AbstractExcessive inflammatory resp

Abstract

Excessive inflammatory response may delay the regeneration and damage the normal muscle fibers upon myoinjury. It would be important to be able to attenuate the inflammatory response and decrease inflammatory cells infiltration in order to improve muscle regeneration formation, resulting in better muscle functional recovery after myoinjury. This study was undertaken to explore the role of Nitric oxide (NO) during skeletal muscle inflammatory process, using a mouse model of Notexin induced myoinjury. Intramuscular injection (tibialis anterior, TA) of Notexin was performed for preparing mice myoinjury. NO synthase inhibitor (L-NAME) or NO donor (SNP) was intraperitoneally injected into model mice. On day 4 and 7 post-injury, expression of muscle-autoantigens and toll-like receptors (TLRs) was evaluated from muscle tissue by qRT-PCR and Western Blot; the intramuscular infiltration of monocytes/macrophage (CD11b+ or F4/80+ cells), CD8+ T cell (CD3ε+CD8α+), apoptotic cell (CD11b+caspase3+), and MHC-I molecule H-2Kb-expressing myofibers in damaged muscle were assessed by imunoflourecence analysis; the mRNAs expression of cytokines and chemokines associated with the preferential biological role during the muscle damage-induced inflammation response, were assessed by qRT-PCR. We detected the reduced monocytes/macrophages infiltration, and increased apoptotic cells in the damaged muscle treated with SNP comparing to untreatment. As well, SNP treatment down-regulated mRNA and protein levels of muscle autoantigens, TLR3, and mRNA levels of TNF-α, IL-6, MCP-1, MCP-3, and MIP-1α in damaged muscle. On the contrary, L-NAME induced more severe intramuscular infiltration of inflammatory cells, and mRNA level elevation of the above inflammatory mediators. Notably, we observed an increased number of MHC-I (H2-Kb) positive new myofibers, and of the infiltrated CD8+ T cells in damaged muscle at the day 7 after L-NAME treatment. The result herein shows that, NO can act as an endogenous anti-inflammatory molecule during the ongoing muscle inflammation. Our finding may provide new insight to optimize NO-based therapies for improving muscle regeneration after myoinjury.

Keywords: Nitric Oxide, inflammation, skeletal muscle

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อตอบสนองการอักเสบมากเกินไปอาจชะลอการฟื้นฟูและสร้างความเสียหายให้เส้นใยกล้ามเนื้อปกติเมื่อ myoinjury มันจะเป็นสิ่งสำคัญที่จะสามารถที่จะเจือจางตอบสนองการอักเสบและลดการอักเสบของเซลล์แทรกซึมเพื่อปรับปรุงรูปแบบการฟื้นฟูกล้ามเนื้อผลในการกู้คืนการทำงานของกล้ามเนื้อดีขึ้นหลังจาก myoinjury การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสำรวจบทบาทของไนตริกออกไซด์ (NO) ในระหว่างกระบวนการอักเสบกล้ามเนื้อโครงร่างโดยใช้รูปแบบเมาส์ของ Notexin ชักนำ myoinjury ฉีดเข้ากล้ามเนื้อ (tibialis ล่วงหน้า, TA) ของ Notexin ได้ดำเนินการเตรียมความพร้อมสำหรับหนู myoinjury ยับยั้ง synthase NO (L-NAME) หรือไม่ผู้บริจาค (SNP) ถูกฉีดเข้าไปในช่องท้องหนูรูปแบบ ในวันที่ 4 และ 7 โพสต์ได้รับบาดเจ็บ, การแสดงออกของกล้ามเนื้อและ autoantigens รับโทรเช่น (TLRs) ได้รับการประเมินจากเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อโดย qRT-PCR และตะวันตก Blot; แทรกซึมเข้ากล้ามเนื้อของ monocytes / macrophage (CD11b + หรือ F4 / 80 + เซลล์), CD8 + T cell ที่ (CD3ε + CD8α +) เซลล์ที่เกิด apoptosis (CD11b + caspase3 +) และ MHC-I โมเลกุล H-2Kb-แสดง myofibers ในกล้ามเนื้อได้รับความเสียหายได้ การประเมินโดยการวิเคราะห์ imunoflourecence; การแสดงออก mRNAs ของ cytokines และ chemokines ที่เกี่ยวข้องกับบทบาททางชีวภาพที่พิเศษในระหว่างการตอบสนองต่อการอักเสบความเสียหายที่เกิดขึ้นกล้ามเนื้อได้รับการประเมินโดย qRT-PCR เราตรวจพบ monocytes ลด / แทรกซึมขนาดใหญ่และเพิ่มเซลล์ที่เกิด apoptosis ในกล้ามเนื้อได้รับความเสียหายได้รับการรักษาด้วย SNP เมื่อเทียบกับ untreatment รวมทั้งการรักษา SNP ควบคุมลง mRNA และระดับโปรตีนของ autoantigens กล้ามเนื้อ TLR3 และระดับ mRNA ของ TNF-α, IL-6, MCP-1, MCP-3 และ MIP-1αในกล้ามเนื้อได้รับความเสียหาย ในทางตรงกันข้าม, L-NAME เหนี่ยวนำให้เกิดการแทรกซึมเข้ากล้ามรุนแรงมากขึ้นของเซลล์อักเสบและความสูงระดับ mRNA ของผู้ไกล่เกลี่ยการอักเสบดังกล่าวข้างต้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งเราสังเกตจำนวนที่เพิ่มขึ้นของ MHC-I (H2-Kb) myofibers ใหม่บวกและแทรกซึมเข้าไปอยู่ในเซลล์ CD8 + T ในกล้ามเนื้อได้รับความเสียหายในวันที่ 7 หลังการรักษา L-NAME ผลที่นี้แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถทำหน้าที่เป็นโมเลกุลต้านการอักเสบภายนอกในระหว่างการอักเสบของกล้ามเนื้ออย่างต่อเนื่อง การค้นพบของเราอาจให้ข้อมูลเชิงลึกใหม่ที่จะเพิ่มประสิทธิภาพการรักษาที่ไม่ใช้ในการปรับปรุงการฟื้นฟูกล้ามเนื้อหลัง myoinjury. คำสำคัญ: ไนตริกออกไซด์อักเสบกล้ามเนื้อโครงร่าง