. Hydrolysis of methyl mandelateA m

. Hydrolysis of methyl mandelate
A mass of 200 mg of the immobilized preparations was added to 2 mL of 10 mM
substrate in different concentrations of buffer (25–500 mM of sodium phosphate
buffer) at pH 7 and 25 ◦C under continuous stirring. The conversion degree was
analyzed by RP-HPLC (Spectra Physic SP 100 coupled with an UV detector SpectraPhysic
SP 8450) using a Kromasil C18 (15 cm × 0.46 cm) column. Samples (20 L)
were injected and eluted at a flow rate of 2.0 mL/min using acetonitrile/10 mM
ammonium acetate (20:80, v/v) at pH 3.2 as mobile phase and UV detection was
performed at 230 nm. The acid has a retention time of 2.5 min while the ester has a
retention time of 6 min. One unit of enzyme activity was defined as the amount of
enzyme necessary to produce 1 mol of mandelic acid per minute under the conditions
described above. Activity was determined by triplicate with a maximum
conversion of 10–15%, and data are given as average values.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. ไฮโตรไลซ์ methyl mandelateมวลของ mg 200 ของเตรียมเอนไซม์ถูกเพิ่ม 2 mL 10 มม.พื้นผิวในความเข้มข้นแตกต่างกัน (25 – 500 มม.ของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์บัฟเฟอร์) ที่ pH 7 และ 25 ◦C ภายใต้กวนอย่างต่อเนื่อง ระดับแปลงได้วิเคราะห์ โดย RP-HPLC (แรมสเป็คตราเปลี่ยน SP 100 ควบคู่กับการตรวจจับ UV SpectraPhysicSP 8450) ใช้คอลัมน์ Kromasil C18 (15 ซม.× 0.46 ซม) ตัวอย่าง (20 L)ฉีด และ eluted ที่อัตราการไหลของ 2.0 mL/min ใช้ acetonitrile/10 มม.acetate แอมโมเนีย (20:80, v/v) ที่ pH 3.2 เป็นเฟสเคลื่อนที่และตรวจจับ UV ได้230 nm กรดมีเวลาเก็บข้อมูล 2.5 นาทีในขณะเอสมีการเวลาเก็บข้อมูล 6 นาที หน่วยหนึ่งของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 โมลของกรด mandelic ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขอธิบายไว้ข้างต้น กิจกรรมถูกกำหนด โดย triplicate มากที่สุดแปลง 10-15% และข้อมูลที่ได้เป็นค่าเฉลี่ย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. การย่อยสลายของเมธิล mandelate
มวลของ 200 มก. ในการเตรียมการตรึงถูกบันทึกอยู่ใน 2 มิลลิลิตร 10 มม
สารตั้งต้นในระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกันของบัฟเฟอร์ (25-500 มิลลิของโซเดียมฟอสเฟต
บัฟเฟอร์) ที่ pH 7 และ 25 ◦Cภายใต้กวนอย่างต่อเนื่อง การศึกษาระดับปริญญาการแปลงได้รับการ
วิเคราะห์โดย RP-HPLC (Spectra ฟิสิกส์ SP 100 ควบคู่ไปกับการตรวจจับรังสียูวี SpectraPhysic
SP 8450) โดยใช้ Kromasil C18 (15 ซม. × 0.46 ซม.) คอลัมน์ ตัวอย่าง (20 ลิตร)
ฉีดและชะที่อัตราการไหล 2.0 มิลลิลิตร / นาทีใช้ acetonitrile / 10 มม
อะซิเตตแอมโมเนียม (20:80, v / v) ที่ pH 3.2 เป็นเฟสเคลื่อนที่และการตรวจสอบรังสียูวีได้รับการ
ดำเนินการที่ 230 นาโนเมตร กรดมีเวลาเก็บกัก 2.5 นาทีในขณะที่เอสเตอร์มี
เวลาเก็บของ 6 นาที หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นปริมาณของ
เอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 โมลของกรด mandelic ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขที่
ระบุไว้ข้างต้น กิจกรรมถูกกำหนดโดยเพิ่มขึ้นสามเท่าด้วยสูงสุด
แปลงประมาณ 10-15% และข้อมูลที่จะได้รับเป็นค่าเฉลี่ย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. การย่อยสลายของเมทิล mandelate
มวล 200 มิลลิกรัม ต่อด้วยการเตรียมเพิ่ม 2 ml ( 10 mm
ในระดับความเข้มข้นของบัฟเฟอร์ ( 25 – 500 มม. ของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7
) และ 25 ◦อย่างต่อเนื่องภายใต้อุณหภูมิกวน การแปลงข้อมูลโดย degree
ๆ ( สเปกตรัมฟิสิกส์ SP 100 คู่กับเครื่องตรวจจับรังสียูวี spectraphysic
SP 8450 ) โดยใช้ kromasil c18 ( × 15 ซม. 046 ซม. ) คอลัมน์ ตัวอย่าง ( 20 ลิตร ) ฉีดตัวอย่าง
และที่อัตราการไหล 2 มล. / นาทีใช้ไนอะซิเตท 10 มิลลิเมตร ( น้ำ /
: v / v ) ที่ pH 3.2 เป็นเฟสเคลื่อนที่และ UV สามารถ
แสดงที่ 230 nm . กรดมี retention time ของ 2.5 นาทีในขณะที่เอสเทอร์มี
เวลา 6 นาที ในหนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดไว้เป็นจํานวน
เอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 โมลของการวัดปริมาณกรดต่อนาทีภายใต้เงื่อนไข
ที่อธิบายข้างต้น กิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยทำสำเนาสามฉบับ ด้วยการแปลงสูงสุด
10 – 15% , และข้อมูลที่ได้รับเป็นค่าเฉลี่ย .