2.6. Determination of vitamin E, b-carotene, and lutein contents
Samples were extracted according to the the method of Speek
et al. (1985) in the dark to protect vitamin E, b-carotene, and lutein
from degradation. In brief, samples were first saponified by placing
a 3.0–5.0 g homogenised sample into a brown round-bottom flask.
This was followed by addition of 10 ml freshly prepared aqueous
solution of 10% ascorbic acid (Ajax Finechem, Victoria, Australia)
and 50 ml 2 M ethanolic potassium hydroxide (KOH; Merck,
Darmstadt, Germany). This solution was refluxed in a boiling water
bath for 30 min and cooled to room temperature. After adding
70 ml of hexane (J.T. Baker, PA, USA), the samples were mixed by
continuous shaking for 2 min. After separation of the two layers,
the upper layer was transferred to a brown-glass separatory funnel
containing 50 ml 5% (w/v) KOH solution. The samples were
extracted twice with 35 ml of hexane. The combined hexane
extract was washed with 100 ml of 10% (w/v) sodium chloride
(Ajax Finechem, Victoria, Australia) and with a consecutive
100 ml aliquots of water until alkali-free. An aliquot was collected
and evaporated in a rotary evaporator (Buchi, Flawil, Switzerland)
under vacuum in a 37 C water bath. Residue was dissolved in 1 ml
of chloroform (RCI Labscan, Bangkok, Thailand) and 1 ml of
methanol (J.T. Baker, PA, USA).
Analysis of vitamin E was performed using an HPLC system
equipped with a Waters 515 pump (Waters Corporation, Milford,
MA, USA) and Jasco UV 975 detector (Jasco International, Co., Ltd,
Tokyo, Japan). Vitamin E was analysed using a C18 column (Water
resolve C18 3.9 150 mm, Waters Corporation, Milford, MA, USA)
and a mobile phase of methanol at a flow rate 0.6 ml/min and
monitored at 295 nm. The results were expressed as milligrams/
100 g of fresh sample (mg/100 g).
2.6 ความมุ่งมั่นของวิตามิน E, B-แคโรทีนและเนื้อหา lutein
ตัวอย่างถูกสกัดตามวิธีการของ Speek
และคณะ (1985) ในที่มืดเพื่อปกป้องวิตามิน E, B-แคโรทีนและลูทีน
จากการย่อยสลาย ในช่วงสั้น ๆ ตัวอย่างกราฟต์เป็นครั้งแรกโดยการวาง
3.0-5.0 กรัมตัวอย่างปั่นเข้าไปในขวดสีน้ำตาลรอบด้านล่าง.
นี้ตามด้วยนอกจากนี้จาก 10 มลเตรียมสดน้ำ
แก้ปัญหาของวิตามินซี 10% (อาแจ๊ก Finechem วิกตอเรียออสเตรเลีย)
และ 50 มล. 2 ไฮดรอกไซโพแทสเซียม M เอทานอล (KOH; เมอร์ค,
Darmstadt, เยอรมนี) การแก้ปัญหานี้ได้รับการ refluxed ในน้ำเดือด
อาบน้ำเป็นเวลา 30 นาทีและระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง หลังจากเพิ่ม
70 มิลลิลิตรของเฮกเซน (JT เบเกอร์, PA, USA), ตัวอย่างถูกผสมโดย
เขย่าอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 2 นาที หลังจากที่แยกจากกันของสองชั้น
ชั้นบนถูกย้ายไปเป็นสีน้ำตาลแก้วกรวย Separatory
ที่มีขนาด 50 ml 5% (w / v) สารละลาย KOH ตัวอย่างที่ถูก
สกัดเป็นครั้งที่สองกับ 35 มิลลิลิตรของเฮกเซน เฮกเซนรวม
สารสกัดถูกล้างด้วย 100 มล. 10% (w / v) โซเดียมคลอไรด์
(อาแจ๊ก Finechem วิกตอเรียออสเตรเลีย) และมีติดต่อกัน
100 มลส่วนลงตัวของน้ำจนด่างฟรี aliquot ถูกเก็บรวบรวม
และระเหยในเครื่องระเหยแบบหมุน (Buchi, Flawil, วิตเซอร์แลนด์)
ภายใต้สูญญากาศใน 37? C อ่างน้ำ เหลือถูกกลืนหายไปใน 1 มิลลิลิตร
ของคลอโรฟอร์ม (RCI Labscan, Bangkok, Thailand) และ 1 มิลลิลิตรของ
เมทานอล (JT เบเกอร์, PA, USA).
การวิเคราะห์ของวิตามินอีได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบ HPLC
พร้อมกับน้ำ 515 เครื่องสูบน้ำ (วอเตอร์คอร์ปอเรชั่น ฟอร์ด,
MA, USA) และ Jasco ยูวี 975 เครื่องตรวจจับ (Jasco อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัด ,
โตเกียว, ญี่ปุ่น) วิตามินอีได้รับการวิเคราะห์โดยใช้คอลัมน์ C18 (น้ำ
แก้ C18 3.9? 150 มิลลิเมตรน้ำคอร์ปอเรชั่นฟอร์ด, MA, USA)
และเฟสเคลื่อนที่ของเมทานอลที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาทีและ
ตรวจสอบที่ 295 นาโนเมตร ผลที่ได้รับแสดงเป็นมิลลิกรัม /
100 กรัมของตัวอย่างอาหารสด (มก. / 100 กรัม)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.6 การหาปริมาณวิตามินอีเบต้าแคโรทีนและลูทีน เนื้อหา
ตัวอย่างสกัดไปตามวิธีการของ speek
et al . ( 1985 ) ในที่มืด เพื่อปกป้องวิตามินอีเบต้าแคโรทีนและลูทีน
จากการย่อยสลาย สรุปได้ว่า จำนวนแรกการดูดซึมโดยวาง
3.0 และ 5.0 กรัมต่อ homogenised ตัวอย่างลงในขวดสีน้ำตาลกลมด้านล่าง .
นี้ตามด้วยนอกเหนือจากเตรียมสดน้ำ
10 มล.โซลูชั่น 10% กรดแอสคอร์บิค ( อาแจ็กซ์ finechem , วิคตอเรีย , ออสเตรเลีย )
2 M ( โพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ ( KOH 50 ml ; เมอร์ค
ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) วิธีการแก้ปัญหานี้ refluxed ในน้ำเดือด
อาบน้ำ 30 นาที และทำให้เย็นที่อุณหภูมิห้อง หลังจากเพิ่ม
70 มิลลิลิตรของเฮกเซน ( J.T . Baker , PA , USA ) , จำนวนผสมโดย
สั่นอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 2 นาที หลังจากการแยกของชั้น
ชั้นบนถูกส่งไปสีน้ำตาลแก้วกรวยแยก
ที่มีถึง 5 % 50 ml ( w / v ) เกาะโซลูชั่น จำนวนครั้งที่สองกับ 35 ml
สกัดเฮกเซน . สารสกัดเฮกเซน
รวมซัก 100 ml 10 % ( w / v ) โซเดียม คลอไรด์
( อาแจ็กซ์ finechem , วิคตอเรีย , ออสเตรเลีย ) และกับติดต่อกัน
100 ml เฉยๆน้ำจนด่างฟรี การรวบรวม
ส่วนลงตัวระเหยในเครื่องระเหยแบบหมุนและ ( บูชิ flawil , สวิตเซอร์แลนด์ )
ภายใต้สุญญากาศใน 37 C น้ำอาบ ตกค้างที่ละลายใน 1 ml
คลอโรฟอร์ม ( RCI labscan , กรุงเทพมหานคร , ประเทศไทย ) และ 1 มล.
เมทานอล ( J.T . Baker , PA , USA ) .
การวิเคราะห์ของวิตามินอีคือการใช้ระบบ HPLC
พร้อมกับน้ำหรือปั๊ม ( Waters Corporation , Milford ,
MA , USA ) และเครื่องยูวี 975 jasco ( jasco นานาชาติCo . , Ltd
โตเกียว , ญี่ปุ่น ) วิตามิน E วิเคราะห์โดยใช้คอลัมน์ C18 น้ำ
แก้ไข c18 3.9 150 มม. น้ำ บริษัท มิลฟอร์ด , MA , USA )
และเฟสเคลื่อนที่ของเมทานอลที่อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตรต่อนาทีและ
ติดตามที่ 295 nm . ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นมิลลิกรัม /
ตัวอย่างสด 100 กรัม ( มิลลิกรัม / 100 กรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..