An established experimental procedure for analyzing the TAC
values of Citrus fruits using the on-line HPLC-FRSD system was as
follows: (1) Sample preparation. The solid dried material
(0.250 mg–0.625 mg) or juice (2.00 mL) of Citrus sample was transferred
into a 50 mL falcon tube added 80% methanol to 25 mL,
mixed well and the tube was put into a shaker overnight at
25 C. The extracts were centrifuged at 5000 g for 10 min on the
next day. The supernatant was then filtered through a 0.22 lm
organic membrane before analysis. (2) Elution of phenolic compounds
using HPLC system. 25 lL of each sample was injected into
the on-line HPLC-FRSD system. The positive chromatographic
peaks of compounds in the samples were separated by Waters
e2695 HPLC system with a Waters X-Terra MS C18 guard column
(3.9 mm 20 mm, 5 lm). Water/acetic acid (99.9:0.1, v/v) and
HPLC-grade methanol were used as A and B mobile phases, respectively.
Elution conditions was 0–5 min of 37% A and 63% B (isocratic
elution) at a flow rate of 0.91 mL min1 using a detector,
Waters 2998 PAD detector array at 245 and 283 nm wavelengths
simultaneously. The temperature of the column oven was
maintained at 30 C. (3) The bleaching of free racial in post-column
system. The phenolic compounds eluted from the HPLC system
were reacted with the free radical solutions in post-column
system. For the on-line DPPH radical scavenging assay, the flow
rate of DPPH free radical solution reagent (0.20 mM) was set at
0.80 mL min1, and the induced bleaching was detected as a negative
peak at 517 nm by the Waters 2489 UV/Visible detector. For
the on-line ABTS radical scavenging assay, the flow rate of ABTS
free radical solution reagent (an absorbance of 0.70 ± 0.02 AU at
400 nm) was set to be 0.80 mL min1, and the induced bleaching
was monitored as a negative peak at 400 nm by the Waters 2489
UV/Visible detector. The temperature of the on-line post-column
system was maintained at 30 C. The whole running time for each
sample was 5 min. (4) Quantification of TAC values of the samples.
The TAC values of samples were all quantified by reference L-ascorbic
acid calibration curve and expressed as L-ascorbic acid equivalent
antioxidant capacity (AAEAC) [lgmg1 Dry Weight (DW) or
lg mL1 Fresh Weight (FW)].
ขั้นตอนการทดลองที่จัดตั้งขึ้นเพื่อการวิเคราะห์ TAC
คุณค่าของผลไม้เช่นมะนาวโดยใช้ระบบ HPLC-FRSD On-line เป็น
ดังนี้ (1) การเตรียมตัวอย่าง วัสดุที่แห้งแข็ง
(0.250 มิลลิกรัม-0.625 มก.) หรือน้ำผลไม้ (2.00 มิลลิลิตร) ของกลุ่มตัวอย่างส้มถูกย้าย
ลงในหลอดเหยี่ยวมิลลิลิตร 50 เพิ่มเมทานอล 80% ถึง 25 มิลลิลิตร
ผสมดีและหลอดถูกใส่ลงไปในเครื่องปั่นค้างคืนที่
25? C. สารสกัดถูกหมุนเหวี่ยงที่ 5000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีใน
วันถัดไป ใสถูกกรองแล้วผ่าน 0.22 LM
เยื่ออินทรีย์ก่อนที่จะวิเคราะห์ (2) การชะของสารประกอบฟีนอล
โดยใช้ระบบ HPLC 25 lL ของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกฉีดเข้าไปใน
ระบบ HPLC-FRSD ในบรรทัด โครมาบวก
ยอดของสารในกลุ่มตัวอย่างที่ถูกแยกออกจากน้ำ
e2695 ระบบ HPLC กับวอเตอร์ X-Terra MS C18 คอลัมน์ยาม
(3.9 มม? 20 มิลลิเมตร, 5 LM) น้ำ / กรดอะซิติก (99.9: 0.1 v / v) และ
. HPLC เกรดเมทานอลถูกนำมาใช้เป็นมือถือและขั้นตอน B ตามลำดับ
เงื่อนไขการชะเป็น 0-5 นาที 37% และ 63% B (Isocratic
ชะ) ที่ อัตรา 0.91 มิลลิลิตรนาทีไหล? 1 โดยใช้เครื่องตรวจจับ,
น้ำ 2998 พันธมิตรอาร์เรย์เครื่องตรวจจับที่ 245 และ 283 นาโนเมตรความยาวคลื่น
พร้อมกัน อุณหภูมิของเตาอบคอลัมน์ที่ได้รับการ
เก็บรักษาไว้ที่ 30 องศาเซลเซียส (3) การฟอกสีของฟรีเชื้อชาติในการโพสต์คอลัมน์
ระบบ สารประกอบฟีนอชะจากระบบ HPLC
ได้รับการตอบสนองด้วยการแก้ปัญหาอนุมูลอิสระในการโพสต์คอลัมน์
ระบบ สำหรับในบรรทัด DPPH ทดสอบต้านอนุมูลไหล
อัตรา DPPH ฟรีน้ำยาแก้ปัญหาความรุนแรง (0.20 มิลลิ) ตั้งอยู่ที่
0.80 มลนาที 1, และการฟอกเหนี่ยวนำที่ถูกตรวจพบว่าเป็นเชิงลบ
สูงสุดที่ 517 นาโนเมตรโดยน้ำ 2489 ยูวี / เครื่องตรวจจับที่มองเห็นได้ สำหรับ
ในบรรทัด ABTS ทดสอบต้านอนุมูล, อัตราการไหลของ ABTS
ฟรีน้ำยาแก้ปัญหาความรุนแรง (การดูดกลืนแสง 0.70 ± 0.02 เหรียญออสเตรเลียที่
400 นาโนเมตร) ที่ถูกกำหนดให้เป็น 0.80 มิลลิลิตรนาที 1, และการฟอกเหนี่ยวนำให้
ได้รับการตรวจสอบเป็นเชิงลบ จุดสูงสุดที่ 400 นาโนเมตรโดยน้ำ 2,489
UV / เครื่องตรวจจับที่มองเห็นได้ อุณหภูมิของโพสต์คอลัมน์ On-line
ระบบได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 30 องศาเซลเซียส เวลาทำงานทั้งสำหรับแต่ละ
ตัวอย่างเป็นเวลา 5 นาที (4) ปริมาณของค่า TAC ของกลุ่มตัวอย่าง.
ค่า TAC ของกลุ่มตัวอย่างถูกวัดโดย L-ซีอ้างอิง
กรดโค้งสอบเทียบและแสดงเป็น L-ascorbic acid เทียบเท่า
สารต้านอนุมูลอิสระ (AAEAC) [lgmg 1 แห้งน้ำหนัก (DW) หรือ
LG มิลลิลิตร 1 น้ำหนักสด (FW)]
การแปล กรุณารอสักครู่..