CRISPR–Cas9 delivery by adeno-assoc

CRISPR–Cas9 delivery by adeno-associated virus (AAV) holds promise for gene therapy but faces critical barriers on account of its potential immunogenicity and limited payload capacity. Here, we demonstrate genome engineering in postnatal mice using AAV–split-Cas9, a multifunctional platform customizable for genome editing, transcriptional regulation, and other previously impracticable applications of AAV–CRISPR–Cas9. We identify crucial parameters that impact efficacy and clinical translation of our platform, including viral biodistribution, editing efficiencies in various organs, antigenicity, immunological reactions, and physiological outcomes. These results reveal that AAV–CRISPR–Cas9 evokes host responses with distinct cellular and molecular signatures, but unlike alternative delivery methods, does not induce extensive cellular damage in vivo. Our study provides a foundation for developing effective genome therapeutics.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ส่ง CRISPR – Cas9 เกี่ยวข้อง adeno ไวรัส (ทา) ถือสัญญาสำหรับยีนบำบัด แต่เผชิญอุปสรรคสำคัญเนื่อง immunogenicity ศักยภาพความใการจำกัด ที่นี่ เราแสดงให้เห็นถึงกลุ่มวิศวกรรมในหลังคลอดหนูใช้ Cas9-ทา – แยก ปรับแต่งแก้ไขกลุ่ม transcriptional ระเบียบ และใช้งานอื่น ๆ แต่ไม่เคยของ CRISPR – ทา – Cas9 แพลตฟอร์มมัลติฟังก์ชั่ เราระบุพารามิเตอร์สำคัญที่ผลกระทบประสิทธิภาพและแพลตฟอร์มของเรา รวมทั้งไวรัส biodistribution คลินิกแปลแก้ไขประสิทธิภาพในหลายอวัยวะ antigenicity ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน และผลทางสรีรวิทยา ผลลัพธ์เหล่านี้เปิดเผยว่า ทา – CRISPR – Cas9 กระตุ้นการตอบสนองของโฮสต์ กับลายเซ็นที่เซลลูลาร์ และโมเลกุลแตกต่างกัน แต่แตกต่าง จากวิธีการจัดส่งอื่น ก่อให้เกิดเซลลูลาร์งผิดปกติในร่างกาย ศึกษาของเราเป็นพื้นฐานให้การพัฒนามีประสิทธิภาพกลุ่มบำบัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การจัดส่ง CRISPR-Cas9 โดยไวรัส adeno ที่เกี่ยวข้อง (AAV) ถือสัญญาสำหรับการรักษาด้วยยีน แต่ใบหน้าอุปสรรคสำคัญในบัญชีของภูมิคุ้มกันที่มีศักยภาพและอัตราความจุที่ จำกัด ที่นี่เราแสดงให้เห็นถึงวิศวกรรมจีโนมในหนูหลังคลอดโดยใช้ AAV-แยก Cas9 แพลตฟอร์มมัลติฟังก์ชั่ปรับแต่งสำหรับการแก้ไขจีโนมการควบคุมการถอดรหัสและการประยุกต์ใช้การไม่ได้ก่อนหน้านี้อื่น ๆ ของ AAV-CRISPR-Cas9 เราระบุพารามิเตอร์สำคัญที่ส่งผลกระทบต่อการรับรู้ความสามารถและการแปลทางคลินิกของแพลตฟอร์มของเรารวมทั้ง biodistribution ไวรัสแก้ไขประสิทธิภาพในอวัยวะต่างๆ antigenicity ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันและผลลัพธ์ทางสรีรวิทยา ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า AAV-CRISPR-Cas9 กระตุ้นการตอบสนองของโฮสต์ที่มีลายเซ็นเซลล์และโมเลกุลที่แตกต่างกัน แต่ไม่เหมือนวิธีการจัดส่งทางเลือกที่ไม่ก่อให้เกิดความเสียหายของเซลล์ในร่างกายที่กว้างขวาง การศึกษาของเราให้รากฐานสำหรับการพัฒนาจีโนมการบำบัดที่มีประสิทธิภาพ