Crystal Violet Cell StainingCrystal

Crystal Violet Cell Staining
Crystal violet binds to cell nuclei and gives absorbance readings proportional to cell counts at 595 nm.
1. After finishing reading the absorbance at 450 nm, wash the plate twice with 200 μl of Wash Buffer and
twice with 200 μl of 1x PBS for 5 minutes each. Tap the plates on paper towel to remove the excess liquid.
Let plate air dry for 5 minutes at room temperature.
2. Add 50 μl of crystal violet solution to each well, incubate for 30 minutes at room temperature on the
shaker. Note: Crystal violet is an intense stain. Avoid contact with skin and clothing.
3. Flick the plate to remove crystal violet solution, rinse the plate by filling the wells with running tap water,
and wash the plate with 200 μl of 1x PBS 3 times, 5 minutes each with gently shaking on the shaker.
4. Add 100 μl of 1% SDS into each well and incubate on the shaker at room temperature for 1 hour.
5. Read absorbance at 595 nm with microplate reader. If absorbance is too high, the solubilized crystal
violet solution can be diluted 10 times with H2O on a separate 96-well plate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ย้อมสีเซลล์คริสตัลม่วง
คริสตัลไวโอเลต binds กับแอลฟาเซลล์ และให้อ่าน absorbance ที่สัดส่วนในการนับจำนวนเซลล์ที่ 595 nm.
1 หลังจากเสร็จสิ้นการอ่าน absorbance ที่ 450 nm ล้างแผ่นที่สอง มี μl 200 ล้างบัฟเฟอร์ และ
สอง ด้วย μl 200 1 x ของ PBS ใน 5 นาทีแต่ละ เคาะแผ่นบนกระดาษผ้าเพื่อเอาของเหลวส่วนเกิน
ให้จานอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้อง 5 นาที
2 เพิ่ม 50 μl ของคริสตัลม่วงฟักแต่ละดี 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องใน
เชคเกอร์ หมายเหตุ: คริสตัลไวโอเลตเป็นคราบรุนแรง หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนังและเสื้อผ้า
3 Flick จานไปเอาคริสตัลไวโอเลตโซลูชัน ล้างจาน โดยการกรอกรายละเอียดบ่อการใช้น้ำประปา,
และล้างจาน ด้วย μl 200 ของ PBS 1 x ครั้ง 3, 5 นาทีด้วยการสั่นเบา ๆ ในเชคเกอร์
4 เพิ่ม μl 100 ของ 1% SDS ในแต่ละบ่อ และฟักในเชคเกอร์ที่อุณหภูมิห้องใน 1 ชั่วโมง
5 อ่าน absorbance ที่ 595 nm ด้วย microplate อ่าน ถ้า absorbance สูงเกินไป คริสตัล solubilized
โซลูชันไวโอเลทสามารถจะผสม 10 ครั้งกับ H2O บนจานดี 96 แยกต่างหากได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คริสตัลไวโอเล็ตมือย้อมสี
คริสตัลสีม่วงผูกกับนิวเคลียสของเซลล์และช่วยให้การอ่านการดูดกลืนแสงสัดส่วนกับจำนวนเซลล์ที่ 595 นาโนเมตร
1 หลังจากเสร็จสิ้นการอ่านการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรล้างจานสองครั้ง 200 ไมโครลิตรของล้างบัฟเฟอร์และ
ครั้งที่สอง 200 ไมโครลิตรของ 1x พีบีเอสเป็นเวลา 5 นาทีในแต่ละ แตะแผ่นบนผ้าขนหนูกระดาษเพื่อเอาของเหลวส่วนเกิน
ให้อากาศแผ่นแห้งเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
2 เพิ่ม 50 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาสีม่วงใสกันดีบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องใน
เครื่องปั่น หมายเหตุ: คริสตัลสีม่วงเป็นสีที่รุนแรง หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนังและเสื้อผ้า
ที่ 3 สะบัดแผ่นเพื่อเอาสารละลายสีม่วงคริสตัลล้างจานโดยการกรอกหลุมกับการทำงานน้ำประปา
และล้างจานด้วย 200 ไมโครลิตรของ 1x PBS 3 ครั้ง, 5 นาทีแต่ละคนมีการสั่นสะเทือนเบา ๆ บนเครื่องปั่น
4 เพิ่ม 100 ไมโครลิตร 1% SDS ในแต่ละดีและฟักไข่ในเครื่องปั่นที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง
5 อ่านการดูดกลืนแสงที่ 595 นาโนเมตรกับผู้อ่านไมโคร ถ้าการดูดกลืนแสงสูงเกินไปคริสตัลละลาย
แก้ปัญหาสีม่วงสามารถปรับลด 10 ครั้งด้วย H2O บนจาน 96 ดีที่แยกต่างหาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คริสตัลสีม่วงเซลล์ย้อมสี
คริสตัลสีม่วงผูกกับเซลล์ นิวเคลียส และให้อ่านค่าการดูดกลืนแสงเป็นสัดส่วนกับเซลล์นับที่ 595 nm .
1 หลังจากเสร็จสิ้นการอ่านค่า 450 nm , ล้างจานสองครั้งกับ 200 μผมกันชนล้าง
สองครั้งกับ 200 μชั้น 1x PBS เป็นเวลา 5 นาทีในแต่ละ แตะแผ่นบนผ้าขนหนูกระดาษเพื่อขจัดของเหลวส่วนเกิน
ให้จาน อากาศแห้ง สำหรับ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง .
2 เพิ่ม 50 μ L ของสารละลายสีม่วงคริสตัลแต่ละดี พัก 30 นาที ที่อุณหภูมิห้องบน
เครื่องปั่น . หมายเหตุ : คริสตัลสีม่วงเป็นคราบที่รุนแรง หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนัง และเสื้อผ้า .
3 สะบัดแผ่นเพื่อลบโซลูชั่นสีม่วงคริสตัลล้างจาน โดยการกรอกข้อมูลใช้น้ำประปา
และล้างจานด้วยμ 200 ลิตร PBS 1x 3 ครั้ง , 5 นาทีแต่ละเบา ๆสั่นในเครื่องปั่น .
4 เพิ่ม 100 μ L 1% SDS ในแต่ละอย่างดีและฟักไข่ในเครื่องปั่นที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง .
5 อ่านค่าการดูดกลืนแสงที่ 595 nm กับผู้อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย . ถ้าค่ามันสูงเกินไป ซึ่งคริสตัล
ม่วงโซลูชั่นสามารถเจือจาง 10 เท่ากับ H2O ใน 96 ก็แยกจาน