such อัลบูมิน binding protein may b

such อัลบูมิน binding protein may be an อัลบูมิน binding domain such as Streptococcal protein G strain 148 (G148). In some other embodiments, the อัลบูมิน binding protein may be an engineered อัลบูมิน binding โพลีเปปไทด์. For example, the อัลบูมิน binding โพลีเปปไทด์ may have an amino acid sequence ซึ่งประกอบรวมด้วย SEQ ID NO: 85. The อัลบูมิน binding โพลีเปปไทด์ of SEQ ID NO. 85 may ในบางรุรุ thus have additional amino acid เรซิดิว(s) which is/are attached to the either terminal end, e.g. such as the three amino acids KLN. In this regard, the present การเปิดเผย provides exemplary คอนจูเกตd ไลโปคาลิน มิวทีน, which ประกอบรวมด้วย an amino acid sequence as set forth in any one of SEQ ID NO: 83-84.

[00110] In other embodiments, อัลบูมิน itself หรือ a biological active ชิ้นส่วนย่อย of อัลบูมิน can be used as conjugation partner of a ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย. The term "อัลบูมิน" รวมถึง all mammal อัลบูมินs such as human serum อัลบูมิน ("RSA") หรือ bovine serum อัลบูมิน หรือ rat อัลบูมิน. The อัลบูมิน หรือ ชิ้นส่วนย่อย thereof can be recombinantly produced as described in US patent 5,728,553 หรือ European patent applications BP 0 330 451 and BP 0 361 991. As a representative example, recombinant human อัลบูมิน (Recombumin®) Novozymes Delta Ltd. (Nottingham, UK) can be คอนจูเกตd หรือ fused to a ไลโปคาลิน มิวทีน in order to extend the half-life of the มิวทีน.

[00111] If the อัลบูมิน-binding protein is an antibody ชิ้นส่วนย่อย it may be a domain antibody. Domain Antibodies are engineered to allow precise control over biophysical properties and in vivo half-life to create the optimal safety and efficacy product profile. Domain Antibodies are for example commercially available from Domantis Ltd. (Cambridge, UK and MA, USA).

[00112] Using transferrin as a มอยอิตี้ to extend the serum half-life of the มิวทีน of the การเปิดเผย, the มิวทีน can be genetically fused to the N หรือ C terminus, หรือ both, of non• glycosylated transferrin. Non-glycosylated transferrin has a half-life of 14-17 days, and a transferrin fusion protein will similarly have an extended half-life. The transferrin carrier also provides high bioavailability, biodistribution and circulating stability. This technology is commercially available from BioRexis (BioRexis Pharmaceutical Corporation, PA, USA). Recombinant human transferrin (DeltaFerrin™) for use as a protein stabilizer/half-life extension partner is also commercially available from Novozymes Delta Ltd. (Nottingham, UK).

[00113] If an Fe part of an immunoglobulin is used for the purpose to prolong the serum half-life of the มิวทีน of the การเปิดเผย, the SynFusion™ technology, commercially available from Syntonix Pharmaceuticals, Inc (MA, USA), may be used. The use of this Fe• fusion technology allows the creation of longer-acting biopharmaceuticals and may for example consist of two copies of the มิวทีน linked to the Fe บริเวณ of an antibody to improve pharmacokinetics, solubility and production efficiency.

[00114] Yet another alternative to prolong the half-life of a ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย is to fuse long, unstructured, flexible glycine-rich sequences (for example, poly• glycine with about 20 to 80 consecutive glycine เรซิดิว) to the N-or C-terminus of a ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย. This approach disclosed in W02007/038619, for example, has also been term "rPEG" (recombinant PEG).

[00115] If polyalkylene glycol molecule is used for the purpose to prolong the serum half-life of the มิวทีน of the การเปิดเผย, the polyalkylene glycol can be substituted, unsubstituted, linear หรือ branched. It can also be an activated polyalkylene derivative. Examples of suitable compounds are polyethylene glycol (PEG) molecules หรือ activated derivatives thereof as described in WO 99/64016, in US Patent 6,177,074 หรือ in US Patent
6,403,564 in relation to interferon, หรือ as described for other proteins such as PEG-modified asparaginase, PEG-adenosine deaminase (PEG-ADA) หรือ PEG-superoxide dismutase (see for example, Fuertges et al. (1990) The Clinical Efficacy of Poly(Ethylene Glycol)-Modified Proteins J. Control. Release 11, 139-148). The molecular weight of such a polymer, such as polyethylene glycol, may range from about 300 to about 70,000 Dalton, ที่รวมถึง, for example, polyethylene glycol with a molecular weight of about 10,000, of about 20,000, of about 30,000 หรือ of about 40,000 Dalton. Moreover, as e.g. described in US patents 6,500,930 หรือ 6,620,413, carbohydrate oligo- and polymers such as starch หรือ hydroxyethyl starch (HES) can be คอนจูเกตd to a มิวทีน of the การเปิดเผย for the purpose of serum half-life extension. In some further embodiments, for the purpose to prolong the serum half-life of the มิวทีน of the การเปิดเผย, PEG30 หรือ PEG40 would be suggested in animals/humans with normal renal filtration rather than shorter PEGs, because i.e. the faster elimination of PEG 12 หรือ PEG20 may limit the effectiveness and duration of PEG-คอนจูเกตd (PEGylated) ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย. In this regard, the present การเปิดเผย provides exemplary ไลโปคาลิน มิวทีน as shown in SEQ ID NO: 30-32 that can be PEG-คอนจูเกตd.

[00116] In another embodiment, a ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย may be fused to one หรือ more มอยอิตี้ that can confer new characteristics to the fusion such as enzymatic activity หรือ binding แอฟฟินิตี้ for other molecules. Examples of such suitable มอยอิตี้ are alkaline phosphatase, horseradish peroxidase, glutathione-S-transferase, the อัลบูมิน-binding domain of protein G, protein A, antibody ชิ้นส่วนย่อยs, oligomerization domains, ไลโปคาลิน มิวทีน of same หรือ different binding specificity (which results in the formation of "Duocalins", cf. Schlehuber, S., and Skerra, A. (2001), Duocalins, engineered ลิแกนด์-binding proteins with dual specificity derived from the ไลโปคาลิน fold. Biol. Chem. 382, 1335-1342) หรือ toxins.

[00117] In particular, it may be possible to fuse a ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย with a separate enzyme active ตำแหน่ง such that both "components" of the resulting fusion may act together on a given therapeutic target. For example, when fused together, the binding domain of the ไลโปคาลิน มิวทีน can attach to a disease-causing target, thereby allowing the enzyme domain to abolish the biological function of the target.
[00118] If one of the above มอยอิตี้ is คอนจูเกตd to the ไลโปคาลินนุนุ มิวทีน of the การเปิดเผย, conjugation to an amino acid side chain can be advantageous. Suitable amino acid side chains may occur naturally in the amino acid sequence of ไลโปคาลินนุนุ หรือ may be introduced by การก่อกลายพันธุ์. In case a suitable binding ตำแหน่ง is introduced via การก่อกลายพันธุ์, one possibility is the replacement of an amino acid at the appropriateposition by a ซิสเทอีน เรซิดิว. In one embodiment, such mutation รวมถึง at least one of Thr 40--> Cys, Glu 73--> Cys, Arg 90--> Cys, Asp 95--> Cys หรือ Glu 131--> Cys substitution. The newly created ซิสเทอีน เรซิดิว at any of these positions can in the following be utilized to คอนจูเกต the มิวทีน to มอยอิตี้ prolonging the serum half-life of the มิวทีน, such as PEG หรือ an activated derivative thereof.

[00119] In another embodiment, in order to provide suitable amino acid side chains for conjugating one of the above มอยอิตี้ to the มิวทีน of the การเปิดเผย artificial amino acids may be introduced by การก่อกลายพันธุ์. Generally, such artificial amino acids are designed to be more reactive and thus to facilitate the conjugation to the desired มอยอิตี้. One example of such an artificial amino acid that may be introduced via an artificial tRNA is para-acetyl• ฟีนิลอะลานีน.

[00120] ในบางรุรุ, the ไลโปคาลิน มิวทีน according to the การเปิดเผย may contain a signal sequence. Signal sequences at the N-terminus of a โพลีเปปไทด์ direct this โพลีเปปไทด์ to a specific cellular compartment, for example the periplasm of E. coli หรือ the endoplasmatic reticulum of eukaryotic cells. A large number of signal sequences are known in the art. An illustrative signal sequence for secretion a โพลีเปปไทด์ into the periplasm of E. coli is the OmpA-signal sequence.

[00121] The present การเปิดเผย also relates to nucleic acid molecules (DNA and RNA) that รวมถึง nucleotide sequences coding for มิวทีน as described herein. Since the degeneracy of the genetic code permits substitutions of certain โคดอนs by other โคดอนs specifying the same amino acid, the การเปิดเผย is not limited to a specific nucleic acid molecule encoding a มิวทีน of the การเปิดเผย but

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เช่นอัลบูมินผูกโปรตีนอาจเป็นอัลบูมินรวมโดเมนเช่นต้องใช้โปรตีน Streptococcal G 148 (G148) ในบางอื่น ๆ embodiments โปรตีนรวมอัลบูมินอาจจะมีอัลบูมินออกแบบผูกโพลีเปปไทด์ ตัวอย่าง โพลีเปปไทด์รวมอัลบูมินอาจมีกรดอะมิโนลำดับซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับ ID ไม่: 85 อัลบูมินผูกโพลีเปปไทด์ลำดับรหัสหมายเลข 85 ในบางรุรุจึงได้กรดอะมิโนเพิ่มเติม เรซิดิว(s) ที่มีแนบไปเทอร์มินัลบันทึก เช่นเช่นกรดอะมิโนสาม KLN ในการนี้ การเปิดเผยปัจจุบันมีโทษ คอนจูเกตd ไลโปคาลินมิวทีน ประกอบรวมด้วยที่ลำดับกรดอะมิโนที่เป็นชุดมาหนึ่งลำดับ ID ไม่: 83-84[00110] ในอื่น ๆ embodiments อัลบูมินเองหรือสามารถใช้ชิ้นส่วนย่อยการใช้งานทางชีวภาพของอัลบูมินเป็นคู่ conjugation ของมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผย ในคำว่า "อัลบูมิน" รวมถึง อัลบูมินs เท้าทั้งหมดเช่นเซรั่มมนุษย์อัลบูมิน ("RSA") หรือเซรั่มวัวอัลบูมินหรือหนูอัลบูมิน อัลบูมินหรือชิ้นส่วนย่อยดังกล่าวสามารถ recombinantly ผลิตดังที่เราสิทธิบัตร 5,728,553 หรือยุโรปสิทธิบัตรโปรแกรม BP 0 330 451 และ BP 0 361 991 เป็นตัวอย่างตัวแทน อัลบูมินมนุษย์ recombinant (Recombumin ®) Novozymes เดลต้า จำกัด (น็อตติงแฮม UK) สามารถ คอนจูเกตd หรือ fused เพื่อไลโปคาลินมิวทีนเพื่อขยาย half-life ของมิวทีนได้[00111] ถ้าโปรตีนรวมอัลบูมิน การชิ้นส่วนย่อยแอนติบอดีอาจแอนติบอดีโดเมน แอนตี้โดเมนจะได้วางแผนให้แม่นยำควบคุมคุณสมบัติ biophysical และฮาล์ฟ-ไลฟ์ในสัตว์ทดลองเพื่อสร้างความปลอดภัยสูงสุดและข้อมูลผลิตภัณฑ์ประสิทธิภาพ แอนตี้โดเมนเป็นตัวอย่างที่ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก Domantis จำกัด (เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร และ MA, USA)[00112] transferrin ใช้เป็นมอยอิตี้ต่อ half-life serum ของมิวทีนของการเปิดเผย มิวทีนสามารถถูกแปลงพันธุกรรม fused ไป N หรือซีนัส หรือ ทั้งของ non• glycosylated transferrin ไม่ glycosylated transferrin มี half-life ของวันที่ 14-17 และโปรตีนเป็นฟิวชั่น transferrin จะคล้าย half-life ที่ขยาย บริษัทขนส่ง transferrin มีชีวปริมาณออกฤทธิ์สูง biodistribution และการหมุนเวียนความมั่นคง เทคโนโลยีนี้จะใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก BioRexis (บริษัทยา BioRexis, PA สหรัฐอเมริกา) Recombinant มนุษย์ transferrin (DeltaFerrin ™) สำหรับใช้เป็นโปรตีนโคลง/ครึ่ง-life ขยายพันธมิตรกันได้ในเชิงพาณิชย์จาก Novozymes เดลต้า จำกัด (น็อตติ้งแฮม อังกฤษ)[00113] ถ้าเป็นส่วน Fe ของ immunoglobulin ที่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์รั้งฮาล์ฟ-ไลฟ์เซรั่มของมิวทีนของการเปิดเผย เทคโนโลยี SynFusion ™ ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก Syntonix ยา Inc (MA, USA) สามารถใช้ การใช้ Fe• นี้ฟิวชั่นเทคโนโลยีอนุญาตให้สร้าง biopharmaceuticals รักษาการอีกต่อไป และอาจประกอบด้วยตัวอย่างของสำเนาของมิวทีนเชื่อมโยงกับ Fe บริเวณของแอนติบอดีมีการปรับปรุงประสิทธิภาพการผลิต และเภสัชจลนศาสตร์ ละลาย[00114] ยัง ได้อีกทางหนึ่งรั้ง half-life ของมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผยจะฟิวส์ยาว ไม่มีโครงสร้าง ยืดหยุ่น glycine-ริชลำดับ (เช่น poly• glycine มีเรซิดิว glycine ติดต่อกันประมาณ 20 ถึง 80) ที่ N- หรือ C-นัสของมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผย วิธีการนี้เปิดเผยใน W02007/038619 เช่น ยังแล้วคำว่า "rPEG" (recombinant PEG)[00115] ถ้าโมเลกุล polyalkylene glycol ใช้สำหรับวัตถุประสงค์ฮาล์ฟ-ไลฟ์เซรั่มของมิวทีนของการเปิดเผยช่วยยืดอายุ polyalkylene glycol สามารถใช้ทดแทน unsubstituted เส้นหรือ branched ยังสามารถการอนุพันธ์ polyalkylene เปิดใช้งาน ตัวอย่างของสารที่เหมาะสมเป็น polyethylene glycol (PEG) โมเลกุลหรือเรียกใช้อนุพันธ์ดังกล่าวใน WO 99/64016 ในสหรัฐอเมริกาหรือ 6,177,074 ในเราจดสิทธิบัตรที่จดสิทธิบัตร6,403,564 in relation to interferon, หรือ as described for other proteins such as PEG-modified asparaginase, PEG-adenosine deaminase (PEG-ADA) หรือ PEG-superoxide dismutase (see for example, Fuertges et al. (1990) The Clinical Efficacy of Poly(Ethylene Glycol)-Modified Proteins J. Control. Release 11, 139-148). The molecular weight of such a polymer, such as polyethylene glycol, may range from about 300 to about 70,000 Dalton, ที่รวมถึง, for example, polyethylene glycol with a molecular weight of about 10,000, of about 20,000, of about 30,000 หรือ of about 40,000 Dalton. Moreover, as e.g. described in US patents 6,500,930 หรือ 6,620,413, carbohydrate oligo- and polymers such as starch หรือ hydroxyethyl starch (HES) can be คอนจูเกตd to a มิวทีน of the การเปิดเผย for the purpose of serum half-life extension. In some further embodiments, for the purpose to prolong the serum half-life of the มิวทีน of the การเปิดเผย, PEG30 หรือ PEG40 would be suggested in animals/humans with normal renal filtration rather than shorter PEGs, because i.e. the faster elimination of PEG 12 หรือ PEG20 may limit the effectiveness and duration of PEG-คอนจูเกตd (PEGylated) ไลโปคาลิน มิวทีน of the การเปิดเผย. In this regard, the present การเปิดเผย provides exemplary ไลโปคาลิน มิวทีน as shown in SEQ ID NO: 30-32 that can be PEG-คอนจูเกตd.[00116] ในอีกลื่น มิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผยอาจจะ fused เพื่อหนึ่งหรือมอยอิตี้เพิ่มเติมที่สามารถประสาทใหม่ลักษณะการฟิวชั่นเช่นกิจกรรมเอนไซม์ในระบบหรือผูกแอฟฟินิตี้สำหรับโมเลกุลอื่นๆ ได้ ตัวอย่างของมอยอิตี้ดังกล่าวเหมาะสมคือ อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส horseradish peroxidase กลูตาไธโอน-S-transferase อัลบูมินรวมโดเมนของ G โปรตีน โปรตีน A, ชิ้นส่วนย่อยs แอนติบอดี โดเมน oligomerization มิวทีนไลโปคาลินของ specificity ผูกแตกต่างกันหรือเหมือนกัน (ซึ่งผลลัพธ์ในการก่อตัวของ "Duocalins", cf. Schlehuber, S. และ Skerra, A. (2001), Duocalins วิศวกรรมโปรตีนลิแกนด์ผูกกับ specificity สองมาพับไลโปคาลิน Biol. Chem. 382, 1335-ทูต) หรือสารพิษเฉพาะใน [00117] มันอาจจะไปฟิวส์มิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผยกับการแยกเอนไซม์ใช้ตำแหน่งดังกล่าวที่ทั้ง "ส่วนประกอบ" ของการหลอมเหลวได้อาจดำเนินร่วมกันกำหนดเป้าหมายรักษา ตัวอย่าง เมื่อ fused กัน รวมโดเมนของไลโปคาลินมิวทีนสามารถแนบกับสาเหตุของโรคเป้าหมาย จึงทำให้โดเมนเอนไซม์ยุบการทำงานทางชีวภาพของเป้าหมาย [00118] มอยอิตี้ข้างต้นอย่างใดอย่างหนึ่งว่า คอนจูเกตd กับมิวทีนไลโปคาลินนุนุของการเปิดเผย conjugation ไปด้านกรดอะมิโนได้ประโยชน์ กรดอะมิโนที่เหมาะสมด้านโซ่อาจเกิดขึ้นตามธรรมชาติในลำดับกรดอะมิโนของไลโปคาลินนุนุหรืออาจจะแนะนำ โดยการก่อกลายพันธุ์ ในกรณีที่ตำแหน่งผูกเหมาะเป็นที่รู้จักผ่านการก่อกลายพันธุ์ หนึ่งสามารถถูกเปลี่ยนเป็นกรดอะมิโนที่ appropriateposition โดยซิสเทอีนเรซิดิว ในหนึ่งลื่น รวมถึงการกลายพันธุ์ดังกล่าวอย่างน้อยหนึ่งของ Thr 40 หอม Cys, Glu 73 หอม Cys อาร์กิวเมนต์ของค่า 90 หอม Cys, Asp 95 หอม Cys หรือ Glu 131 Cys แทนที่--> เรซิดิวซิสเทอีนที่สร้างขึ้นใหม่ในตำแหน่งใด ๆ เหล่านี้ในต่อไปนี้สามารถใช้กับคอนจูเกตมิวทีนจะมอยอิตี้ยืดฮาล์ฟ-ไลฟ์เซรั่มของมิวทีน เช่น PEG หรืออนุพันธ์เรียกใช้งานดังกล่าวได้[00119] ในลื่นอีก เพื่อให้เหมาะสมกรดอะมิโนโซ่ด้านใน conjugating มอยอิตี้ข้างให้มิวทีนของการเปิดเผยหนึ่ง ประดิษฐ์กรดอะมิโนอาจจะแนะนำ โดยการก่อกลายพันธุ์ ทั่วไป กรดอะมิโนเช่นเทียมถูกออกแบบให้มีปฏิกิริยามากขึ้นและเพื่ออำนวยความสะดวกการ conjugation การมอยอิตี้ต้องการ ตัวอย่างหนึ่งเช่นการประดิษฐ์กรดอะมิโนที่อาจนำมาใช้ผ่าน tRNA ประดิษฐ์เป็น para acetyl• ฟีนิลอะลานีน[00120] ในบางรุรุ มิวทีนไลโปคาลินตามการเปิดเผยอาจประกอบด้วยลำดับสัญญาณ ลำดับสัญญาณที่นัส N ของโพลีเปปไทด์ตรงนี้โพลีเปปไทด์กับช่องโทรศัพท์มือถือที่เฉพาะ เช่น periplasm ของ E. coli หรือลัม endoplasmatic เซลล์ eukaryotic ลำดับสัญญาณจำนวนมากรู้จักกันในศิลปะ ลำดับการแสดงสัญญาณการหลั่งโพลีเปปไทด์เป็น periplasm ที่เป็นของ E. coli เป็นลำดับสัญญาณ OmpA[00121] การเปิดเผยปัจจุบันยังเกี่ยวข้องกับโมเลกุลกรดนิวคลีอิก (ดีเอ็นเอและอาร์เอ็นเอ) ที่ลำดับนิวคลีโอไทด์รวมถึงรหัสสำหรับมิวทีนเป็นอธิบายนี้ ตั้งแต่ภาวะลดรูปของรหัสพันธุกรรมอนุญาตแทนบาง โคดอนs โดย โคดอนs อื่น ๆ ระบุกรดอะมิโนเดียว การเปิดเผยไม่จำกัดโมเลกุลกรดนิวคลีอิกเฉพาะที่เข้ามิวทีนของการเปิดเผย แต่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เช่นอัลบูมินที่มีผลผูกพันโปรตีนอาจจะเป็นอัลบูมินที่มีผลผูกพันโดเมนเช่นโปรตีนเชื้อ Streptococcus สายพันธุ์ G 148 (G148) ในบาง embodiments อื่น ๆ อัลบูมินโปรตีนอาจจะมีการออกแบบอัลบูมินที่มีผลผูกพันโพลีเปปไทด์ ยกตัวอย่างเช่นอัลบูมินที่มีผลผูกพันโพลีเปปไทด์อาจจะมีกรดอะมิโนลำดับซึ่งประกอบรวมด้วย SEQ ID NO: 85 อัลบูมินที่มีผลผูกพันโพลีเปปไทด์ของ ID SEQ NO 85 อาจในบางรุรุทำให้มีกรดอะมิโนเพิ่มเติมเรซิดิว (s) ซึ่งเป็น / จะแนบไปกับปลายทั้งสองขั้วเช่นเช่นกรดอะมิโนที่สาม KLN ในการนี้การเปิดเผยในปัจจุบันให้เป็นแบบอย่างคอนจูเกตงไลโปคาลินมิวทีนซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนตามที่กำหนดไว้ในหนึ่ง SEQ ID NO:. 83-84 [00110 ] ใน embodiments อื่น ๆ อัลบูมินเองหรือชีวภาพที่ใช้งานชิ้นส่วนย่อยของอัลบูมินที่สามารถใช้เป็นพันธมิตรผันของไลโปคาลินมิวทีนของการเปิดเผย คำว่า "อัลบูมิน" รวมถึงเลี้ยงลูกด้วยนมทุกอัลบูมิน s เช่นซีรั่มของมนุษย์อัลบูมิน ("อาร์เอส") หรือซีรั่มวัวอัลบูมินหรือหนูอัลบูมิน อัลบูมินหรือชิ้นส่วนย่อยดังกล่าวสามารถผลิต recombinantly ตามที่อธิบายไว้ในสหรัฐอเมริกาสิทธิบัตร 5728553 หรือยื่นขอจดสิทธิบัตรยุโรป BP 0 330 451 และ BP 0 361 991 เป็นตัวอย่างที่เป็นตัวแทนของมนุษย์ recombinant อัลบูมิน (Recombumin® ) Novozymes เดลต้า จำกัด (น็อตติงแฮมสหราชอาณาจักร) สามารถคอนจูเกตงหรือหลอมละลายไปยังไลโปคาลินมิวทีนในการสั่งซื้อที่จะขยายครึ่งชีวิตของมิวทีน. [00111] ถ้า อัลบูมิน -binding โปรตีนแอนติบอดีชิ้นส่วนย่อยมันอาจจะเป็นแอนติบอดี้โดเมน แอนติบอดีโดเมนได้รับการออกแบบเพื่อให้การควบคุมที่แม่นยำกว่าคุณสมบัติชีวฟิสิกส์และในร่างกายครึ่งชีวิตเพื่อสร้างความปลอดภัยที่ดีที่สุดและรายละเอียดสินค้าที่มีประสิทธิภาพ แอนติบอดีโดเมนเช่นในเชิงพาณิชย์จาก Domantis จำกัด (เคมบริดจ์, แมสซาชูเซตสหราชอาณาจักรและสหรัฐอเมริกา). [00112] ใช้ transferrin เป็นมอยอิตี้ซีรั่มที่จะขยายครึ่งชีวิตของมิวทีนของการเปิดเผยที่ มิวทีนสามารถหลอมรวมพันธุกรรมเพื่อจุดประสงค์ไม่มีข้อความหรือซีหรือทั้งสองไม่• transferrin glycosylated transferrin Non-glycosylated มีครึ่งชีวิตของ 14-17 วันและโปรตีน transferrin ฟิวชั่นในทำนองเดียวกันจะมีการขยายครึ่งชีวิต ผู้ให้บริการ transferrin นอกจากนี้ยังมีการดูดซึมสูง biodistribution และความมั่นคงการไหลเวียน เทคโนโลยีนี้สามารถใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก BioRexis (BioRexis เภสัชกรรมคอร์ปอเรชั่น, PA, สหรัฐอเมริกา) transferrin มนุษย์ recombinant (DeltaFerrin ™) เพื่อใช้เป็นโคลงโปรตีน / ครึ่งชีวิตพันธมิตรขยายยังสามารถใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จาก Novozymes เดลต้า จำกัด (น็อตติงแฮมสหราชอาณาจักร). [00113] ถ้าเป็นส่วนหนึ่งของอิมมูโนเฟถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์ที่จะ ยืดซีรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีนของการเปิดเผยที่เทคโนโลยี SynFusion ™ที่ใช้ในเชิงพาณิชย์จาก Syntonix Pharmaceuticals, Inc (MA, USA) อาจจะใช้ การใช้นี้เฟ•เทคโนโลยีฟิวชั่นช่วยให้การสร้างชีวเวชภัณฑ์อีกต่อไปทำหน้าที่และอาจตัวอย่างประกอบด้วยสองสำเนาของมิวทีนที่เชื่อมโยงกับเฟบริเวณแอนติบอดีที่จะปรับปรุงยาละลายและประสิทธิภาพในการผลิต. [00114] แต่อีกทางเลือกหนึ่งที่จะยืดครึ่งชีวิตของไลโปคาลินมิวทีนของการเปิดเผยคือการหลอมรวมความยาวที่ไม่มีโครงสร้างลำดับ glycine ที่อุดมไปด้วยความยืดหยุ่น (เช่นโพลี• glycine มีประมาณ 20-80 glycine ติดต่อกัน เรซิดิว) เพื่อ N-หรือ C-ปลายทางของไลโปคาลินมิวทีนของการเปิดเผย วิธีการนี้จะเปิดเผยใน W02007 / 038,619 ตัวอย่างเช่นได้รับการคำ "rPEG" (recombinant PEG). [00115] ถ้าโมเลกุลไกลคอล polyalkylene ถูกนำมาใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการที่จะยืดซีรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีนของ การเปิดเผยไกลคอล polyalkylene สามารถทดแทน unsubstituted เชิงเส้นหรือกิ่ง นอกจากนี้ยังสามารถอนุพันธ์ polyalkylene เปิดใช้งาน ตัวอย่างของสารที่เหมาะสมเป็นเอทิลีนไกลคอล (PEG) โมเลกุลหรือสัญญาซื้อขายล่วงหน้าดังกล่าวใช้งานได้ตามที่อธิบายไว้ใน WO 99/64016 ในสหรัฐอเมริกาสิทธิบัตร 6177074 หรือในสหรัฐอเมริกาสิทธิบัตร6,403,564 ในความสัมพันธ์กับ interferon, หรือตามที่อธิบายไว้สำหรับโปรตีนอื่น ๆ เช่นแอสปารา PEG-แก้ไข deaminase PEG-อะดีโนซีน (PEG-ADA) หรือ PEG-superoxide dismutase (ดูตัวอย่าง Fuertges et al. (1990) การรับรู้ความสามารถทางคลินิกของโพลี (เอทิลีนไกลคอล) -Modified โปรตีนควบคุมเจ. ปล่อย 11, 139-148) น้ำหนักโมเลกุลเช่นลิเมอร์เช่นพลาสติกคอล, อาจมีตั้งแต่ประมาณ 300 ประมาณ 70,000 ดาลตันที่รวมถึงยกตัวอย่างเช่นพลาสติกคอลที่มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 10,000 ประมาณ 20,000 ประมาณ 30,000 หรือประมาณ 40,000 ดาลตัน นอกจากนี้ยังเป็นเช่นที่อธิบายไว้ในสิทธิบัตรของสหรัฐอเมริกา 6500930 หรือ 6620413, oligo- คาร์โบไฮเดรตและโพลิเมอร์เช่นแป้งหรือจาก hydroxyethyl starch (HES) อาจเป็นคอนจูเกตงไปยังมิวทีนของการเปิดเผยเพื่อวัตถุประสงค์ในซีรั่มครึ่ง ยืดอายุ ใน embodiments เพิ่มเติมบางส่วนเพื่อวัตถุประสงค์ในการที่จะยืดซีรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีนของการเปิดเผยที่ PEG30 หรือ PEG40 จะได้รับการแนะนำในสัตว์ / มนุษย์กับการกรองของไตปกติมากกว่าหมุดสั้นเพราะนั่นคือการกำจัดได้เร็วขึ้น ของ PEG 12 หรือ PEG20 อาจ จำกัด ประสิทธิภาพและระยะเวลาของการ PEG- คอนจูเกตง (PEGylated) ไลโปคาลินมิวทีนของการเปิดเผย ในการนี้การเปิดเผยในปัจจุบันให้เป็นแบบอย่างไลโปคาลินมิวทีนดังแสดงใน SEQ ID NO:. 30-32 ที่สามารถ PEG- คอนจูเกตง[00116] ศูนย์รวมในอีกไลโป คาลินมิวทีนของการเปิดเผยอาจจะหลอมรวมให้เป็นหนึ่งมากขึ้นหรือมอยอิตี้ที่สามารถมอบลักษณะใหม่กับฟิวชั่นเช่นเอนไซม์ที่มีผลผูกพันหรือแอฟฟินิตี้สำหรับโมเลกุลอื่น ๆ ตัวอย่างดังกล่าวเหมาะกับมอยอิตี้เป็นด่าง phosphatase, peroxidase มะรุม, กลูตาไธโอน-S-transferase ที่อัลบูมิน -binding โดเมนของโปรตีน G, โปรตีน, แอนติบอดี้ชิ้นส่วนย่อยของโดเมน oligomerization, ไลโปคาลิ นมิวทีนเหมือนกันหรือแตกต่างกันมีผลผูกพันเฉพาะเจาะจง (ซึ่งจะส่งผลในการก่อตัวของ "Duocalins" cf เลย Schlehuber เอสและ Skerra, A. (2001), Duocalins วิศวกรรมลิแกนด์ -binding โปรตีนที่มีความจำเพาะคู่ ที่ได้มาจากไลโปคาลินพับ. Biol. Chem. 382, 1335-1342) หรือสารพิษ. [00117] โดยเฉพาะอย่างยิ่งมันอาจจะเป็นไปได้ที่จะฟิวส์ไลโปคาลินมิวทีนของการเปิดเผยกับ เอนไซม์ที่ใช้งานแยกต่างหากตำแหน่งดังกล่าวว่าทั้ง "องค์ประกอบ" ของฟิวชั่นที่เกิดขึ้นอาจทำหน้าที่ร่วมกันในเป้าหมายการรักษาที่ได้รับ ตัวอย่างเช่นเมื่อหลอมรวมกันโดเมนที่มีผลผูกพันของไลโปคาลินมิวทีนสามารถแนบไปกับเป้าหมายที่ก่อให้เกิดโรคจึงทำให้โดเมนเอนไซม์ที่จะยกเลิกฟังก์ชั่นทางชีวภาพของเป้าหมาย. [00118] หากหนึ่งใน ดังกล่าวข้างต้นมอยอิตี้มีคอนจูเกตงกับไลโปคาลินนุนุมิวทีนของการเปิดเผย, ผันไปยังด้านห่วงโซ่กรดอะมิโนจะเป็นประโยชน์ โซ่ด้านกรดอะมิโนที่เหมาะสมอาจเกิดขึ้นตามธรรมชาติในลำดับของกรดอะมิโนไลโปคาลินนุนุหรืออาจจะถูกนำมาใช้โดยการก่อกลายพันธุ์ ในกรณีที่มีผลผูกพันตำแหน่งที่เหมาะสมเป็นที่รู้จักผ่านการก่อกลายพันธุ์ซึ่งเป็นหนึ่งในความเป็นไปได้คือการเปลี่ยนกรดอะมิโนที่ appropriateposition โดยซิสเทอีนเรซิดิวที่ หนึ่งในศูนย์รวมการกลายพันธุ์ดังกล่าวรวมถึงอย่างน้อยหนึ่งของที่นั่น 40 -> Cys, Glu 73 -> Cys, Arg 90 -> Cys, งูเห่า 95 -> Cys หรือ Glu 131 -> ทดแทน Cys ที่สร้างขึ้นใหม่ซิสเทอีนเรซิดิวที่ใด ๆ ของตำแหน่งเหล่านี้สามารถอยู่ในต่อไปนี้จะใช้ในการคอนจูเกตมิวทีนที่จะมอยอิตี้ยืดซีรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีน เช่น PEG หรือเปิดใช้งานอนุพันธ์ดังกล่าว. [00,119] ในศูนย์รวมอีกเพื่อที่จะให้เครือข่ายด้านกรดอะมิโนที่เหมาะสมสำหรับการ conjugating หนึ่งดังกล่าวข้างต้นมอยอิตี้กับมิวทีนของการกรดอะมิโนเทียมเปิดเผยอาจ ได้รับการแนะนำให้รู้จักกับการก่อกลายพันธุ์ โดยทั่วไปกรดอะมิโนเทียมดังกล่าวถูกออกแบบมาให้มีปฏิกิริยามากขึ้นและทำให้การเชื่อมต่อกันเพื่ออำนวยความสะดวกในการที่ต้องการมอยอิตี้ ตัวอย่างหนึ่งของกรดอะมิโนเทียมที่อาจจะได้รับการแนะนำผ่าน tRNA เทียม para-acetyl •ฟีนิลอะลานีน. [00,120] ในบางรุรุที่ไลโปคาลินมิวทีนตามการเปิดเผย อาจมีลำดับสัญญาณ ลำดับสัญญาณที่ N-ปลายทางของโพลีเปปไทด์ตรงนี้โพลีเปปไทด์ที่จะช่องโทรศัพท์มือถือที่เฉพาะเจาะจงเช่น periplasm ของเชื้อ E. coli หรือร่างแห endoplasmatic ของเซลล์ยูคาริโอ จำนวนมากของลำดับสัญญาณเป็นที่รู้จักกันในงานศิลปะ ลำดับสัญญาณเป็นตัวอย่างสำหรับการหลั่งโพลีเปปไทด์เข้า periplasm ของเชื้อ E. coli เป็นลำดับ OMPA สัญญาณ. [00121] ปัจจุบันการเปิดเผยนอกจากนี้ยังเกี่ยวข้องกับโมเลกุลของกรดนิวคลี (DNA และ RNA) ที่รวมถึงลำดับเบส การเขียนโปรแกรมสำหรับมิวทีนตามที่อธิบายไว้ในเอกสารฉบับนี้ เนื่องจากความเสื่อมของรหัสพันธุกรรมอนุญาตแทนของบางโคดอนโดยการอื่น ๆ โคดอน s ระบุกรดอะมิโนเดียวกันการเปิดเผยไม่ จำกัด โมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่เฉพาะเจาะจงเข้ารหัสมิวทีนของการเปิดเผย แต่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อัลบูมินโปรตีนดังกล่าวอาจเป็นอัลบูมินผูกโดเมนเช่น streptococcal โปรตีน g เมื่อย 148 ( g148 ) ใน embodiments อื่น ๆ , อัลบูมินโปรตีนอาจจะออกแบบอัลบูมินผูกโพลีเปปไทด์ . ตัวอย่างเช่นการอัลบูมินผูกโพลีเปปไทด์อาจมีลำดับกรดอะมิโนซึ่งประกอบรวมด้วย seq id : 85 การอัลบูมินผูกโพลีเปปไทด์ seq id ของหมายเลข 85 อาจในบางรุรุจึงมีเรซิดิวกรดอะมิโนเพิ่มเติม ( s ) ซึ่งมีแนบไปให้ปลายสิ้นสุด เช่น เช่นสามกรดอะมิโน KLN . ในการนี้ปัจจุบันมีการการเปิดเผยเป็นแบบอย่างคอนจูเกต D ไลโปคาลินมิวทีนซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นลำดับกรดอะมิโนตามที่กำหนดไว้ในข้อใดข้อหนึ่งไม่มี seq id : 83-84

[ 00110 ] ใน embodiments อื่น ๆอัลบูมินตัวเองค็อคเป็นชิ้นส่วนย่อยออกฤทธิ์ทางชีวภาพของอัลบูมินสามารถใช้เป็นพันธมิตรในการมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผย . คำว่า " อัลบูมิน " รวมถึงทั้งหมดอัลบูมินสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเช่นอัลบูมินซีรั่มมนุษย์ ( RSA ) ค็อคโค เซรั่มอัลบูมินค็อคหนูอัลบูมิน .การอัลบูมินค็อคชิ้นส่วนย่อยนั้นสามารถ recombinantly ผลิตตามที่อธิบายไว้ในสิทธิบัตรสหรัฐยุโรป 5728553 ค็อคจดสิทธิบัตรความดัน 0 330 451 และ BP 0 361 991 . ในฐานะตัวแทน เช่น อัลบูมินมนุษย์ recombinant ( recombumin ® ) กุ้ง เดลต้า จำกัด ( น็อตติงแฮมสหราชอาณาจักร ) สามารถคอนจูเกต D ค็อคผสมกับไลโปคาลินมิวทีนเพื่อขยายครึ่งชีวิตของมิวทีน

[ 00111 ] ถ้าอัลบูมิน - โปรตีนเป็นแอนติบอดีชิ้นส่วนย่อยอาจเป็นโดเมนแอนติบอดีโดเมนแอนติบอดีจะถูกออกแบบมาเพื่อให้การควบคุมที่แม่นยำกว่า คุณสมบัติทางชีวฟิสิกส์และ in vivo ครึ่งชีวิตเพื่อสร้างความปลอดภัยที่ดีที่สุดประสิทธิภาพและรายละเอียดผลิตภัณฑ์ โดเมนแอนติบอดีมีตัวอย่างพร้อมใช้งานในเชิงพาณิชย์จากโดแมนติสจำกัด ( เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร และ MA , USA ) .

[ 00112 ] ใช้ทรานสเฟอรินเป็นมอยอิตี้ขยายเซรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีนของการเปิดเผย , มิวทีนสามารถทางพันธุกรรมผสมกับ N ค็อค C เครื่องปลายทาง ค็อคทั้งคู่ ไม่ใช่อื่นที่แต่ละคนได้รับ . อื่นได้รับไม่มีครึ่งชีวิต 14-17 วัน และได้รับของโปรตีนจะเหมือนกับมีการขยายครึ่งชีวิตการได้รับผู้ให้บริการนอกจากนี้ยังมีการ biodistribution หมุนเวียนสูงและมีเสถียรภาพ เทคโนโลยีนี้จะพร้อมใช้งานในเชิงพาณิชย์จาก biorexis ( บริษัท biorexis เภสัชกรรม PA , USA ) ทราน เฟอร์รินมนุษย์ recombinant ( deltaferrin ™ ) สำหรับใช้เป็นโปรตีนโคลง / ครึ่งชีวิตนามสกุลคู่ยังสามารถใช้ได้ในเชิงพาณิชย์จากกุ้ง เดลต้า จำกัด ( น็อตติงแฮม , UK ) .

[ 00113 ] ถ้าเป็นเหล็กส่วนของอิมมูโนโกลบุลินจะใช้เพื่อยืดอายุ เซรั่มครึ่งชีวิตของมิวทีนของการเปิดเผย , synfusion ™เทคโนโลยีในเชิงพาณิชย์ จากปัจจุบัน Pharmaceuticals , Inc ( MA , USA ) , อาจจะใช้ใช้นี้เฟ - ฟิวชั่นเทคโนโลยีช่วยให้การสร้างอีกต่อไป ทำโครงการ และอาจตัวอย่างเช่นประกอบด้วยสองสำเนาของมิวทีนเชื่อมโยงกับเฟบริเวณของแอนติบอดีเพื่อปรับปรุงเภสัชจลนศาสตร์ การละลาย และประสิทธิภาพการผลิต .

[ 00114 ] แต่ทางเลือกอื่นที่จะยืดชีวิตของมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผยคือฟิวส์ยาวที่ไม่มีโครงสร้างยืดหยุ่น , Glycine รวยลำดับ ( ตัวอย่างเช่นโพลี - Glycine กับประมาณ 20 ถึง 80 ติดต่อกันไกลซีนเรซิดิว ) ไปหรือ c-terminus ของมิวทีนไลโปคาลินของการเปิดเผย .