On random days of the estrous cycle, cumulus-oocyte complexes (COCs) were collected using transvaginal
ultrasound-guided oocyte collection with a 5-MHz sectorial
transducer equipped with a needle guide and attached to
an Aloka 900 ultrasound scanner (Aloka, Tokyo, Japan).
Cumulus-oocyte complexes were aspirated using a 17-ga
needle and a vacuum pump set to a pressure of 70 mm
Hg. Cumulus-oocyte complexes were collected from all
visible follicles 3 mm. The contents of each follicle were
collected into a 50 mL conical tube with 10 mL of oocyte
collection medium. All COCs were washed in TCM-199
maturation medium for oocytes with HEPES supplemented
with 10% (vol/vol) bovine fetal serum (Gibco,
Langley, OK, USA), 2 mg/mL pyruvate, and 75 mg/mL
gentamicin (wash media), and then placed in oocyte
maturation medium for transport back to the laboratory in
a portable incubator. The COCs were divided into four
categories based on the compactness of the cumulus cells
and the homogeneity and transparency of the ooplasm
ในการสุ่มวันของรอบการเป็นสัด , Cumulus โอพี คอมเพล็กซ์ ( ลบ ) ที่ใช้ในการเก็บรวบรวม transvaginalultrasound-guided โอไซต์คอลเลกชันที่มี 5-mhz หมวดธุรกิจตัวแปลงสัญญาณพร้อมคู่มือและติดเข็มการ aloka 900 อัลตร้าซาวด์สแกนเนอร์ ( aloka , โตเกียว , ญี่ปุ่น )คูมูลัสเชิงซ้อนเป็น aspirated โดยใช้ไข่ 17 กาเข็มและปั๊มสูญญากาศชุดความดัน 70 มม.HG . นอกจากนี้จากการเก็บไข่เชิงซ้อนทั้งหมดมองเห็นรูขุมขน 3 มิลลิเมตร เนื้อหาของแต่ละ follicle คือเก็บลงใน 50 ml หลอดกับไข่ 10 ml ของทรงกรวยคอลเลกชันปานกลาง ทั้งหมดอยู่ใน tcm-199 ลบล้างสุกปานกลางสำหรับไข่ ( เสริมฮีเปสกับ 10 เปอร์เซ็นต์ ( ปริมาตร / ปริมาตร ) และเซรั่ม ( gibco ทารกในครรภ์ ,แลงลีย์ , โอเค , USA ) 2 mg / ml ไพรูเวทและ 75 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรเจนตาไมซิน ( ล้างสื่อ ) แล้ววางในโอโอไซต์สุกปานกลางเพื่อการขนส่งกลับไปยังห้องปฏิบัติการในเป็นตู้แบบพกพา ลบที่แบ่งออกเป็นสี่ประเภทขึ้นอยู่กับความเป็นปึกแผ่นของเซลล์คิวมูลัสและความเป็นเนื้อเดียวกันและความโปร่งใสของ ooplasm
การแปล กรุณารอสักครู่..
