Antisense therapy is a powerful too

Antisense therapy is a powerful tool for post-transcriptional gene silencing suitable for down-regulating target genes associated to disease. Gold nanoparticles have been described as effective intracellular delivery vehicles for antisense oligonucleotides providing increased protection against nucleases and targeting capability via simple surface modification. We constructed an antisense gold-nanobeacon consisting of a stem-looped oligonucleotide double-labelled with 3′-Cy3 and 5′-Thiol-C6 and tested for the effective blocking of gene expression in colorectal cancer cells. Due to the beacon conformation, gene silencing was directly detected as fluorescence increases with hybridisation to target, which can be used to assess the level of silencing. Moreover, this system was extensively evaluated for the genotoxic, cytotoxic and proteomic effects of gold-nanobeacon exposure to cancer cells. The exposure was evaluated by two-dimensional protein electrophoresis followed by mass spectrometry to perform a proteomic profile and 3-(4,5-Dimethylthiazol-2- Yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide (MTT) assay, glutathione-S-transferase assay, micronucleus test and comet assay to assess the genotoxicity. This integrated toxicology evaluation showed that the proposed nanotheranostics strategy does not exhibit significant toxicity, which is extremely relevant when translating into in vivo systems.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การรักษาด้วย antisense เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการห้ามไม่ให้พูดยีนหลังการถอดรหัสเหมาะสำหรับลงยีนที่ควบคุมเป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับโรค อนุภาคนาโนทองคำที่ได้รับการอธิบายเป็นที่มีประสิทธิภาพยานพาหนะจัดส่งภายในเซลล์เพื่อ oligonucleotides antisense ให้การป้องกันที่เพิ่มขึ้นกับ nucleases และการกำหนดเป้​​าหมายความสามารถผ่านการปรับเปลี่ยนพื้นผิวที่เรียบง่ายเราสร้าง antisense ทอง nanobeacon ประกอบด้วย oligonucleotide ก้าน-คล้องสองครั้งกำกับด้วย 3 ของ-cy3 และ 5'-thiol-c6 และทดสอบสำหรับการป้องกันที่มีประสิทธิภาพของการแสดงออกของยีนในเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ เนื่องจากโครงสร้างสัญญาณ, การระงับยีนถูกตรวจพบโดยตรงเป็นเพิ่มเรืองแสงด้วยไฮบริที่จะกำหนดเป้​​าหมายซึ่งสามารถใช้ในการประเมินระดับความเงียบยิ่งไปกว่านั้นระบบนี้ได้รับการประเมินอย่างกว้างขวางสำหรับผลกระทบ genotoxic, พิษและโปรตีนจากการสัมผัสทอง nanobeacon กับเซลล์มะเร็ง การสัมผัสถูกประเมินโดยโปรตีนข่าวคราวสองมิติตามด้วยมวลสารเพื่อดำเนินการรายละเอียดเกี่ยวกับโปรตีนและ 3 - (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5-diphenyltetrazolium โบรไมด์ (MTT) ทดสอบ, กลูต้า-s-transferase ทดสอบ,การทดสอบไมโครนิวเคลียสดาวหางและทดสอบเพื่อประเมิน genotoxicity การประเมินผลทางพิษวิทยาบูรณาการนี​​้แสดงให้เห็นว่ากลยุทธ์ nanotheranostics ที่เสนอไม่ได้แสดงความเป็นพิษอย่างมีนัยสำคัญซึ่งมีความเกี่ยวข้องอย่างมากเมื่อแปลเป็​​นระบบในร่างกาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บำบัด antisense เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับยีน post-transcriptional silencing เหมาะสำหรับควบคุมลงเป้าหมายยีนที่สัมพันธ์กับโรค มีการอธิบายเก็บกักทองเป็นยานพาหนะส่งผล intracellular สำหรับ oligonucleotides antisense ให้เพิ่มป้องกัน nucleases และความสามารถในการกำหนดเป้าหมายผ่านผิวแก้ไขง่าย เราสร้างเป็น antisense ทอง-nanobeacon ซึ่งเป็นก้าน looped oligonucleotide คู่มัน 3′ Cy3 กับ 5′-Thiol-C6 และทดสอบประสิทธิภาพบล็อกของยีนในเซลล์มะเร็งลำไส้ เนื่องจาก conformation เบคอน silencing ยีนโดยตรงพบเป็น fluorescence ขึ้นกับ hybridisation การแสดง ซึ่งสามารถใช้ในการประเมินระดับของ silencing นอกจากนี้ ระบบนี้ได้อย่างกว้างขวางถูกประเมิน genotoxic, cytotoxic และผล proteomic ของ nanobeacon ทองสัมผัสกับเซลล์มะเร็ง มีประเมินความเสี่ยง โดย electrophoresis โปรตีนสองตามสเปกโตรเมททำโพรไฟล์ proteomic และ 3 วิเคราะห์โบรไมด์ (MTT) -(4,5-Dimethylthiazol-2-Yl)-2,5-Diphenyltetrazolium กลูตาไธโอน-S-transferase วิเคราะห์ ดาวหางและทดสอบ micronucleus assay เพื่อประเมินการ genotoxicity นี้รวมประเมินพิษวิทยาพบว่า กลยุทธ์การนำเสนอ nanotheranostics แสดงสำคัญความเป็นพิษ ซึ่งจะเกี่ยวข้องมากในการแปลระบบในสัตว์ทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การบำบัด antisense เป็นเครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการปิดเสียงการ transcriptional ยีนยีนเหมาะสำหรับกลุ่มเป้าหมายลง - การควบคุมที่เกี่ยวข้องกับโรค nanoparticles สีทองได้รับการอธิบายได้ว่าเป็นรถที่ใช้จัดส่งสินค้า intracellular มี ประสิทธิภาพ สำหรับ oligonucleotides antisense ให้เพิ่มการป้องกันจาก nucleases เป้าหมายและความสามารถในการแก้ไขผ่านพื้นผิวเรียบง่ายเราสร้างขึ้นที่ antisense สีทอง - nanobeacon ประกอบด้วยก้าน - รวบ oligonucleotide ดับเบิลคลิกที่มีป้ายที่มี 3 ' - ความ 3 และ 5 ' - thiol - c 6 และได้รับการทดสอบความสามารถในการที่มีผลการปิดกั้นการแสดงออกของยีนในเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่,มะเร็ง. เนื่องจากมีการทำตามแนวเตือนที่มีการปิดเสียงยีนตรวจพบว่าเป็นการเพิ่มคุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซพร้อมด้วย hybridisation ไปยังเป้าหมายซึ่งสามารถนำมาใช้เพื่อประเมินระดับของการปิดเสียงโดยตรงยิ่งไปกว่านั้นยังเป็นพื้นที่กว้างระบบนี้ได้รับการประเมินสำหรับ cytotoxic genotoxic proteomic และผลของการรับแสงสีทอง - nanobeacon ไปที่เซลล์มะเร็ง ได้รับการประเมินความเสี่ยงโดยสองมิติโปรตีน electrophoresis ตามด้วยการ spectrometry ในการดำเนินการที่ proteomic โปรไฟล์และ 3 - ( 4.5 กิโลเมตรเป็น - dimethylthiazol 2 - YL ) -2,5 - diphenyltetrazolium ไม่น่าทึ่ง( mtt )สอบ, glutathione - S - transferase สอบ,สอบ micronucleus และทำการทดสอบเพื่อประเมิน genotoxicity COMET แบบเป็นกลุ่มได้. การประเมินผลก็ยอมรับอย่างดีแบบอินทิเกรตนี้ยังแสดงให้เห็นว่ายุทธศาสตร์ nanotheranostics เสนอไม่ได้จัดแสดงนิทรรศการความเป็นพิษอย่างมีนัยสำคัญที่เกี่ยวข้องเป็นอย่างมากเมื่อแปลเข้าไปได้ในระบบไปยังสถานี Vivo