Small RNA samples were sequenced by

Small RNA samples were sequenced by Beijing Genomics Institute by using the high throughput Illumina technology. Briefly, small RNAs with 16–30 nt in length were first separated from the total RNA by size fractionation with 15 % Tris/Borate/EDTA urea polyacrylamide gel (TBU).
The isolated sRNAs were then ligated to 50 adaptor (50 UCAGAGUUCUACAGUCCGACGAUC) using T4 RNA ligase (Promega, Madison, WI, USA) in the presence of RNase Out (Invitrogen, Shanghai, China) overnight at 4 C according to the manufacturer’s instructions. After selecting the ligated products by size fractionation, a 30 adaptor (50 UCGUAUGCCGUCUUCUGCUUGUidT) was ligated to the sRNAs following the same procedure as the ligation of the 50 adaptor. Finally, the ligated RNAs were size fractionated on a 10 % TBU and the 64–78 nt RNAs were excised. The excised sRNAs were then purified from the gel and precipitated as described above followed by resuspension in 5.0
lL DEPC treated water.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่าง RNA ขนาดเล็กเรียงลำดับตาม สถาบัน Genomics ปักกิ่ง โดยใช้อัตราความเร็วสูงเทคโนโลยี Illumina สั้น ๆ RNAs เล็กกับ nt 16 – 30 ความยาวได้ก่อนแยกจาก RNA รวม โดยแยกขนาดด้วย 15% ทริ/Borate/EDTA ผสม polyacrylamide เจล (TBU)SRNAs แยกได้แล้วควบ 50 อะแดปเตอร์ (50 UCAGAGUUCUACAGUCCGACGAUC) ใช้ T4 RNA ligase (Promega เมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา) ใน RNase ออก (Invitrogen เซี่ยงไฮ้ จีน) ค้างคืนที่ 4 C ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจากเลือกผลิตภัณฑ์ควบโดยแยกขนาด อะแดปเตอร์ 30 (50 UCGUAUGCCGUCUUCUGCUUGUidT) ถูกควบกับ sRNAs ตามขั้นตอนเดียวเป็น ligation ของอะแด็ปเตอร์ 50 ในที่สุด RNAs ควบได้ขนาดแบ่ง 10% TBU และ RNAs nt 64-78 มีสรรพสามิต SRNAs สรรพสามิตที่บริสุทธิ์จากเจ แล้วตกตะกอนตามที่อธิบายไว้ข้างต้นตาม ด้วย resuspension ตะกอนใน 5.0 lL DEPC ถือน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่าง RNA ขนาดเล็กมีลำดับขั้นตอนโดยฟังก์ชั่นปักกิ่งสถาบันโดยใช้การประเมินผลเทคโนโลยี Illumina สั้น ๆ , RNAs ขนาดเล็กที่มี 16-30 NT ยาวถูกแยกแรกจาก RNA โดยรวมขนาดแยกกับ 15% ทริส / บอเรต / EDTA ยูเรียเจลอะคริเลต (TBU).
sRNAs บางแห่งถูกผูกแล้วถึง 50 อะแดปเตอร์ (50 UCAGAGUUCUACAGUCCGACGAUC) โดยใช้ T4 อาร์เอ็นเอลิกาเซ (Promega, Madison, WI, USA) ในการปรากฏตัวของ RNase ออก (Invitrogen, เซี่ยงไฮ้, จีน) ค้างคืนที่ 4 C ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจากที่เลือกผลิตภัณฑ์ ligated ตามขนาดแยก 30 อะแดปเตอร์ (50 UCGUAUGCCGUCUUCUGCUUGUidT) คือการผูกกับ sRNAs ต่อไปตามขั้นตอนที่ ligation ของอะแดปเตอร์ 50 สุดท้าย RNAs ligated ถูกขนาด fractionated บน TBU 10% และ 64-78 NT RNAs ถูกตัดทิ้ง sRNAs พอบริสุทธิ์แล้วจากเจลและตกตะกอนตามที่อธิบายไว้ข้างต้นตาม resuspension ใน 5.0
LL DEPC รับการรักษาน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่าง RNA ขนาดเล็กนี้โดยปักกิ่ง Genomics สถาบันโดยใช้สูง throughput Illumina เทคโนโลยี สั้น ๆ , RNAs ขนาดเล็กที่มีความยาว 16 – 30 NT ถูกแยกออกจากผลรวม RNA โดยการแยกขนาด 15 % โดย / บอเรต / EDTA ยูเรีย polyacrylamide gel ( tbu )แยก srnas แล้วผูกถึง 50 เสียง ( 50 ucagaguucuacaguccgacgauc ) ใช้ T4 DNA ไลเกส ( promega เมดิสัน , WI , USA ) ในการแสดงตนของเลส ( จีน Invitrogen , Shanghai ) ค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียส ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจากเลือกผูกผลิตภัณฑ์โดยการแยกขนาด 30 อะแดปเตอร์ ( 50 ucguaugccgucuucugcuuguidt ) ถูกผูกกับ srnas ทำตามขั้นตอนเดียวกับ Ligation ของ 50 อะแดปเตอร์ ในที่สุด ผูก RNAs ไซส์พบใน tbu 10% และ 64 – 78 NT RNAs ถูกเอาออก การตัด srnas จึงบริสุทธิ์จากเจลและตกตะกอนตามที่อธิบายไว้ข้างบน ตามด้วย resuspension ใน 5.0จะ depc รักษาน้ำ