Protein biochemistryProtein analysi

Protein biochemistry
Protein analysis of collected fluids of various Nepenthes species
using SDS–PAGE of TCA-precipitated proteins followed by in-gel
tryptic digestion, desalting and concentration (ZipTip columns,
C18-RP, Millipore, Schwalbach, Germany) and subsequent
micro-sequencing of peptides obtained was done exactly as
described (Rottloff et al., 2011). Expression of the recombinant
NmPR-1 protein in stably transfected Sf9 cells (NmPR-1/Sf9)
was analyzed by Western blot after SDS–PAGE and transfer of
the proteins on PVDF-membranes using the anti-V5 horseradish
peroxidase antibody (Invitrogen) for detection. For treatments of
PR-1/Sf9 protein, either 8 M urea or the peptide-N-glycosidase
PNGase F (NEB, Frankfurt/Main, Germany) was used following
exactly the manufacturer’s protocol. Such experiments were
analyzed via Western blot using an anti-V5 horseradish

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชีวเคมีของโปรตีนการวิเคราะห์โปรตีนของรวบรวมของเหลวต่าง ๆ ชนิดของหม้อข้าวตามในเจลใช้ SDS – หน้า TCA ตกตะกอนโปรตีนด้วยย่อยอาหาร tryptic แยก และความเข้มข้น (คอลัมน์ ZipTipC18-RP มิลลิพอร์ Schwalbach เยอรมนี) และในเวลาต่อมาทำไมโครลำดับของเปปไทด์ที่ได้รับตรงตามอธิบาย (Rottloff et al. 2011) นิพจน์ของการควบรวมNmPR-1 โปรตีนในเซลล์ Sf9 สามารถ transfected (NmPR-1/Sf9) โดยตะวันตกซับหลังจาก SDS – หน้าและโอนโปรตีนบน PVDF เยื่อใช้ดิชป้องกัน-V5ฮอสแอนติบอดี (Invitrogen) สำหรับการตรวจสอบ สำหรับการรักษาของประชาสัมพันธ์-1/Sf9 โปรตีน เปปไทด์-N-glycosidase หรือยูเรีย 8 เมตรF PNGase (NEB แฟรงก์เฟิร์ตอัมเมน เยอรมนี) ใช้ต่อไปแน่นอนผู้ผลิตโพรโทคอล การทดลองดังกล่าวได้วิเคราะห์ทางตะวันตกน้าใช้ดิชการป้องกัน-V5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนชีวเคมี
วิเคราะห์โปรตีนของของเหลวที่เก็บรวบรวมของหม้อข้าวหม้อแกงลิงชนิดต่างๆ
โดยใช้ระบบ SDS-PAGE ของโปรตีน TCA-ตกตะกอนตามด้วยในเจล
tryptic ย่อยอาหาร desalting และความเข้มข้น (คอลัมน์ Ziptip,
C18-RP, คชวาล, เยอรมนี) และต่อมา
ไมโครลำดับ เปปไทด์ที่ได้มาทำตรงตามที่
อธิบายไว้ (Rottloff et al. 2011) แสดงออกของ recombinant
NMPR-1 โปรตีนใน transfected เสถียรเซลล์ Sf9 (NMPR-1 / Sf9)
ได้รับการวิเคราะห์โดยดวงตะวันหลังจาก SDS-PAGE และการถ่ายโอนของ
โปรตีนใน PVDF-เยื่อใช้ป้องกัน V5 มะรุม
peroxidase แอนติบอดี (Invitrogen) สำหรับ การตรวจพบ สำหรับการรักษาของ
PR-1 / Sf9 โปรตีนทั้ง 8 เมตรยูเรียหรือเปปไทด์-N-glycosidase
PNGase F (NEB,
Frankfurt / Main, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ต่อไป ว่าโพรโทคอของผู้ผลิต การทดลองดังกล่าวถูก
วิเคราะห์ผ่านดวงตะวันใช้พืชชนิดหนึ่งที่ต่อต้าน V5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ชีวเคมีทางโปรตีนการวิเคราะห์โปรตีนของการเก็บรวบรวมของเหลวชนิด Nepenthes ต่าง ๆการใช้ SDS หน้าทีของ TCA ตะกอนโปรตีน รองลงมาได้แก่ เจลอาหารและการย่อยอาหาร desalting ( คอลัมน์ ziptip , สมาธิ ,c18-rp มิลลิ , Schwalbach , เยอรมนี ) และต่อมาไมโครการได้มาทำเหมือนเปปไทด์อธิบาย ( rottloff et al . , 2011 ) การแสดงออกของยีนnmpr-1 โปรตีนในเซลล์ต่างๆ transfected อย่างถาวร ( nmpr-1 / ต่างๆ )แบบหน้าหลังและ Western blot SDS และโอนโปรตีนในเยื่อโดยใช้ PVDF anti-v5 .peroxidase แอนติบอดี ( Invitrogen ) สำหรับการตรวจหา สำหรับการรักษาของโปรตีน pr-1 / ต่างๆทั้ง 8 M ยูเรีย หรือ peptide-n-glycosidasepngase F ( ปากนก แฟรงค์เฟิร์ต / เมน เยอรมนี ) คือใช้ต่อไปนี้พิธีสารว่าผู้ผลิตของ การทดลองดังกล่าวคือวิเคราะห์ผ่าน blot ตะวันตกใช้ anti-v5 .