Isolation of the gsa-1 mutantA tota

Isolation of the gsa-1 mutant
A total of 5160 T-DNA insertional mutant lines in the Col-0
background, as described previously (Zuo et al., 2000; Zhang
et al., 2005; Li et al., 2012), were used in gsa-1 isolation. Fiveday-
old seedlings with roots c. 1.5 cm in length were transferred
onto new medium supplemented with 30mM (NH4)2SO4,
arranged in rows and then gravistimulated to screen for NH4
+-
sensitive phenotypes of root gravitropism. The gravitropic bending
during the following 72 h was captured, and putative
mutants with a reduced gravitropic response were selected and
transferred to soil to grow to maturity and to self-fertilize. One
of these putative mutants, called gsa-1, was selected for analysis.
The homozygous M4 gsa-1 mutant was backcrossed against the
parental wild-type (Col-0) another two times to remove the
unlinked mutations caused by the mutagenesis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกของ mutant gsa-1จำนวน 5160 T-DNA insertional เต่าบรรทัดในคอลัมน์-0พื้นหลัง อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (ซูยูเกธีมและ al., 2000 จางร้อยเอ็ด al., 2005 Li et al., 2012), ที่เคยแยก gsa-1 Fiveday-กล้าไม้เก่ากับรากราว 1.5 ซม.ความยาวมีการถ่ายโอนลงบนสื่อใหม่ที่เสริม ด้วย 30 มม. (NH4) 2SO4จัดเรียงในแถว และ gravistimulated หน้าจอสำหรับ NH4+-ฟีสำคัญของราก gravitropism ดัด gravitropicระหว่าง h 72 ต่อถูกจับ และ putativeเลือกสายพันธุ์ มีการตอบสนองลดลง gravitropic และโอนย้ายในดิน เพื่อเติบโตครบกำหนด และ self-fertilize หนึ่งของเหล่านี้ putative สายพันธุ์ เรียกว่า gsa-1 ถูกเลือกสำหรับการวิเคราะห์Gsa 1 mutant homozygous ของ M4 ถูก backcrossed กับการป่าชนิด (คอลัมน์-0) อีกสองครั้งเพื่อเอาการเกิดจาก mutagenesis กลายพันธุ์ไม่ได้เชื่อมโยง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแยกของ GSA-1
กลายพันธุ์ทั้งหมด5160 T-DNA สายการกลายพันธุ์แทรกในเทือกเขา-0
พื้นหลังตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Zuo et al, 2000;. Zhang
et al, 2005;.. Li et al, 2012) ถูกนำมาใช้ใน GSA-1 แยก Fiveday-
ต้นกล้ากับคราก 1.5
เซนติเมตรยาวถูกถ่ายโอนไปยังสื่อใหม่เสริมด้วย30 มม (NH4) 2SO4,
จัดให้อยู่ในแถวแล้ว gravistimulated ไปยังหน้าจอสำหรับ NH4
+ -
phenotypes ไว gravitropism ราก gravitropic
ดัดในช่วงต่อไป72 ชั่วโมงก็ถูกจับและสมมุติกลายพันธุ์กับการตอบสนอง gravitropic ลดลงได้รับการคัดเลือกและโอนไปยังดินที่จะเติบโตจนครบกำหนดและเพื่อตัวเองปุ๋ย หนึ่งของการกลายพันธุ์สมมุติเหล่านี้เรียกว่า GSA-1 ได้รับเลือกสำหรับการวิเคราะห์. homozygous M4 กลายพันธุ์ GSA-1 ปรับปรุงพันธุ์กับป่าประเภทของผู้ปกครอง(Col-0) อีกสองครั้งเพื่อเอาการกลายพันธุ์ที่เกิดจากการยกเลิกการเชื่อมโยงฉับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกของ
กลายพันธุ์ gsa-1 ทั้งหมด 5160 t-dna insertional กลายพันธุ์สายใน col-0
พื้นหลัง , ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( จั่ว et al . , 2000 ; จาง
et al . , 2005 ; Li et al . , 2012 ) , ถูกใช้ใน gsa-1 แยก fiveday -
แก่ต้นกล้าด้วยราก C 1.5 ซม. ยาวถูกเติมลงใหม่

2so4 30mm ( NH4 ) , เรียงกันเป็นแถว แล้ว gravistimulated หน้าจอสำหรับ NH4
-
ความไวของ gravitropism เกิดราก ที่ดัด gravitropic
ช่วงต่อไปนี้ 72 ชั่วโมงก็ถูกจับ และสายพันธุ์ ซึ่งมีการลด gravitropic

ย้ายไปทำการเลือกดินปลูกเก็บเกี่ยวเพื่อตนเองและปุ๋ย หนึ่ง
สายพันธุ์ซึ่งเหล่านี้เรียกว่า gsa-1 ได้รับเลือกในการวิเคราะห์ ส่วน gsa-1 M4

backcrossed กลายพันธุ์เป็นกับผู้ปกครองของ ( col-0 ) อีก 2 ครั้ง เพื่อเอา
ยกเลิกการเชื่อมโยงการกลายพันธุ์ที่เกิดจากการ .