Incubate the ligation mixture at ro

Incubate the ligation mixture at room temperature (22°C) for 1 hour. If maximal number of
transformants is required, incubate overnight at 4°C.

Note. During the ligation prepare competent E.coli cells using the provided set of solutions for preparation
of competent cells – TransformAid Bacterial Transformation Kit. To enable blue/white screening, choose
only strains having lacZ∆M15 mutation, for example, XL1-Blue, ER1727, JM109 or other. Refer to
transformation protocols on next page.

Use 2.5 µl of the ligation mixture directly for bacterial transformation.
Note. Keep the ligation mixture at -20°C if transformation is postponed. Thaw on ice and mix carefully
before transformation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ฟักผสมไข่ที่อุณหภูมิห้อง (22° C) 1 ชั่วโมง ถ้าสูงสุดจำนวน
transformants จำเป็น ฟักค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียส

หมายเหตุ ระหว่างไข่การเตรียมเซลล์ระบบอำนาจที่ใช้ชุดโซลูชั่นสำหรับการเตรียม
อำนาจเซลล์ – TransformAid แบคทีเรียการแปลงชุด เมื่อต้องการเปิดใช้งานการคัดกรองสีน้ำเงิน/ขาว
เฉพาะสายพันธุ์ที่มีการกลายพันธุ์ lacZ∆M15 เช่น XL1 บลู ER1727, JM109 หรืออื่น ๆ ถึง
โพรโทคอลการแปลงหน้าถัดไป

ใช้ 2.5 µl ของส่วนผสมไข่โดยตรงสำหรับการเปลี่ยนแปลงจากแบคทีเรีย
หมายเหตุ เก็บส่วนผสมไข่ที่-20 ° C ถ้าเลื่อนการเปลี่ยนแปลง ทรานบนน้ำแข็ง และส่วนผสมอย่าง
ก่อนแปลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กกส่วนผสม ligation ที่อุณหภูมิห้อง (22 ° C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ถ้าจำนวนสูงสุดของ
transformants จะต้องบ่มค้างคืนที่ 4 ° C. มีหมายเหตุ ในระหว่างการเตรียมความพร้อม ligation E.coli เซลล์สามารถใช้ชุดให้ของโซลูชั่นสำหรับการเตรียมความพร้อมของเซลล์อำนาจ - TransformAid แบคทีเรียแปลงชุด เพื่อให้สีฟ้า / สีขาวคัดกรองเลือกสายพันธุ์เท่านั้นที่มีการกลายพันธุ์lacZΔM15เช่น XL1 ฟ้า, ER1727, JM109 หรืออื่น ๆ อ้างถึงโปรโตคอลการเปลี่ยนแปลงในหน้าถัดไปใช้ 2.5 ไมโครลิตรส่วนผสม ligation โดยตรงสำหรับการเปลี่ยนแปลงของแบคทีเรียหมายเหตุ เก็บส่วนผสม ligation ที่ -20 ° C ถ้าการเปลี่ยนแปลงถูกเลื่อนออกไป ละลายน้ำแข็งและผสมอย่างระมัดระวังก่อนที่การเปลี่ยนแปลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บ่มที่อุณหภูมิห้อง ( Ligation ผสม 22 ° C ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ถ้าจำนวนสูงสุดของพลาสมิด
ต้องบ่มค้างคืนที่ 4 ° C .

หมายเหตุ ในช่วงการเตรียมเซลล์ E.coli Ligation เชี่ยวชาญการใช้ชุดของโซลูชั่นสำหรับการเตรียมเซลล์แบคทีเรียและ transformaid
เชี่ยวชาญการแปลงชุด เปิดฟ้า / ขาว คัดเลือก
สายพันธุ์มีเพียง lacz ∆ M15 การกลายพันธุ์ เช่น xl1 สีฟ้า er1727 ที่มี , หรืออื่น ๆ หมายถึงการแปลงโปรโตคอล
ในหน้าถัดไป

ใช้ 2.5 µ L ของ Ligation ผสมโดยตรงสำหรับแบคทีเรียแปลงร่าง
หมายเหตุ เก็บที่อุณหภูมิ - 20 องศา C Ligation ผสมถ้าเปลี่ยนแปลงจะเลื่อนออกไป ละลายน้ำแข็งและส่วนผสมอย่างละเอียด

ก่อนการแปลง