The following primers were used in

The following primers were used in 3’-RACE PCR to screen for defensins in M. menardi hemocytes together with the universal primer UPM: Spider def fwd 1, Spider def fwd 2, Spider def fwd 3, C.salei def fwd 1, C.salei def fwd 2, C.salei def fwd 3 and Polybetes def fwd. PCR with 1/100th of the synthesized cDNA of M. menardi. was performed with the following program: 5 min at 94°C, followed by 5 cycles of 94°C for 30 s, 51°C for 30 s, 72°C for 1 min, 5 cycles of 94°C for 30 s, 50°C for 30 s, 72°C for 1 min, 5 cycles of 94°C for 30 s, 49°C for 30 s, 72°C for 1 min, 5 cycles of 94°C for 30 s, 48°C for 30 s, 72°C for 1 min, 5 cycles of 94°C for 30 s, 47°C for 30 s, 72°C for 1 min, 5 cycles of 94°C for 30 s, 46°C for 30 s, 72°C for 1 min, and a final elongation at 72°C for 7 min . Candidate PCR products were run on a 0.7% agarose gel containing 0.5 ng ethidium bromide /ml. Single bands were cut out using a scalpel, and DNA was extracted from the gel using a MinElute® Gel Extraction Kit. Half of the extracted DNA was then used as template in another round of PCR, using the same primers and program as before. Products from this “nested” PCR were purified using the MinElute® PCR Purification Kit.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไพรเมอร์ต่อไปนี้ถูกนำมาใช้ใน 3'-RACE PCR ไปยังหน้าจอสำหรับ defensins ในเอ็ม Menardi เซลล์เม็ดเลือดร่วมกับไพรเมอร์สากล UPM: แมงมุม def FWD 1 แมงมุม def FWD 2 แมงมุม def FWD 3 C.salei def FWD 1, C .salei def FWD 2 C.salei def FWD 3 และ Polybetes def FWD PCR ที่มี 1/100 ของสังเคราะห์ยีนของเอ็ม Menardi ได้ดำเนินการกับโปรแกรมต่อไปนี้: 5 นาทีที่ 94 ° C ตามด้วย 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 51 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 50 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 49 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 48 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 47 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 46 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและการยืดตัวสุดท้ายที่ 72 ° C เป็นเวลา 7 นาที ผู้สมัครผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการทำงานบนเจล agarose 0.7% มีจำนวน 0.5 ethidium โบรไมด์ / ml วงดนตรีเดียวที่ถูกตัดออกโดยใช้มีดผ่าตัดและดีเอ็นเอที่สกัดจากเจลโดยใช้ชุดMinElute®เจลสกัด ครึ่งหนึ่งของดีเอ็นเอที่สกัดได้เมื่อนำมาใช้เป็นแม่แบบในรอบ PCR อื่นโดยใช้ไพรเมอร์ที่เหมือนกันและโปรแกรมเหมือนก่อน ผลิตภัณฑ์จากนี้ "ซ้อน" PCR ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้MinElute® PCR บริสุทธิ์ชุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไพรเมอร์ต่อไปนี้ถูกนำมาใช้ใน 3'-RACE PCR ไปยังหน้าจอสำหรับ defensins ในเอ็ม Menardi เซลล์เม็ดเลือดร่วมกับไพรเมอร์สากล UPM: แมงมุม def FWD 1 แมงมุม def FWD 2 แมงมุม def FWD 3 C.salei def FWD 1, C . .salei def FWD 2 C.salei def FWD 3 และ Polybetes FWD def PCR กับ 1/100 ของสังเคราะห์ยีนของเอ็ม Menardi ได้ดำเนินการกับโปรแกรมต่อไปนี้: 5 นาทีที่ 94 ° C ตามด้วย 5 รอบ 94 ° C นาน 30 วินาที, 51 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที ,. 50 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 49 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 48 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 47 ° C นาน 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที, 5 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 46 ° C เป็นเวลา . 30 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและการยืดตัวสุดท้ายที่ 72 ° C เป็นเวลา 7 นาทีผู้สมัครผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการทำงานบนเจล agarose 0.7% มีจำนวน 0.5 ethidium โบรไมด์ / ml วงดนตรีเดี่ยวถูกตัดออกโดยใช้มีดผ่าตัด, และดีเอ็นเอที่สกัดจากเจลโดยใช้เจลสกัดMinElute®ชุดครึ่งหนึ่งของการสกัดดีเอ็นเอถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบในรอบ PCR อื่นโดยใช้ไพรเมอร์ที่เหมือนกันและโปรแกรมก่อนผลิตภัณฑ์จากนี้ "ซ้อน" PCR ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ MinElute® PCR บริสุทธิ์ชุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไพรเมอร์ต่อไปนี้ถูกนำมาใช้ใน 3 '- RACE PCR ไปยังหน้าจอสำหรับ defensins ในเอ็ม Menardi เซลล์เม็ดเลือดร่วมกับสากล ประถมศึกษา UPM: แมงมุม def FWD def 1 แมงมุม FWD 2 แมงมุม def, FWD 3 C.salei def, FWD 1 C.salei def, FWD 2 C.salei def, FWD 3 และ Polybetes def FWD PCR ที่มี 1/100 ของสังเคราะห์ยีนของเอ็ม Menardi ได้ดำเนินการกับโปรแกรมดังต่อไปนี้: 5 นาที ที่ 94 °, C ตามด้วย 5 รอบ 94 ° C, 30 วินาที 51 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที 5 รอบ 94 ° C, 30 วินาที 50 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที 5 รอบ ,, ของ 94 ° C, 30 วินาที 49 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที 5 รอบของ 94 ° C, 30 วินาที 48 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที 5 รอบของ 94 องศาเซลเซียสสำหรับ, 30 วินาที 47 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที 5 รอบ 94 ° C, 30 วินาที 46 ° C สำหรับ 30 วินาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีและการยืดตัวสุดท้ายที่ 72 ° C เป็นเวลา 7 นาที ผู้สมัครผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการทำงานบนเจล agarose 0.7% มีจำนวน 0.5 ethidium โบรไมด์ / ml วงดนตรีเดียวที่ถูกตัดออกโดยใช้มีดผ่าตัดและดีเอ็นเอถูกสกัดจากเจลโดยใช้ MinElute apertium เจลสกัด Kit ครึ่งหนึ่งของดีเอ็นเอที่สกัดได้เมื่อนำมาใช้เป็นแม่แบบในรอบอื่นของ PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่เหมือนกันและโปรแกรมเป็น ก่อนที่ผลิตภัณฑ์จากนี้ "ซ้อน". PCR ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ MinElute apertium PCR บริสุทธิ์ชุด