To test if cardiolipin is necessary

To test if cardiolipin is necessary to localize MurG to the forespore, we directly added purified cardiolipin to the strain with deleted cardiolipin synthesis genes (JDB2238). At T3 after initiation of sporulation, when MurG-YFP signal is first detected, a final concentration of 30 mM purified cardiolipin was added to sporulating cultures. We compared at different time points the localization pattern of MurG-YFP in the cardiolipin-null strain, wild type (JDB1689) and cardiolipin-null strain with added cardiolipin. Addition of cardiolipin to the cardiolipin-null strain rescues the main localization of MurG-YFP to the spore (Fig. 4C, S6). At its maximum, the spore to mother cell fluorescence ratio is 2.43 _ .18 for wild type cells (JDB1689), 1.59 _ .14 for the mutant strain (JDB2238) and 2.16 _ .18 for the mutant strain with added cardiolipin (Fig. 4D). Thus, images and quantification of the localization demonstrate that cardiolipin is necessary to localize MurG-YFP to the forespore and restore its wild type distribution.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อทดสอบว่าจำเป็นต้องแปล MurG forespore cardiolipin เราโดยตรงเพิ่ม cardiolipin บริสุทธิ์สายพันธุ์ด้วย cardiolipin ลบสังเคราะห์ยีน (JDB2238) ที่ T3 หลังคว้า sporulation เมื่อก่อนมีการตรวจพบสัญญาณ MurG YFP ความเข้มข้นสุดท้ายของ cardiolipin 30 มม.ที่บริสุทธิ์ถูกเพิ่มเพื่อวัฒนธรรม sporulating เราเปรียบเทียบ ณจุดเวลาต่าง ๆ รูปแบบแปลของ MurG-YFP ต้องใช้ cardiolipin null ไวลด์ไทป์ (JDB1689) และต้องใช้ cardiolipin null ด้วย cardiolipin เพิ่ม เพิ่ม cardiolipin โหม cardiolipin null rescues แปลหลักของ MurG-YFP เป็นสปอร์ (Fig. 4C, S6) ที่สูงสุด สปอร์ต่อเซลล์แม่ fluorescence คือ 2.43 _.18 ป่าชนิดเซลล์ (JDB1689), 1.59 _.14 สำหรับสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ (JDB2238) และ 2.16 _.18 สำหรับสายพันธุ์กลายพันธุ์ด้วย cardiolipin เพิ่ม (Fig. โตโยต้า) ดังนั้น ภาพและนับการ localization สาธิต cardiolipin ที่จำ การแปล MurG YFP forespore การกระจายของชนิดป่าเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อทดสอบว่า cardiolipin มีความจำเป็นต้อง จำกัด วง Murg เพื่อ forespore เราโดยตรงเพิ่ม cardiolipin บริสุทธิ์สายพันธุ์ที่มียีนสังเคราะห์ลบ cardiolipin (JDB2238) ที่ T3 หลังจากที่เริ่มต้นของการสร้างสปอร์เมื่อสัญญาณ Murg-YFP มีการตรวจพบครั้งแรกที่ความเข้มข้นสุดท้ายของวันที่ 30 มิลลิบริสุทธิ์ cardiolipin ถูกบันทึกอยู่ในวัฒนธรรม sporulating เราเมื่อเทียบกับที่จุดเวลาที่แตกต่างกันรูปแบบการแปลของ Murg-YFP ในสายพันธุ์ cardiolipin โมฆะชนิดป่า (JDB1689) และความเครียด cardiolipin โมฆะด้วย cardiolipin เพิ่ม นอกเหนือจาก cardiolipin ไปช่วยความเครียด cardiolipin โมฆะท้องถิ่นหลักของ Murg-YFP ที่จะสร้างสปอร์ (รูป. 4C, S6) ที่สูงสุดของสปอร์กับแม่ของอัตราส่วนการเรืองแสงของเซลล์คือ 2.43 _ 0.18 สำหรับเซลล์ชนิดป่า (JDB1689) 1.59 0.14 _ สำหรับสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ (JDB2238) และ 2.16 _ 0.18 สำหรับสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ที่มี cardiolipin เพิ่ม (รูปที่ 4D) ดังนั้นภาพและปริมาณของท้องถิ่นแสดงให้เห็นว่า cardiolipin มีความจำเป็นต้อง จำกัด วง Murg-YFP เพื่อ forespore และเรียกคืนการกระจายประเภทของป่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อทดสอบว่าคาร์ดิโอไลพินเป็นสิ่งจำเป็นที่จะ จำกัด murg กับ forespore เราโดยตรงสามารถเพิ่มคาร์ดิโอไลพินให้เมื่อยด้วยลบคาร์ดิโอไลพินการสังเคราะห์ยีน ( jdb2238 ) ที่ T3 หลังจากที่เริ่มต้นของการ murg yfp เมื่อสัญญาณแรกที่ตรวจพบความเข้มข้นสุดท้าย 30 mm และคาร์ดิโอไลพินเพิ่มเพื่อผลิตสปอร์วัฒนธรรมเราเทียบที่เวลาที่แตกต่างกันจุดจำกัดรูปแบบของ murg yfp ในสายพันธุ์คาร์ดิโอไลพิน null , ป่าประเภท ( jdb1689 ) และคาร์ดิโอไลพิน null ความเครียดเพิ่มคาร์ดิโอไลพิน . เพิ่มคาร์ดิโอไลพินให้เมื่อยคาร์ดิโอไลพินว่างช่วยแปลหลักของ murg yfp กับสปอร์ ( ภาพที่ 4C s6 , ) ที่สูงสุด สปอร์ต่อการเซลล์แม่ 2.43 _ .18 สำหรับเซลล์ชนิดป่า ( jdb1689 ) 1.59 _ 14 สำหรับสายพันธุ์กลาย ( jdb2238 ) และ 2.16 _ . 18 สายพันธุ์กลายพันธุ์เป็นคาร์ดิโอไลพิน ( รูป 4D ) ดังนั้น ภาพและปริมาณของการแสดงให้เห็นว่า คาร์ดิโอไลพินเป็นสิ่งจำเป็นที่จะ จำกัด murg yfp กับ forespore และเรียกคืนการกระจาย
ชนิดป่า