- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
condition (pH 9.96), sulphite (pKa1
condition (pH 9.96), sulphite (pKa1 = 1.89 and pKa2 = 7.20) is completely
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
0/5000
condition (pH 9.96), sulphite (pKa1 = 1.89 and pKa2 = 7.20) is completely
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
การแปล กรุณารอสักครู่..
condition (pH 9.96), sulphite (pKa1 = 1.89 and pKa2 = 7.20) is completely
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
dissociated as a SO32. Similarly, phosphate (pKa2 = 2.12,
pKa2 = 7.21 and pKa3 = 12.32) is almost-totally dissociated as a
HPO42.
3.2. Effect of acetone concentration in the mobile phase
The separation of sulphite and sulphate was difficult when
using a mixture of sodium carbonate and sodium bicarbonate as
the mobile phase. Therefore, acetone was added to the mobile
phase for rapid elution of the hydrophobic ions. The effect of acetone
concentration on the retention behaviour was examined in
the concentration range of 0–7.5 (v/v)% with the concentration of
sodium carbonate and sodium bicarbonate fixed at 0.8 mM and
6.0 mM, respectively. The relationship between the retention time
of analyte and the concentration of acetone is shown in Fig. 2.
Although the retention time of sulphite decreased with an increase
in the acetone concentration, the retention times of other anionic
species were approximately constant. In the cases where the concentration
of acetone was lower than or equal to 2.5 (v/v)%, the
separation of sulphite and sulphate was difficult. On the other
hand, an increase in pressure on the separation column was
observed at 7.5 (v/v)%. Because the maximum allowable concentration
of organic solvent for the separation column is 10 (v/v)%, the
optimum concentration of acetone was determined to be 5.0 (v/
v)%. Meanwhile, acetone concentration has an insignificant effect
on the relative standard deviation (R.S.D.) of retention time of sulphite
(R.S.D. value is 0.18% under the optimum concentration).
3.3. Effect of column temperature and flow rate of mobile phase
By adopting the optimal composition of mobile phase as determined
previously, the effect of column temperature on the retention
behaviour was examined for the temperature range of 25–
45 C. Generally speaking, separation equilibrium becomes prompt
when the column temperature rises. Therefore, high temperature
results in shorter retention time. Although the retention time of
monovalent ions decreased with increasing temperature, the retention
time of divalent ions showed opposite tendency under the
same condition. A similar tendency is shown in the previously
reported (Yoshikawa, Okamura, Inokuchi, & Sakuragawa, 2007;
Yoshikawa et al., 2009). In addition, the peaks due to sulphite and
phosphate were close to each other. Considering the resolution
and retention time for analysing each analyte, 30 C was chosen
as the optimal column temperature for the analysis.
Moreover, the effect of flow rate of mobile phase on the retention
behaviour was examined by adjusting the flow rate from 0.8 to
1.2 mL/min. The optimum flow rate was determined to be 1.0 mL/
min by evaluating the analytical resolution and retention time for
each analyte.
3.4. Temporal stability of the sulphite
Because of the instability of sulphite and easy oxidation to sulphate,
1.0 (w/v)% triethanolamine (TEA) was added to a standard
sulphite solution as a stabilizer (Tokuda, Hirai, Fukui, & Kanno,
1978). The solution was preserved in a light-resistant container
under refrigerated conditions. To confirm the effect of the stabilizer,
the refrigerator-preserved solutions with or without the
addition of TEA were subject to periodic analysis for evaluating
the effect of standing time on sulphite. The relationship between
the standing time and the residual rate of the sulphite is shown
in Fig. 3, where the residual rate was calculated by using the following
equation:
Residual rate ½%¼
Peak height of the sulphite
Total peak height of the sulphite and sulphate
100
ð1Þ
As shown in Fig. 3, the residual rate of sulphite in the solution
with the addition of TEA was approximately constant for four
weeks. In contrast, the sulphite residual rate decreased to around
40% in the standard solution without TEA. Therefore, the standard
solution with added TEA demonstrated good stability and usability
over one month under refrigerated conditions.
3.5. Chromatogram of sulphite and several inorganic anions
A typical chromatogram of sulphite and several inorganic
anions analysed under the optimum operating conditions
described in Section 2.3 is shown in Fig. 4. Each species was
detected within a period of 25 min. The separation of sulphite
and other inorganic anions present in food samples was
satisfactory.
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10
15
20
25
30
Retention time / min
Concentration of Acetone / %
Fig. 2. Effect of the acetone concentration on the retention time. Ions (each 10 mg/
L): s, fluoride; d, chloride; 4 nitrite; N, nitrate; h, sulphite; j, phosphate; },
sulphate and , thiosulphate; operating conditions: separation column, Shodex IC
SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase, 0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM
NaHCO3, 0–7.5 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C; flow rate of mobile
phase, 1.0 mL/min.
0
20
40
60
80
100
0 7 14 21 28 35
Standing time / days
Residual rate / %
Fig. 3. Effect of the TEA on the stability of sulphite. Standard solution of the 10 mg/L
of sulphite: s, without TEA; d, 1.0 (w/v)% TEA added; operating conditions:
separation column, Shodex IC SI-90 4E with 4.0 mm i.d. 250 mm; mobile phase,
0.8 mM Na2CO3, 6.0 mM NaHCO3, 5.0 (v/v)% acetone; column temperature, 30 C;
flow rate of mobile phase, 1.0 mL/min
การแปล กรุณารอสักครู่..
เงื่อนไข ( pH 9.96 ) ซัลไฟท์ ( pka1 = 1.89 และ pka2 = 7.20 ) สมบูรณ์
ทางใจเป็น so32 . ในทำนองเดียวกัน ฟอสเฟต ( pka2 = 2.12 ,
pka2 และ = 7.21 pka3 = 12.32 ) เกือบทั้งหมดเป็น hpo42 ทางใจ
.
2 . ผลของอะซีโตนความเข้มข้นใน
เฟสเคลื่อนที่ และซัลเฟต คือแยกซัลไฟท์ยาก เมื่อ
โดยใช้ส่วนผสมของโซเดียม คาร์บอเนต และโซเดียมไบคาร์บอเนตเป็น
ระยะเคลื่อนที่ ดังนั้น อะซิโตน คือเพิ่มระยะเคลื่อนที่
สำหรับใช้อย่างรวดเร็วของไอออน ) . ผลของความเข้มข้นในการคงอยู่ของอะซีโตน
ถูกตรวจสอบในช่วงความเข้มข้น 0 – 7.5 ( v / v )
% ความเข้มข้นของโซเดียม คาร์บอเนตและโซเดียมไบคาร์บอเนตที่ 0.8 มม. และ
6.0 มิลลิเมตร ตามลำดับ ความสัมพันธ์ระหว่างความคงทนเวลา
ของครูและความเข้มข้นของอะซิโตนจะแสดงในรูปที่ 2 .
ถึงแม้ว่า retention time ของซัลไฟท์เพิ่มสูงขึ้น
ในอะซีโตนความเข้มข้น เวลากักชนิดประจุลบ
อื่นๆประมาณคงที่ ใน กรณี ที่ความเข้มข้น
อะซิโตนต่ำกว่าหรือเท่ากับ 2.5 ( v / v ) %
: การแยกและซัลไฟท์ได้ยาก บนมืออื่น ๆ
,การเพิ่มความดันในการแยกคอลัมน์
สังเกตที่ 7.5 ( v / v ) % เพราะความเข้มข้นสูงสุดที่
ของตัวทำละลายอินทรีย์สำหรับการแยกคอลัมน์ 10 ( v / v ) %
ความเข้มข้นที่เหมาะสมของอะซิโตน ตั้งใจที่จะเป็น 5.0 ( V /
v ) % ขณะเดียวกัน อะซีโตนความเข้มข้นได้เล็กน้อย ผล
ในส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ ( r.s.d. )
( r.s.d. retention time ของซัลไฟท์ค่าเป็น 0.18 % ตามความเข้มข้นที่เหมาะสม ) .
3 . ผลของอุณหภูมิของคอลัมน์และอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ด้วยการใช้องค์ประกอบที่เหมาะสมของ
เฟสเคลื่อนที่ตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ ผลของอุณหภูมิในการเก็บรักษา
คอลัมน์พฤติกรรมถูกตรวจสอบสำหรับช่วงอุณหภูมิ 25 – 45
C โดยทั่วไปการพูด , สมดุลแยกเป็นคอลัมน์พร้อม
เมื่ออุณหภูมิสูงขึ้นดังนั้น การรักษาอุณหภูมิ
สูงในเวลาสั้น ถึงแม้ว่าในเวลากัด
ไอออนเพิ่มขึ้น เมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษา
เวลาของไอออนขนาดพบแนวโน้มตรงข้าม
ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน แนวโน้มที่คล้ายกันจะถูกแสดงในรายงานก่อนหน้านี้
( โยชิคาว่า โอคามูระ อิโนคูจิ & sakuragawa , 2007 ;
โยชิ et al . , 2009 ) นอกจากนี้ยอดเนื่องจากซัลไฟท์
ฟอสเฟตและอยู่ใกล้กับแต่ละอื่น ๆ พิจารณาละเอียด
และความคงทนเวลาวิเคราะห์แต่ละครู 30 C เลือก
เมื่ออุณหภูมิคอลัมน์ที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ .
ผลกระทบของอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ในการเก็บรักษา
พฤติกรรมถูกตรวจสอบโดยปรับอัตราการไหลจาก 0.8
1.2 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลสูงสุดถูกกำหนด เป็น 10 มล. /
มิน โดยการประเมินความละเอียดวิเคราะห์และความคงทนเวลาแต่ละครู
.
3.4 . รักษาเสถียรภาพของซัลไฟท์
เนื่องจากความไม่แน่นอนของซัลไฟท์ และง่ายต่อการดาวน์โหลดซัลเฟต
( w / v ) % ไตรชา ) คือการเพิ่มโซลูชั่นซัลไฟท์มาตรฐาน
เป็นโคลง ( คุณโทคุดะ ฮิราอิ ฟุคุ&คันโนะ
, , 1978 ) โซลูชั่นที่ถูกเก็บรักษาไว้ในภาชนะที่ป้องกันแสง
และภายใต้เงื่อนไข เพื่อยืนยันผลของ Stabilizer
ตู้เย็นรักษาโซลูชั่นที่มีหรือไม่มี
นอกจากชาเป็นเรื่องการวิเคราะห์แบบประเมิน
ผลของเวลายืนบนซัลไฟท์ . ความสัมพันธ์ระหว่าง
เวลายืนและอัตราการตกค้างของซัลไฟท์ แสดงในรูปที่ 3
ที่อัตราการตกค้างโดยใช้ต่อไปนี้
สมการ :
3
% อัตรา½ ¼ยอดเขาความสูงของซัลไฟท์
รวมสูงสุดและความสูงของซัลไฟท์ 100
ซัลเฟตð 1 Þ
ดังแสดงในรูปที่ 3 ที่เหลือคะแนนของซัลไฟต์ในสารละลาย
ด้วยนอกเหนือจากชาประมาณคงที่ 4
สัปดาห์ ในทางตรงกันข้าม , ซัลไฟท์ตกค้างลดลงประมาณ
40% ในการแก้ปัญหามาตรฐานโดยไม่ต้องชา ดังนั้น มาตรฐาน
โซลูชั่นเพิ่มชาแสดงเสถียรภาพที่ดีและการใช้งานมากกว่าหนึ่งเดือนภายใต้เงื่อนไขและ
.
3.5 . chromatogram ซัลไฟท์ และหลายอนินทรีย์แอน
เป็น chromatogram ตามแบบฉบับของซัลไฟท์ และหลายอนินทรีย์
แอนวิเคราะห์ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม
อธิบายไว้ในมาตรา 2.3 จะแสดงในรูปที่ 4 แต่ละชนิดถูก
ตรวจพบในระยะเวลา 25 นาทีการแยกแอนไอออนอนินทรีย์และซัลไฟต์
ของขวัญอื่น ในตัวอย่างอาหาร
)
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10 15 20 25 30
กัก
เวลา / นาทีความเข้มข้นของอะซีโตน /
%
รูปที่ 2 ผลของความเข้มข้นในอะซีโตนในเวลา ไอออน ( แต่ละ 10 mg / l :
) s , ฟลูออไรด์คลอไรด์ ; D 4 N , ไนไตรท์ ; ไนเตรท ; H , ซัลไฟท์ ; J , ฟอสเฟต ; } ,
: ไธโอซัลเฟต ; และ , เงื่อนไขการใช้งาน :คอลัมน์แยก shodex IC
si-90 จอฟ้ากับมิล 4.0 ระบุ 250 มม. ; เฟสเคลื่อนที่ , Na2CO3 0.8 มม. , NaHCO3 6.0 mm
0 – 7.5 ( v / v ) % ) ; อุณหภูมิของคอลัมน์ 30 C ; อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่
1.0 มิลลิลิตร / นาที
0
20
40 60 80 100
0 7 14 21 28 35 / วัน
เวลายืนอัตราที่เหลือ / %
รูปที่ 3 ผลของชาเขียวต่อเสถียรภาพของซัลไฟท์ . โซลูชั่นมาตรฐานของ 10 mg / l
ของซัลไฟท์ : s , โดยไม่ต้องชา ; D 10 ( w / v ) % ชาเพิ่มเงื่อนไข : คอลัมน์
แยก shodex IC si-90 จอฟ้ากับมิล 4.0 ระบุ 250 มม. ; มือถือเฟส
Na2CO3 0.8 มม. , NaHCO3 6.0 มม. , 5.0 ( v / v ) % ) ; อุณหภูมิของคอลัมน์ 30 C ;
อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ , 1.0 มล. / นาที
ทางใจเป็น so32 . ในทำนองเดียวกัน ฟอสเฟต ( pka2 = 2.12 ,
pka2 และ = 7.21 pka3 = 12.32 ) เกือบทั้งหมดเป็น hpo42 ทางใจ
.
2 . ผลของอะซีโตนความเข้มข้นใน
เฟสเคลื่อนที่ และซัลเฟต คือแยกซัลไฟท์ยาก เมื่อ
โดยใช้ส่วนผสมของโซเดียม คาร์บอเนต และโซเดียมไบคาร์บอเนตเป็น
ระยะเคลื่อนที่ ดังนั้น อะซิโตน คือเพิ่มระยะเคลื่อนที่
สำหรับใช้อย่างรวดเร็วของไอออน ) . ผลของความเข้มข้นในการคงอยู่ของอะซีโตน
ถูกตรวจสอบในช่วงความเข้มข้น 0 – 7.5 ( v / v )
% ความเข้มข้นของโซเดียม คาร์บอเนตและโซเดียมไบคาร์บอเนตที่ 0.8 มม. และ
6.0 มิลลิเมตร ตามลำดับ ความสัมพันธ์ระหว่างความคงทนเวลา
ของครูและความเข้มข้นของอะซิโตนจะแสดงในรูปที่ 2 .
ถึงแม้ว่า retention time ของซัลไฟท์เพิ่มสูงขึ้น
ในอะซีโตนความเข้มข้น เวลากักชนิดประจุลบ
อื่นๆประมาณคงที่ ใน กรณี ที่ความเข้มข้น
อะซิโตนต่ำกว่าหรือเท่ากับ 2.5 ( v / v ) %
: การแยกและซัลไฟท์ได้ยาก บนมืออื่น ๆ
,การเพิ่มความดันในการแยกคอลัมน์
สังเกตที่ 7.5 ( v / v ) % เพราะความเข้มข้นสูงสุดที่
ของตัวทำละลายอินทรีย์สำหรับการแยกคอลัมน์ 10 ( v / v ) %
ความเข้มข้นที่เหมาะสมของอะซิโตน ตั้งใจที่จะเป็น 5.0 ( V /
v ) % ขณะเดียวกัน อะซีโตนความเข้มข้นได้เล็กน้อย ผล
ในส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ ( r.s.d. )
( r.s.d. retention time ของซัลไฟท์ค่าเป็น 0.18 % ตามความเข้มข้นที่เหมาะสม ) .
3 . ผลของอุณหภูมิของคอลัมน์และอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ด้วยการใช้องค์ประกอบที่เหมาะสมของ
เฟสเคลื่อนที่ตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ ผลของอุณหภูมิในการเก็บรักษา
คอลัมน์พฤติกรรมถูกตรวจสอบสำหรับช่วงอุณหภูมิ 25 – 45
C โดยทั่วไปการพูด , สมดุลแยกเป็นคอลัมน์พร้อม
เมื่ออุณหภูมิสูงขึ้นดังนั้น การรักษาอุณหภูมิ
สูงในเวลาสั้น ถึงแม้ว่าในเวลากัด
ไอออนเพิ่มขึ้น เมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษา
เวลาของไอออนขนาดพบแนวโน้มตรงข้าม
ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน แนวโน้มที่คล้ายกันจะถูกแสดงในรายงานก่อนหน้านี้
( โยชิคาว่า โอคามูระ อิโนคูจิ & sakuragawa , 2007 ;
โยชิ et al . , 2009 ) นอกจากนี้ยอดเนื่องจากซัลไฟท์
ฟอสเฟตและอยู่ใกล้กับแต่ละอื่น ๆ พิจารณาละเอียด
และความคงทนเวลาวิเคราะห์แต่ละครู 30 C เลือก
เมื่ออุณหภูมิคอลัมน์ที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ .
ผลกระทบของอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ในการเก็บรักษา
พฤติกรรมถูกตรวจสอบโดยปรับอัตราการไหลจาก 0.8
1.2 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลสูงสุดถูกกำหนด เป็น 10 มล. /
มิน โดยการประเมินความละเอียดวิเคราะห์และความคงทนเวลาแต่ละครู
.
3.4 . รักษาเสถียรภาพของซัลไฟท์
เนื่องจากความไม่แน่นอนของซัลไฟท์ และง่ายต่อการดาวน์โหลดซัลเฟต
( w / v ) % ไตรชา ) คือการเพิ่มโซลูชั่นซัลไฟท์มาตรฐาน
เป็นโคลง ( คุณโทคุดะ ฮิราอิ ฟุคุ&คันโนะ
, , 1978 ) โซลูชั่นที่ถูกเก็บรักษาไว้ในภาชนะที่ป้องกันแสง
และภายใต้เงื่อนไข เพื่อยืนยันผลของ Stabilizer
ตู้เย็นรักษาโซลูชั่นที่มีหรือไม่มี
นอกจากชาเป็นเรื่องการวิเคราะห์แบบประเมิน
ผลของเวลายืนบนซัลไฟท์ . ความสัมพันธ์ระหว่าง
เวลายืนและอัตราการตกค้างของซัลไฟท์ แสดงในรูปที่ 3
ที่อัตราการตกค้างโดยใช้ต่อไปนี้
สมการ :
3
% อัตรา½ ¼ยอดเขาความสูงของซัลไฟท์
รวมสูงสุดและความสูงของซัลไฟท์ 100
ซัลเฟตð 1 Þ
ดังแสดงในรูปที่ 3 ที่เหลือคะแนนของซัลไฟต์ในสารละลาย
ด้วยนอกเหนือจากชาประมาณคงที่ 4
สัปดาห์ ในทางตรงกันข้าม , ซัลไฟท์ตกค้างลดลงประมาณ
40% ในการแก้ปัญหามาตรฐานโดยไม่ต้องชา ดังนั้น มาตรฐาน
โซลูชั่นเพิ่มชาแสดงเสถียรภาพที่ดีและการใช้งานมากกว่าหนึ่งเดือนภายใต้เงื่อนไขและ
.
3.5 . chromatogram ซัลไฟท์ และหลายอนินทรีย์แอน
เป็น chromatogram ตามแบบฉบับของซัลไฟท์ และหลายอนินทรีย์
แอนวิเคราะห์ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม
อธิบายไว้ในมาตรา 2.3 จะแสดงในรูปที่ 4 แต่ละชนิดถูก
ตรวจพบในระยะเวลา 25 นาทีการแยกแอนไอออนอนินทรีย์และซัลไฟต์
ของขวัญอื่น ในตัวอย่างอาหาร
)
0 2.5 5.0 7.5
0
5
10 15 20 25 30
กัก
เวลา / นาทีความเข้มข้นของอะซีโตน /
%
รูปที่ 2 ผลของความเข้มข้นในอะซีโตนในเวลา ไอออน ( แต่ละ 10 mg / l :
) s , ฟลูออไรด์คลอไรด์ ; D 4 N , ไนไตรท์ ; ไนเตรท ; H , ซัลไฟท์ ; J , ฟอสเฟต ; } ,
: ไธโอซัลเฟต ; และ , เงื่อนไขการใช้งาน :คอลัมน์แยก shodex IC
si-90 จอฟ้ากับมิล 4.0 ระบุ 250 มม. ; เฟสเคลื่อนที่ , Na2CO3 0.8 มม. , NaHCO3 6.0 mm
0 – 7.5 ( v / v ) % ) ; อุณหภูมิของคอลัมน์ 30 C ; อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่
1.0 มิลลิลิตร / นาที
0
20
40 60 80 100
0 7 14 21 28 35 / วัน
เวลายืนอัตราที่เหลือ / %
รูปที่ 3 ผลของชาเขียวต่อเสถียรภาพของซัลไฟท์ . โซลูชั่นมาตรฐานของ 10 mg / l
ของซัลไฟท์ : s , โดยไม่ต้องชา ; D 10 ( w / v ) % ชาเพิ่มเงื่อนไข : คอลัมน์
แยก shodex IC si-90 จอฟ้ากับมิล 4.0 ระบุ 250 มม. ; มือถือเฟส
Na2CO3 0.8 มม. , NaHCO3 6.0 มม. , 5.0 ( v / v ) % ) ; อุณหภูมิของคอลัมน์ 30 C ;
อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ , 1.0 มล. / นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- อย่าพาเพื่อนมาบ่อยเกินไป
- สุรินทร์ลักลอบทิ้งอุปกรณ์การแพทย์
- Taking
- I can hang two pictures in his stop
- I think somebody will be honest with me
- ไปชมพร้อมๆกันเลยค่ะ
- voluntarily quits a job
- So we should save our the environment. A
- ได้ทราบระบบการศึกษาของอเมริกาต่างกับแระเ
- I send it
- Dribbling
- การส่งข้อมมูลโดยที่ผู้รับสามารถทำการประม
- raise
- Group IIA: The Alkaline Earth MetalsThe
- บอกก็รู้สิ
- We invite you to watch it.
- I think I should be careful with you
- by a windmill simulator in order
- fungal
- Okay, so I am officially jealous of the
- I painted the sky in the park last week
- the test constructor is
- Please Clarification for me.
- การเตะตะกร้อเป็นการเล่นที่ผู้เล่นได้ออกก
