Higher plants use RNA silencing to

Higher plants use RNA silencing to defend against viral infections. As a counter defense, plant viruses have evolved proteins that suppress RNA silencing. Mealybug wilt of pineapple (MWP), an important disease of pineapple, has been associated with at least three distinct viruses, Pineapple mealybug wilt associated virus -1, -2, and -3 (PMWaV-1, -2, and -3). Selected open reading frames (ORFs) of PMWaV-1 and PMWaV-2 were screened for their local and systemic suppressor activities in Agrobacterium-mediated transient assays using green fluorescent protein (GFP) in Nicotiana benthamiana. Results indicate that PMWaV-2 utilizes a multiple-component RNA silencing suppression mechanism. Two proteins, p20 and CP, target both local and systemic silencing in N. benthamiana, while the p22 and CPd proteins target only systemic silencing. In the related virus PMWaV-1, we found that only one of the encoded proteins, p61, had only systemic suppressor activity. Of all the proteins tested from both viruses, only the PMWaV-2 p20 protein suppressed local silencing induced by double-stranded RNA (dsRNA), but only when low levels of inducing dsRNA were used. None of the proteins analyzed could interfere with the short distance spread of silencing. We examined the mechanism of systemic suppression activity by investigating the effect of PMWaV-2-encoded p20 and CP proteins on secondary siRNAs. Our results suggest that the PMWaV-2 p20 and CP proteins block the systemic silencing signal by repressing production of secondary siRNAs. We also demonstrate that the PMWaV-2 p20 and p22 proteins enhanced the pathogenicity of Potato virus X in N. benthamiana.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พืชสูงใช้ RNA ภายในเพื่อป้องกันการติดเชื้อไวรัส เป็นการป้องกันตัวนับ ไวรัสพืชได้มีพัฒนาโปรตีนที่ปราบปรามภายในอาร์เอ็นเอ เพลี้ยแป้งเหี่ยวของสับปะรด (MWP), โรคสำคัญของสับปะรด ได้เชื่อมโยงกับน้อยสามแตกไวรัส ไวรัสเหี่ยวเกี่ยวข้องเพลี้ยแป้งสับปะรด -1, -2, -3 และ (PMWaV-1, -2 และ -3) คัดเลือกเปิดอ่านเฟรม (ORFs) PMWaV-1 และ PMWaV-2 สำหรับกิจกรรมของท้องถิ่น และระบบตัวเกินในสื่อมของ assays ชั่วคราวที่ใช้โปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) ใน Nicotiana benthamiana ผลระบุว่า PMWaV-2 ใช้ RNA หลายคอมโพเนนต์ที่ภายในกลไกการปราบปราม สองโปรตีน p20 และ CP เป้าหมายทั้งภายใน และระบบภายใน N. benthamiana ขณะเท่า p 22 และ CPd โปรตีนเป้าหมายเฉพาะ ระบบภายใน ในไวรัสที่เกี่ยวข้อง PMWaV-1 เราพบว่า หนึ่งเท่านั้นเข้ารหัสโปรตีน p61 มีกิจกรรมตัวเกินระบบเท่านั้น ของโปรตีนทั้งหมดที่ผ่านทดสอบจากทั้งไวรัส โปรตีน p20 PMWaV-2 เท่านั้นถูกระงับสมรถิ่นเกิดจากสองครั้งที่ควั่น RNA (dsRNA), แต่เฉพาะเมื่อใช้ในระดับต่ำชัก dsRNA ไม่มีโปรตีนวิเคราะห์อาจรบกวนการแพร่กระจายระยะสั้น ๆ ของสมร เราตรวจสอบกลไกของระบบปราบปรามกิจกรรม โดยการตรวจสอบผลของ PMWaV 2 รหัส p20 และโปรตีน CP ในรอง siRNAs ผลของเราแนะนำให้ p20 PMWaV-2 และ CP โปรตีนบล็อกสัญญาณประสานระบบ โดยชื่อของรอง siRNAs นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่า โปรตีนเท่า p 22 และ p20 PMWaV-2 เพิ่ม pathogenicity อยู่ไวรัสมันฝรั่ง X ใน N. benthamiana

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พืชที่สูงขึ้นใช้ RNA เงียบเพื่อป้องกันการติดเชื้อไวรัส ในฐานะที่เป็นเคาน์เตอร์ป้องกันไวรัสพืชมีการพัฒนาโปรตีนที่ปราบปรามสมรอาร์เอ็นเอ เหี่ยวเพลี้ยแป้งของสับปะรด (MWP) ซึ่งเป็นโรคที่สำคัญของสับปะรดมีความเกี่ยวข้องกับอย่างน้อยสามไวรัสที่แตกต่างกันของเพลี้ยแป้งสับปะรดเหี่ยวเกี่ยวข้องไวรัส -1, -2 และ -3 (PMWaV-1 -2 และ -3) . เลือกเฟรมเปิดอ่าน (ORFs) ของ PMWaV-1 และ PMWaV-2 ถูกคัดกรองสำหรับกิจกรรมต้านท้องถิ่นและระบบของพวกเขาใน Agrobacterium พึ่งตรวจชั่วคราวโดยใช้สีเขียวเรืองโปรตีน (GFP) ใน Nicotiana benthamiana ผลการวิจัยพบว่า PMWaV-2 ใช้ RNA หลายองค์ประกอบสมรกลไกการปราบปราม โปรตีนสองชนิด P20 และ CP เป้าหมายทั้งในประเทศและสมรระบบในเอ็น benthamiana ขณะที่ P22 และโปรตีน CPD กำหนดเป้​​าหมายเฉพาะสมรระบบ ในไวรัสที่เกี่ยวข้อง PMWaV-1 เราพบว่ามีเพียงหนึ่งของโปรตีนที่เข้ารหัส, P61, มีเพียงกิจกรรมต้านระบบ ของโปรตีนทั้งหมดที่ผ่านการทดสอบจากไวรัสทั้งสองเพียง PMWaV-2 P20 โปรตีนระงับสมรท้องถิ่นที่เกิดจากเกลียวคู่ RNA (dsRNA) แต่เมื่อระดับต่ำของการกระตุ้นให้เกิด dsRNA ถูกนำมาใช้ ไม่มีโปรตีนวิเคราะห์อาจรบกวนกับการแพร่กระจายระยะทางสั้น ๆ ของการห้ามไม่ให้พูด เราตรวจสอบกลไกของกิจกรรมการปราบปรามอย่างเป็นระบบโดยการตรวจสอบผลกระทบของ PMWaV-2-P20 เข้ารหัสและ CP โปรตีนใน siRNAs รอง ผลของเราแสดงให้เห็นว่า PMWaV-2 P20 และ CP โปรตีนป้องกันสัญญาณสมรระบบโดยการระงับการผลิตของ siRNAs รอง นอกจากนี้เรายังแสดงให้เห็นว่า PMWaV-2 P20 และ P22 โปรตีนที่เพิ่มขึ้นทำให้เกิดโรคของไวรัสมันฝรั่ง X ในเอ็น benthamiana

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พืชสูงกว่าใช้ RNA ปิดปากเพื่อป้องกันการติดเชื้อไวรัส เป็นเครื่องป้องกันไวรัสพืชมีการพัฒนาโปรตีนที่ยับยั้งยีน silencing . ทรงสับปะรด เพลี้ยแป้ง ( mwp ) โรคสำคัญของสับปะรดมีความสัมพันธ์กับไวรัสที่แตกต่างกันอย่างน้อยสาม เพลี้ยแป้งสับปะรดจะเกี่ยวข้องไวรัส - 1 , - 2 และ - 3 ( pmwav-1 , - 2 , - 1 ) เลือก open reading frames ( orfs ) และมีกิจกรรม pmwav-1 pmwav-2 เครื่องห้ามท้องถิ่นและระบบของพวกเขาในระดับต่างๆโดยใช้ Agrobacterium ยีนโปรตีนเรืองแสงสีเขียว ( GFP ) ในขนะ benthamiana . ผลการวิจัย พบว่า pmwav-2 ใช้หลายส่วน RNA silencing กลไกในการปราบปราม 2 โปรตีน p20 และ CP เป้าหมายทั้งในระดับท้องถิ่นและระบบปิดปาก และ benthamiana ในขณะที่ p22 CPD และโปรตีนเป้าหมายเฉพาะกลุ่มสามารถ . ในที่เกี่ยวข้องกับไวรัส pmwav-1 เราพบว่ามีเพียงหนึ่งของการเข้ารหัสโปรตีน p61 มีแค่ระบบเก็บเสียงกิจกรรม ของโปรตีนที่ทดสอบจากทั้งไวรัส เพียง pmwav-2 p20 โปรตีนยับยั้งการ Double stranded ท้องถิ่น silencing RNA ( dsRNA ) แต่เมื่อระดับต่ำของ dsRNA โดยใช้ ไม่มีของโปรตีนวิเคราะห์อาจรบกวนกับระยะทางสั้น ๆกระจายของความเงียบ . เราตรวจสอบกลไกการออกฤทธิ์ โดยศึกษาผลของระบบการ pmwav-2-encoded p20 และโปรตีน CP ใน sirnas ทุติยภูมิ ผลของเราแสดงให้เห็นว่า p20 pmwav-2 และ CP โปรตีนบล็อกสัญญาณ โดยระบบสามารถผลิตได้ sirnas ทุติยภูมิ นอกจากนี้เรายังแสดงให้เห็นว่า p20 pmwav-2 p22 โปรตีนและเพิ่มการมันฝรั่งไวรัส และ benthamiana .