Quantitative real-time pcrCotton fl

Quantitative real-time pcr
Cotton flowers were harvested at different time points for flavonoind gene expression analysis. Rna extraction war performed following the procedure of spectrum plant total rna kit of sigma-aldrich(usa), cdna synthesis and Qrt-pgr were performed as previously described (48), with cotton ubiquitin gene ubq7 as the reference gene 49 . flavonoid gene sequences were obtained from the public NCBI unigene data bank and the cotton d genome sequence (http://www.phytozome.com/).
The expression of all genes was normalized to ubq7. Three biological replicates were performed.
The error bars represent the standard deviations (sd). All primers are listed in table SI. Superscript
III reverse transcription kits were from invitrogen (garlsbad,USA).reagents(iTaq SYBR Green supermix with ROX) for real time PCR were from bio-rad (foster City, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Pcr เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ดอกฝ้ายถูกเก็บเกี่ยว ณจุดเวลาต่าง ๆ สำหรับการวิเคราะห์นิพจน์ยีน flavonoind อาร์เอ็นเอสกัดสงครามดำเนินการตามขั้นตอนของสเปกตรัมพืชอาร์เอ็นเอรวมชุดของ sigma-aldrich(usa) การสังเคราะห์ cdna และ Qrt pgr ดำเนินอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (48), กับฝ้าย ubiquitin ยีน ubq7 เป็นยีนอ้างอิง 49 ลำดับยีน flavonoid ได้รับจากสาธารณะ NCBI unigene ข้อมูลธนาคารและฝ้ายลำดับกลุ่ม d (http://www.phytozome.com/)นิพจน์ของยีนทั้งหมดที่ตามปกติจะ ubq7 เหมือนกับชีวภาพ 3 ดำเนินการแถบข้อผิดพลาดแทนส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (sd) ไพรเมอร์ทั้งหมดจะแสดงอยู่ในตารางใน ตัวยกชุดย้อน transcription III ได้จาก invitrogen (garlsbad สหรัฐอเมริกา) .reagents (iTaq supermix SYBR Green มี ROX) ในเวลาจริง PCR ได้จากไบโอราษฎร์ (เมืองฟอสเตอร์ สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชิงปริมาณแบบ real-time PCR
ดอกฝ้ายเก็บเกี่ยวที่จุดเวลาที่แตกต่างกันสำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน flavonoind สงครามสกัด RNA ที่ดำเนินการตามขั้นตอนของชุด RNA รวมพืชสเปกตรัมของ Sigma-Aldrich (USA), การสังเคราะห์ cDNA และ QRT-PGR ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (48) ด้วยผ้าฝ้าย ubiquitin ยีน ubq7 เป็นยีนอ้างอิง 49 ลำดับยีน flavonoid ที่ได้รับจากประชาชน NCBI UNIGENE ข้อมูลธนาคารและผ้าฝ้ายงลำดับจีโนม (http://www.phytozome.com/).
การแสดงออกของยีนทั้งหมดเป็นปกติ ubq7 สามซ้ำทางชีวภาพได้ดำเนินการ.
บาร์ข้อผิดพลาดที่เป็นตัวแทนของการเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) ไพรเมอร์ทั้งหมดจะถูกแสดงอยู่ในตาราง SI ยก
ที่สามชุดถอดความกลับมาจาก Invitrogen (garlsbad สหรัฐอเมริกา) .reagents (iTaq SYBR เขียว Supermix กับ ROX) สำหรับเวลาจริง PCR มาจากชีวภาพราด (อสเตอร์ซิตี้, ประเทศสหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์พีซีอาร์
ดอกฝ้ายเก็บที่จุดเวลาที่แตกต่างกันสำหรับ flavonoind การวิเคราะห์การแสดงออกของยีน . สงครามการสกัด DNA ดำเนินการตามกระบวนการของพืชสเปกตรัมทั้งหมดของซิกม่า Aldrich RNA ชุด ( USA ) , ยีนสังเคราะห์ และข้าพเจ้า pgr มีการปฏิบัติตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( 48 ) กับฝ้ายข้างนอกยีนเป็นยีน ubq7 อ้างอิง 49ฟลาโวนอยด์ยีน ลำดับที่ได้รับจากประชาชน ncbi unigene ข้อมูลธนาคารและฝ้าย D จีโนมลำดับ ( http : / / www.phytozome . com / )
การแสดงออกของทุกยีนเป็นปกติเพื่อ ubq7 . ชีววิทยา 3 ซ้ำซาก
ข้อผิดพลาดบาร์แทนส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD ) ทั้งหมดอยู่ในโต๊ะด้วยครับ ตัวยก
ชุดถอดความย้อนกลับ 3 จาก Invitrogen ( garlsbad , USA ) สารเคมี ( กลุ่มสีเขียว SYBR supermix กับ Rox ) สำหรับเวลาจริง PCR จากไบโอ ราด ( Foster City , USA ) .