In the maize pathogenic fungus Usti

In the maize pathogenic fungus Ustilago maydis integration of transforming DNA at homo- logous or heterologous sites is often accompanied by duplications of the DNA. We show that it is possible to generate single-copy integration events with high effi- ciency by restriction enzyme-mediated integration (REMI). In about 50% of cases, a plasmid that contains a single BamHI site is integrated at chromosomal BamHI sites, if BamHI is added to the transformation mixtures. In the other cases it appears that integration events have also occurred preferentially at BamHI sites, but without restoration of the recognition sites. Using REMI we have generated approximately 1000 insertion mutants. Pathogenicity tests demonstrated that about 1-2% of these mutants were unable to induce symp- toms when tested in planta. For two of the mutants we have shown that the phenotype is linked to the inser- tion event.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มักจะมาพร้อมรวมเปลี่ยนดีเอ็นเอที่ตุ๊ด - logous หรือ heterologous ไซต์ในเชื้อราก่อโรคข้าวโพด Ustilago maydis โดยสำเนาดีเอ็นเอ เราแสดงว่า เป็นไปได้ที่จะสร้างกิจกรรมเดียวสำเนารวมกับสูง effi-ไฟฟ้า โดยเอนไซม์จำกัดสื่อรวม (REMI) ประมาณ 50% ของกรณี plasmid ที่ประกอบด้วยไซต์เดียว BamHI ถูกรวมที่เว็บไซต์ BamHI ของโครโมโซม ถ้า BamHI ถูกเพิ่มลงในส่วนผสมการแปลง ในกรณีปรากฏว่า รวมเหตุการณ์ยังเกิดขึ้นก่อน ที่เว็บไซต์ BamHI แต่ ไม่ฟื้นฟูสถานที่การรับรู้ ใช้เรมี่เรามีสร้างประมาณ 1000 แทรกการกลายพันธุ์ การทดสอบ pathogenicity อยู่แสดงให้เห็นว่า ประมาณ 1-2% ของสายพันธุ์เหล่านี้ก็ไม่สามารถก่อให้เกิด symp ทอมส์เมื่อทดสอบในลเวียมานอร์ สำหรับ 2 สายพันธุ์ เราได้แสดงว่า กนิที่เชื่อมโยงกับเหตุการณ์รองทางการค้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในข้าวโพดเชื้อราที่ทำให้เกิดโรค Ustilago maydis การรวมกลุ่มของดีเอ็นเอที่เปลี่ยน homo- logous หรือเว็บไซต์ heterologous มักจะมาพร้อมซ้ำซ้อนกันของดีเอ็นเอ เราแสดงให้เห็นว่ามันเป็นไปได้ในการสร้างกิจกรรมที่บูรณาการเดียวกับสำเนา ciency ประสิทธิภาพการสูงโดยบูรณาการการทำงานของเอนไซม์พึ่งการ จำกัด (REMI) ในประมาณ 50% ของกรณีพลาสมิดที่มีเว็บไซต์ BamHI เดียวแบบบูรณาการที่โครโมโซมเว็บไซต์ BamHI ถ้า BamHI จะถูกเพิ่มเข้าไปผสมเปลี่ยนแปลง ในกรณีอื่น ๆ ก็ปรากฏว่าเหตุการณ์ที่เกิดการบูรณาการที่เกิดขึ้นนอกจากนี้ยังพิเศษที่เว็บไซต์ BamHI แต่ไม่มีการฟื้นฟูของเว็บไซต์ที่ได้รับการยอมรับ ใช้ REMI เราได้สร้างรายได้ประมาณ 1000 กลายพันธุ์แทรก การทดสอบแสดงให้เห็นว่าการทำให้เกิดโรคประมาณ 1-2% ของการกลายพันธุ์เหล่านี้ไม่สามารถที่จะทำให้เกิด Toms symp- เมื่อทดสอบในพืช สำหรับสองของการกลายพันธุ์ที่เราได้แสดงให้เห็นว่าฟีโนไทป์มีการเชื่อมโยงกับเหตุการณ์การ inser-

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในข้าวโพด เชื้อโรค เชื้อรา ustilago maydis บูรณาการเปลี่ยน DNA ที่เหมือน logous หรือเว็บไซต์ที่มักจะมีการชนิดของดีเอ็นเอ เราแสดงให้เห็นว่ามันเป็นไปได้ที่จะสร้างเหตุการณ์การคัดลอกเดี่ยวกับ effi สูง - ประสิทธิภาพโดยเอนไซม์จำกัดโดยบูรณาการ ( เรม ) ประมาณ 50% ของผู้ป่วย ในที่ประกอบด้วยเว็บไซต์ BamHI เดียวแบบที่เว็บไซต์ BamHI BamHI โครโมโซม ถ้าเพิ่มการผสม ในกรณีอื่น ๆปรากฏว่า กิจกรรมบูรณาการยังเกิดขึ้น preferentially ที่เว็บไซต์ BamHI , แต่ไม่มีการฟื้นฟูการยอมรับเว็บไซต์ ใช้เรมี่เราได้สร้างประมาณ 1 , 000 จุดกลายพันธุ์ การทดสอบความสามารถในการทำให้เกิดโรค พบว่า ประมาณ 1-2 % ของสายพันธุ์เหล่านี้ไม่สามารถที่จะจูงบ้าง - ทอม เมื่อทดสอบใน planta . สองของสายพันธุ์ เราได้แสดงให้เห็นว่าการเชื่อมโยงกับ inser , เหตุการณ์