The technique of enumerating colifo

The technique of enumerating coliforms by means of multiple-tube fermentation (MTF) has been used for over 80 years as a water quality monitoring method. The method consists of inoculating a series of tubes with appropriate decimal dilutions of the water sample. Production of gas, acid formation or abundant growth in the test tubes after 48 h of incubation at 35 °C constitutes a positive presumptive reaction. Both lactose and lauryl tryptose broths can be used as presumptive media, but Seidler et al. (1981) and Evans et al. (1981) have obtained interference, with high numbers of non-coliform bacteria, using lactose broth. All tubes with a positive presumptive reaction are subsequently subjected to a confirmation test. The formation of gas in a brilliant green lactose bile broth fermentation tube at any time within 48 h at 35 °C constitutes a positive confirmation test. The fecal coliform test (using an EC medium) can be applied to determine TC that are FC (APHA et al., 1998): the production of gas after 24 h of incubation at 44.5 °C in an EC broth medium is considered as a positive result.

The results of the MTF technique are expressed in terms of the most probable number (MPN) of microorganisms present. This number is a statistical estimate of the mean number of coliforms in the sample. As a consequence, this technique offers a semi-quantitative enumeration of coliforms. Nevertheless, the precision of the estimation is low and depends on the number of tubes used for the analysis: for example, if only 1 ml is examined in a sample containing 1 coliform/ml, about 37% of 1-ml tubes may be expected to yield negative results because of the random distribution of the bacteria in the sample. But, if five tubes, each with 1 ml sample, are used, a negative result may be expected less than 1% of the time (APHA et al., 1998).

Many factors may significantly affect coliform bacteria detection by MTF, especially during the presumptive phase. Interference by high numbers of non-coliform bacteria Seidler et al., 1981, Evans et al., 1981 and Means and Olson, 1981, as well as the inhibitory nature of the media (McFeters et al., 1982), have been identified as factors contributing to underestimates of coliform abundance. The MTF technique lacks precision in qualitative and quantitative terms. The time required to obtain results is higher than with the membrane filter technique that has replaced the MTF technique in many instances for the systematic examination of drinking water. However, this technique remains useful, especially when the conditions do not allow the use of the membrane filter technique, such as turbid or colored waters.

MTF is easy to implement and can be performed by a technician with basic microbiological training, but the method can become very tedious and labor-intensive since many dilutions have to be processed for each water sample. However, it is also relatively inexpensive, as it requires unsophisticated laboratory equipment. Nevertheless, this method is extremely time-consuming, requiring 48 h for presumptive results, and necessitates a subculture stage for confirmation which could take up to a further 48 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีการใช้เทคนิคของการแจงนับการกำจัดโดยวิธีการหมักหลายหลอด (MTF) 80 ปีเป็นวิธีการตรวจสอบคุณภาพน้ำ วิธีการจำนวน inoculating ชุดท่อกับ dilutions ทศนิยมที่เหมาะสมของตัวอย่างน้ำ ผลิตก๊าซ กรดก่อตัว หรือเจริญเติบโตมากในหลอดทดสอบหลังจาก 48 h ของบ่มที่ 35 ° C ถือ presumptive ปฏิกิริยาเชิงบวก แล็กโทสและ lauryl tryptose broths สามารถใช้เป็น สื่อ presumptive แต่ Seidler et al. (1981) และอีแวนและ al. (1981) ได้รับสัญญาณ จำนวนไม่ใช่โคลิฟอร์มแบคทีเรีย ใช้ซุปแล็กโทสสูง หลอดทั้งหมด ด้วย presumptive ปฏิกิริยาเชิงบวกต่อมาได้อยู่ภายใต้การทดสอบยืนยัน การก่อตัวของก๊าซในหลอดหมักซุปน้ำดีย่อยแลคโตสสีเขียวสดใสตลอดเวลาภายใน 48 h ที่ 35 ° C ถือการทดสอบยืนยันบวก การทดสอบโคลิฟอร์ม fecal (ใช้สื่อมี EC) สามารถใช้เพื่อกำหนด TC ที่ FC (อาภาและ al., 1998): การผลิตก๊าซหลังจาก 24 ชมของคณะทันตแพทยศาสตร์ที่ 44.5 ° C ในการ EC ซุปถือเป็นผลบวกได้ผลของเทคนิค MTF ที่แสดงในเลขมากที่สุดน่าเป็น (บริษัทเอ็มพีเอ็น) จุลินทรีย์อยู่ หมายเลขนี้เป็นการประเมินทางสถิติของจำนวนกำจัดจากตัวอย่างหมายถึง ผล เทคนิคนี้มีการแจงนับเชิงกึ่งปริมาณกำจัด อย่างไรก็ตาม ความแม่นยำของการประเมินอยู่ในระดับต่ำ และขึ้นอยู่กับจำนวนหลอดที่ใช้สำหรับการวิเคราะห์: ตัวอย่าง ถ้าเพียง 1 ml จะตรวจสอบในตัวอย่างที่ประกอบด้วย 1 โคลิ ฟอร์ม/ml, 1 ml หลอดประมาณ 37% อาจสามารถคาดว่าจะลบผลลัพธ์เนื่องจาก มีการกระจายแบบสุ่มของแบคทีเรียในตัวอย่างได้ แต่ ถ้าใช้หลอด 5 พร้อมตัวอย่าง 1 ml ผลลบอาจคาดหวังน้อยกว่า 1% ของเวลา (อาภาและ al., 1998)ปัจจัยหลายอย่างอาจมีผลต่อตรวจหาโคลิฟอร์มแบคทีเรีย โดย MTF โดยเฉพาะในช่วงระยะ presumptive สัญญาณรบกวน โดยตัวเลขที่สูงของไม่โคลิฟอร์มแบคทีเรีย Seidler et al., 1981 อีวานส์ et al., 1981 และวิธี และโอ ลสัน 1981 รวมทั้งที่ได้รับการระบุลักษณะของสื่อ (McFeters และ al., 1982), ลิปกลอสไขเป็นปัจจัยที่เอื้อต่อการ underestimates ของโคลิฟอร์มที่อุดมสมบูรณ์ เทคนิค MTF ขาดความแม่นยำในเชิงคุณภาพ และเชิงปริมาณ เวลาต้องใช้เพื่อให้ได้ผลลัพธ์สูงกว่า ด้วยเทคนิคกรองเมมเบรนที่แทนเทคนิค MTF ในหลายกรณีตรวจสอบระบบน้ำดื่ม ได้ อย่างไรก็ตาม เทคนิคนี้ยังคงมีประโยชน์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเงื่อนไขการอนุญาตให้ใช้เยื่อกรองเทคนิค เช่นน้ำ turbid หรือสีMTF เป็นง่ายที่จะใช้ และสามารถดำเนินการ โดยช่างเทคนิคที่มีการฝึกพื้นฐานทางจุลชีววิทยา แต่วิธีการสามารถกลายเป็นน่าเบื่อมาก และ labor-intensive ตั้งแต่ dilutions มากต้องประมวลผลสำหรับแต่ละตัวอย่างน้ำ อย่างไรก็ตาม ก็ยังแพง ตามที่ต้องการอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการวันนั้น อย่างไรก็ตาม วิธีการนี้เป็นเวลามาก ต้อง 48 h สำหรับผลลัพธ์ presumptive และ necessitates วัฒนธรรมขั้นตอนสำหรับใบรับรองที่สามารถใช้ได้เป็น h 48 เพิ่มเติม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เทคนิคของ enumerating โคลิฟอร์มด้วยวิธีหมักหลายหลอด ( MTF ) มีการใช้มานานกว่า 80 ปี โดยการตรวจสอบคุณภาพน้ำ โดยวิธี วิธีประกอบด้วยชุดของท่อ ณระดับทศนิยมเจือจางของน้ำตัวอย่าง การผลิตก๊าซกรดการเติบโตมากมายในหลอดทดลองหลังจาก 48 ชั่วโมงของการบ่มที่ 35 ° C ถือเป็นปฏิกิริยาที่ให้ผลบวก ทั้งในและ tryptose broths ลแลคโตส สามารถใช้เป็นสื่อที่ให้ผล แต่ซีดเลอร์ et al . ( 1981 ) และอีแวนส์ et al . ( 1981 ) ได้รับการรบกวนกับจำนวนโคลิฟอร์มแบคทีเรียสูง ไม่ ใช้ แลคโตส ซุปหลอดทั้งหมดที่มีปฏิกิริยาที่ให้ผลบวก ต่อมาได้รับการยืนยันการทดสอบ การก่อตัวของแก๊สในหลอดสีเขียวสดใส แลคโตส น้ำดี น้ำหมักที่เวลาใด ๆภายใน 48 ชั่วโมง 35 ° C ถือเป็นการทดสอบยืนยันบวก การทดสอบฟีคัลโคลิฟอร์ม ( โดยใช้ กกต. กลาง ) สามารถใช้เพื่อตรวจสอบ TC ที่ FC ( apha et al . , 1998 )การผลิตก๊าซหลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มที่ 44.5 องศา C ในน้ำซุป กกต. กลางถือเป็นบวก

ผลของเทคนิค MTF จะแสดงในแง่ของตัวเลขที่น่าจะเป็น ( MPN ) ของจุลินทรีย์ ปัจจุบัน ตัวเลขนี้เป็นประมาณการทางสถิติของจำนวนเฉลี่ยของโคลิฟอร์มในตัวอย่าง อย่างไรก็ดีเทคนิคนี้มีการกึ่งปริมาณโคลิฟอร์ม . อย่างไรก็ตาม ความแม่นยำของการประมาณเป็นน้อย ขึ้นอยู่กับจำนวนหลอดที่ใช้สำหรับวิเคราะห์ : ตัวอย่างเช่นถ้าเพียง 1 ml จะตรวจสอบในตัวอย่างที่ 1 ฟอร์ม / ml ประมาณ 37% ของ 1-ml หลอดอาจจะคาดว่าจะให้ผลลบ เพราะการกระจายของแบคทีเรียในตัวอย่าง แต่ถ้า 5 หลอดละ 1 มิลลิลิตร จำนวนที่ใช้ ผลเป็นลบอาจจะคาดหวังน้อยกว่า 1% ของเวลา ( apha et al . , 1998 ) .

หลายปัจจัยที่อาจมีผลต่อการตรวจหาโคลิฟอร์มแบคทีเรียโดย MTF , โดยเฉพาะอย่างยิ่งในช่วงระยะที่ให้ผล . การแทรกแซงโดยตัวเลขของโคลิฟอร์มแบคทีเรียสูง ไม่ซีดเลอร์ et al . , 1981 , อีแวนส์ et al . , 1981 และค่าเฉลี่ยและโอลสัน , 1981 ,เช่นเดียวกับธรรมชาติยับยั้งของสื่อ ( mcfeters et al . , 1982 ) ได้รับการระบุเป็นปัจจัยที่ยังดูถูกดูแคลนของโคลิฟอร์มมากมาย เทคนิค MTF ขาดความแม่นยำในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณคือเวลาที่จำเป็นเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่สูงกว่าด้วยเยื่อกรองเทคนิคที่ได้เปลี่ยนวิธี MTF ในหลายกรณีสำหรับการตรวจสอบระบบน้ำดื่ม อย่างไรก็ตาม เทคนิคนี้จะเป็นประโยชน์โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเงื่อนไขที่ไม่อนุญาตให้ใช้เยื่อกรองเทคนิค เช่น ขุ่น หรือสี

"MTF เป็นง่ายต่อการใช้และสามารถดำเนินการโดยช่างเทคนิคที่มีการฝึกพื้นฐานทางจุลชีววิทยา แต่วิธีนี้อาจจะมากน่าเบื่อและใช้แรงงานตั้งแต่หลายวิธีการจะต้องดำเนินการสำหรับแต่ละตัวอย่างน้ำ . อย่างไรก็ตาม ก็ยังแพง มันต้องใช้อุปกรณ์ในห้องปฏิบัติการปกติ อย่างไรก็ตาม วิธีนี้เป็นวิธีที่มากใช้เวลานานต้องการชั่วโมง 48 ผลให้ผลและ necessitates วัฒนธรรมย่อยที่เวทียืนยัน ซึ่งอาจใช้เวลาถึง 48 ชั่วโมง เพิ่มเติม