตร ) [ 25 ] และพืชโบลิเวีย ( ic50s ช่วงจากกิจการ 124.0 μกรัม / มิลลิลิตร ) [ 26 ] การ dpph การกิจกรรมของแยกศึกษาในงานนี้ก็เปรียบได้กับชาเขียว ( ic50 = 11.8 μ g / ml )และโลหะและกิจกรรม นอกจากนี้ยังค่อนข้างแรงเมื่อเทียบกับผลลัพธ์ที่ได้ใกล้เคียงกับการใช้สารสกัดจากใบ ( Cinnamomum verum ic50 ในช่วง 400 – 600 μกรัม / มิลลิลิตร ) [ 14 ] และเผ่าพันธุ์ ( Lamiaceae ic50s ช่วงจาก 0.8 ถึง 1.40 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) [ 24 ] สกัดยังแสดงการดูดซึมที่แข็งแกร่งที่ 280nm ( UVB )หลักฐานนี้ชี้ให้เห็นประสิทธิผลที่เป็นไปได้ของเกาลัดสารสกัดใบเฉพาะการบริหารเพื่อป้องกัน UV radiation-induced ความเสียหายผิว ด้วยกลไกหลาย