Background: In the past few years,

Background: In the past few years, an increasing number of studies have reported the potential use of
microRNAs (miRNA) as circulating biomarkers for diagnosis or prognosis of a wide variety of diseases.
There is, however, a lack of reproducibility between studies. Due to the high miRNA content in platelets
this may partly be explained by residual platelets in the plasma samples used. When collecting fresh
plasma samples, it is possible to produce cell-free/platelet-poor plasma by centrifugation. In this study,
we systematically investigated whether biobanked EDTA plasma samples could be processed to be
suitable for miRNA analysis.
Materials and methods: Blood samples were collected from ten healthy volunteers and centrifuged to
produce platelet-poor-plasma (PPP) and standard biobank plasma. After one week at
80 °C the biobanked EDTA plasma was re-centrifuged by different steps to remove residual platelets. Using RT-qPCR
the levels of 14 miRNAs in the different plasma preparations were compared to that of PPP.
Results: We were able to remove residual platelets from biobanked EDTA plasma by re-centrifugation of
the thawed samples. Nevertheless, for most of the investigated miRNAs, the miRNA level was significantly higher in the re-centrifuged biobanked plasma compared to PPP, even when the platelet count
was reduced to 0–1  109/L.
Conclusion: We found, that pre-storage centrifugation conditions have a significant impact on the
measured EDTA plasma level of miRNAs known to be present in platelets. Even for the miRNAs found to
be less effected, we showed that a 1.5–3 fold change in plasma levels may possible be caused by or easily
overseen due to sample preparation and/or storage.
& 2016 The Authors. Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY-NC-ND

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พื้นหลัง: ในปีผ่านมา การเพิ่มจำนวนของการศึกษาได้รายงานการใช้ศักยภาพของmicroRNAs (เที่ยว) เป็นการหมุนเวียน biomarkers สำหรับการวินิจฉัยหรือการคาดคะเนความหลากหลายของโรคมี อย่างไรก็ตาม การขาดการแสดงระหว่างการศึกษา เนื่องจากเนื้อหาที่สูงเที่ยวในเกล็ดเลือดนี้อาจจะอธิบายบางส่วนจากเกล็ดเลือดที่ตกค้างในตัวอย่างพลาสม่าที่ใช้ เมื่อเก็บสดตัวอย่างพลาสม่า เป็นไปได้ในการผลิตพลาสมาเซลล์ฟรี/เกล็ดเลือดยากจน โดยการหมุนเหวี่ยง ในการศึกษานี้เราเป็นระบบการตรวจสอบว่า สามารถถูกประมวลผลตัวอย่าง biobanked EDTA พลาสมาจะเหมาะสำหรับการเที่ยววิเคราะห์วัสดุและวิธีการ: เก็บรวบรวมจากอาสาสมัครสุขภาพดีสิบตัวอย่างเลือด และจากการผลิตเกล็ดเลือดต่ำพลา (PPP) และพลา biobank มาตรฐาน หลังจากหนึ่งสัปดาห์ที่อุณหภูมิ 80 ° C biobanked EDTA ใหม่ถูกจากพลาสม่า โดยขั้นตอนต่าง ๆ เพื่อเอาเกล็ดเลือดเหลือ ใช้ RT qPCRระดับของ miRNAs 14 เพื่อเตรียมการต่อสู้ต่างกันพลาได้เมื่อเทียบกับของ PPPผลลัพธ์: เราได้เอาเกล็ดเลือดที่ตกค้างจาก biobanked EDTA พลาสมา โดยการหมุนเหวี่ยงของตัวอย่าง thawed อย่างไรก็ตาม สำหรับส่วนใหญ่ของ miRNAs ตรวจสอบ ระดับเที่ยวถูกสูงในพลาสมา biobanked เหวี่ยงอีกครั้งเมื่อเทียบกับ PPP แม้ว่าการนับจำนวนเกล็ดเลือดลดลง 0 – 1 109/ลิตรสรุป: เราพบว่า ว่า หมุนเหวี่ยงก่อนเก็บเงื่อนไขมีผลกระทบสำคัญในการวัดระดับ miRNAs ที่รู้จักกันอยู่ในเกล็ดเลือด EDTA สำหรับ miRNAs พบว่าจะน้อยกว่าผลกระทบ เราพบว่า เปลี่ยน 1.5 – 3 พับสุดพฤษภาคมระดับพลาสมาเกิด ขึ้นโดยง่ายเขตเนื่องจากเตรียมตัวอย่างและเก็บและ 2016 ผู้เขียน เผยแพร่ โดย Elsevier b.v บทความเข้าถึงเปิดภายใต้การ CC BY-NC-ND

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พื้นหลัง: ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมาจำนวนเพิ่มมากขึ้นของการศึกษาได้มีการรายงานการใช้ศักยภาพของ
microRNAs (miRNA) ในขณะที่การไหลเวียนของ biomarkers สำหรับการวินิจฉัยหรือการพยากรณ์โรคที่หลากหลายของโรค.
มี แต่ขาดการทำสำเนาระหว่างการศึกษา เนื่องจากเนื้อหา miRNA สูงในเกล็ดเลือด
นี้อาจส่วนหนึ่งจะอธิบายได้ด้วยเกล็ดเลือดตกค้างในตัวอย่างพลาสมาที่ใช้ เมื่อเก็บรวบรวมสด
ตัวอย่างพลาสมาก็เป็นไปได้ในการผลิตมือถือฟรี / พลาสม่าของเกล็ดเลือดที่ยากจนโดยการหมุนเหวี่ยง ในการศึกษานี้
เราตรวจสอบระบบว่า biobanked ตัวอย่างพลาสมา EDTA สามารถประมวลผลให้เป็น
ที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ miRNA.
วัสดุและวิธีการ: เก็บตัวอย่างเลือดจากสิบอาสาสมัครสุขภาพดีและหมุนเหวี่ยงเพื่อ
ผลิตเกล็ดเลือดที่ไม่ดีพลาสม่า (PPP) และพลาสม่า biobank มาตรฐาน . หนึ่งสัปดาห์หลังจากที่? 80 ° C พลาสม่า EDTA biobanked เป็นอีกครั้งที่ปั่นโดยขั้นตอนที่แตกต่างกันเพื่อเอาเกล็ดเลือดตกค้าง ใช้ RT-qPCR
ระดับ 14 miRNAs ในการเตรียมการที่แตกต่างกันพลาสม่าที่ถูกเมื่อเทียบกับ PPP.
ผล: เราสามารถที่จะเอาเกล็ดเลือดที่เหลือจากพลาสม่า biobanked EDTA โดยการหมุนเหวี่ยง
ตัวอย่างละลาย อย่างไรก็ตามสำหรับส่วนมากของ miRNAs การตรวจสอบในระดับ miRNA สูงอย่างมีนัยสำคัญในเรื่องการปั่นพลาสม่า biobanked เมื่อเทียบกับ PPP แม้เมื่อนับเกล็ดเลือด
ก็จะลดลง 0-1? . 109 / L
สรุป: เราพบว่าสภาพการหมุนเหวี่ยงก่อนการจัดเก็บข้อมูลที่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญใน
ระดับพลาสม่า EDTA วัด miRNAs รู้จักที่จะอยู่ในเกล็ดเลือด แม้สำหรับ miRNAs พบว่า
ได้รับผลกระทบน้อยกว่าเราแสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงเท่า 1.5-3 ในระดับพลาสมาอาจเป็นไปได้ที่จะเกิดจากการได้อย่างง่ายดายหรือ
ดูแลเนื่องจากการเตรียมตัวและ / หรือจัดเก็บ.
และ 2016 ผู้เขียน จัดทำโดย Elsevier BV นี่เป็นบทความการเข้าถึงเปิดภายใต้ CC BY-NC-ดาโคตา