these conditions, the enzyme activi

these conditions, the enzyme activity did not change significantly when the lipase was stored for 6 months, and Lipase GH1 retained 50% of its initial activity (9000 U per mL) after storage for one year. No significant difference in enzyme activity was observed when the pH of the broth was adjusted from 5.0 to 10.0 and the broth was stored at 4 ◦C for 6 months. The situation was different for storage at 4 ◦C for 1.5 years. Under this condition, a lower culture supernatant pH was correlated with reduced Lipase GH1 stability; the enzyme activity was reduced by 50% for storage at pH 10.0 but was reduced by 72% (to 5000 U per mL) for storage at pH 5.0.
Degradation caused by pH-mediated destabilization is highly dependent on the stability of the recombinant protein itself, which is usually increased by glycosylation and disulfide bond formation

[21]. Because Lipase GH1 is a glycosylated protein, we hypothesized

that glycosylation helps promote the enzyme stability. Serine and

aspartic proteases (both secreted by P. pastoris) are activated at

low pH values, and this fact may account for the pH dependence of

proteolytic activity [21].

Our findings indicate that Lipase GH1 should be stored under
alkaline conditions. The stability of this enzyme is greater under

alkaline than acidic conditions, providing a basis for long-term

preservation. In view of its high activity, stability, and broad pH

tolerance, Lipase GH1 has excellent potential for industrial appli-
cations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เงื่อนไข เอนไซม์ที่เปลี่ยนไม่มากเมื่อเอนไซม์ไลเปสถูกเก็บไว้ 6 เดือน และเอนไซม์ไลเปส GH1 เก็บ 50% ของกิจกรรมเริ่มต้นของ (9000 U ต่อมิลลิลิตร) หลังจากการเก็บ 1 ปี ไม่มีความแตกต่างในเอนไซม์พบว่า เมื่อปรับปรุงค่า pH ของน้ำซุปจาก 5.0 ถึง 10.0 และน้ำซุปที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 ◦C 6 เดือน สถานการณ์นี้สำหรับเก็บที่ 4 ◦C 1.5 ปี ภายใต้เงื่อนไขนี้ ค่า pH supernatant วัฒนธรรมต่ำสัมพันธ์กับเสถียรภาพลดเอนไซม์ไลเปส GH1 กิจกรรมของเอนไซม์ลดลง 50% สำหรับการจัดเก็บที่ pH 10.0 แต่ลดลง 72% (เป็น 5000 U ต่อมิลลิลิตร) สำหรับการจัดเก็บที่ pH 5.0สลายตัวที่เกิดจาก pH สื่อ destabilization มีสูงขึ้นกับเสถียรภาพของ recombinant โปรตีนตัวเอง ที่มักจะเพิ่มขึ้น โดยการก่อพันธะ glycosylation และซัลไฟด์[21] เนื่องจากเอนไซม์ไลเปส GH1 เป็นโปรตีน glycosylated เราตั้งสมมติฐานglycosylation ที่ช่วยส่งเสริมเสถียรภาพของเอนไซม์ รอบเส้นใยประสาท และแอสพารากินโปรตีเอส (ทั้งสองหลั่งจาก P. pastoris) จะใช้งานได้ที่ค่า pH ต่ำ และข้อเท็จจริงนี้อาจบัญชีสำหรับการพึ่งพาค่า pH ของกิจกรรมย่อยโปรตีน [21]ผลการวิจัยของเราแสดงว่า เอนไซม์ไลเปส GH1 ควรเก็บไว้ภายใต้สภาพด่าง ความเสถียรของเอนไซม์นี้เป็นมากขึ้นภายใต้อัลคาไลน์กว่าสภาพที่เป็นกรด ให้ข้อมูลพื้นฐานสำหรับระยะยาวการรักษา ในมุมมองของกิจกรรมสูง เสถียรภาพ และค่า pH ที่กว้างค่าเผื่อ GH1 เอนไซม์ไลเปสที่มีศักยภาพยอดเยี่ยมสำหรับอุตสาหกรรมพลิ-แคทไอออน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เงื่อนไขเหล่านี้กิจกรรมของเอนไซม์ไม่ได้เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเอนไซม์ไลเปสที่ถูกเก็บไว้เป็นเวลา 6 เดือนและเอนไซม์ไลเปส GH1 เก็บไว้ 50% ของกิจกรรมเริ่มต้น (9000 U ต่อมิลลิลิตร) หลังการเก็บรักษาเป็นเวลาหนึ่งปี ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการทำงานของเอนไซม์พบว่าเมื่อค่า pH ของน้ำซุปที่ถูกปรับ 5.0-10.0 และน้ำซุปที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 ◦Cเป็นเวลา 6 เดือน เป็นสถานการณ์ที่แตกต่างกันสำหรับการเก็บรักษาที่ 4 ◦C 1.5 ปี ภายใต้สภาพเช่นนี้ค่า pH ต่ำกว่าใสวัฒนธรรมความสัมพันธ์กับความมั่นคงลดลงเอนไซม์ไลเปส GH1; กิจกรรมของเอนไซม์ลดลง 50% สำหรับการจัดเก็บที่ pH 10.0 แต่ลดลง 72% (5000 U ต่อมิลลิลิตร) สำหรับการจัดเก็บที่ pH 5.0
การย่อยสลายเกิดจากการไม่มีเสถียรภาพค่า pH พึ่งจะขึ้นอยู่กับความมั่นคงของโปรตีนตัวเองซึ่งมักจะเพิ่มขึ้น glycosylation และพันธบัตรซัลไฟด์ก่อตัว

[21] เพราะเอนไซม์ไลเปส GH1 เป็นโปรตีน glycosylated เราตั้งสมมติฐาน

ว่า glycosylation ช่วยส่งเสริมความมั่นคงของเอนไซม์ ซีรีนและ

โปรตีเอส aspartic (ทั้งที่หลั่งมาจาก P. pastoris) จะเปิดใช้งานที่

ค่าพีเอชต่ำและความจริงนี้อาจบัญชีสำหรับการพึ่งพาค่า pH ของ

กิจกรรมโปรตีเอส [21]

ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ไลเปส GH1 ควรเก็บไว้ภายใต้
เงื่อนไขที่อัลคาไลน์ ความมั่นคงของเอนไซม์นี้เป็นมากขึ้นภายใต้

อัลคาไลน์กว่าสภาพที่เป็นกรดให้พื้นฐานสำหรับระยะยาว

การเก็บรักษา ในมุมมองของกิจกรรมของสูงมีความมั่นคงและมีค่า pH กว้าง

อดทนเอนไซม์ไลเปส GH1 มีศักยภาพที่ยอดเยี่ยมสำหรับขบวนการผลิตในอุตสาหกรรม
ไพเพอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เงื่อนไขเหล่านี้ กิจกรรมของเอนไซม์ไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อพบไว้ 6 เดือน และมีการ gh1 50% ของกิจกรรมในเบื้องต้น ( 9000 U ต่อมิลลิลิตร ) หลังจากเก็บรักษาเป็นเวลาหนึ่งปี ไม่มีความแตกต่างในกิจกรรมของเอนไซม์พบว่าเมื่อ pH ของน้ำซุปก็ปรับจาก 5.0 และ 10.0 ซุปถูกเก็บไว้ที่ 4 ◦นาน 6 เดือน สถานการณ์ที่แตกต่างกันสำหรับเก็บที่ 4 ◦ C 1.5 ปี ภายใต้เงื่อนไขนี้ ต่อวัฒนธรรมน่านมีความสัมพันธ์กับความมั่นคงของเอนไซม์ลดลง gh1 ; กิจกรรมเอนไซม์ลดลง 50% สำหรับกระเป๋าที่พีเอช 10.0 แต่ลดลง 72% ( , u / ml ) สำหรับกระเป๋าที่ pH 5.0 .การย่อยสลายเกิดจาก pH โดย destabilization เป็นอย่างมากขึ้นอยู่กับเสถียรภาพของรีคอมบิแนนท์โปรตีนนั่นเอง ซึ่งโดยปกติจะเพิ่มขึ้นและการเกิดพันธะไดซัลไฟด์ glycosylation[ 21 ] เพราะเอนไซม์เป็นโปรตีน gh1 อื่น เราตั้งสมมุติฐานที่ช่วยส่งเสริมการ glycosylation เอนไซม์มีเสถียรภาพ เซรีนและเสียทาง ( ทั้งหลั่งโดย pastoris ) จะเปิดใช้งานที่ค่า pH ต่ำ และความเป็นจริงนี้อาจบัญชีสำหรับการพึ่งพาของอกิจกรรมจำเพาะ [ 21 ]การค้นพบของเราบ่งชี้ว่า ไลเปส gh1 ควรจะเก็บไว้ภายใต้ภาวะเป็นด่าง เสถียรภาพของเอนไซม์นี้เป็นมากขึ้นภายใต้ด่างมากกว่า มีสภาพเป็นกรด ให้พื้นฐานสำหรับระยะยาวการเก็บรักษา ในมุมมองของกิจกรรมสูง มีเสถียรภาพ และกว้างอความอดทน , ไลเปส gh1 มีศักยภาพที่ดีสำหรับใช้ในอุตสาหกรรม -ไอออน .