We found that the apical tuft was f

We found that the apical tuft was formed by two basket-shaped cells with intracellular tubulin support structures (Figure 6C); cells with a very similar morphology, referred to as ampullary cells, have previously been described in mollusk larvae [11]. These cells persisted deep in the medial brain at later stages in the center of a massive commissural and neurosecretory neuropil (Figure 6J), and may thus represent a structural organizing center for the juvenile nervous system, as suggested for other polychaete larvae [50]. Dorsal to the ampullary tuft cells, we found another set of large cells with multiple motile cilia in a crescent-moon shape, known as crescent cells (Figure 6D). Two serotonergic cells have also been found in the apical organ region by 30 hpf [31]. Closest to the tuft was a serotonergic inter- neuron (white arrow, Figure 6D) lacking sensory den- drites. This cell was located deep in the epithelium, adjacent to an assembly of previously described sensory- neurosecretory flask-shaped cells (Figure 6E) that, mor- phologically, resemble chemosensory cells [12] (called parampullary cells in mollusks [11]). More ventral to the parampullary cells, we detected a median pair of cells bearing short, stiff and curly sensory cilia resembling mechanoreceptors (Figure 6F).
These distinctive morphologies, in conjunction with the recently established Profiling by Image Registration (PrImR) technique, enabled us to assign a molecular fin- gerprint to these cells, providing them with unique mo- lecular identities [47]. PrImR utilizes the stereotyped development of the Platynereis axonal scaffold to gener- ate in silico alignments of mRNA in situ expression pat- terns, and allows single cell co-expression analyses to be conducted [47]. Of a collection of 140 genes currently available for PrImR single cell co-expression analysis, 29 were differentially expressed in cells of the apical organ region in the 48 hpf larva. Additional file 1: Figure S5 details the PrImR-based co-expression analysis for the above-mentioned morphologically identifiable cells, namely the ventral-most serotoninergic cell (Additional file 1: Figure S5A), the parampullary sensory-neurosecretory cells (Additional file 1: Figure S5B-E), the ampullary tuft cell (Additional file 1: Figure S4F), the crescent cells (Additional file 1: Figure S5G) and the pair of puta- tive mechanoreceptors (Additional file 1: Figure S5H).
PrImR revealed unique sets of genes expressed by each of these cell types, in line with their specialized sensory- neurosecretory and neuronal characteristics. For example, as determined previously, the flask-shaped parampullary cells expresses otp (Figure 6G; Additional file 1: Figure S5B-E; and see above), mir-7 (Figure 6H) and prohormone convertase 2 (phc2) [12]. Beyond that, PrImR allowed cellular allocation of transcripts encoding neuropep- tide precursors for DLamide, FMRFamide and WLDa- mide (Figure 6I), consistent with a conserved role of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราพบว่า ปุยปลายยอดถูกก่อตั้งขึ้น โดยเซลล์สองที่รูปตะกร้าด้วย intracellular tubulin สนับสนุนโครงสร้าง (รูปที่ 6C); เซลล์ที่ มีสัณฐานวิทยาคล้ายกันมาก เรียกว่าเซลล์ ampullary ได้ก่อนหน้านี้ถูกอธิบายไว้ในเปลือกตัวอ่อน [11] เซลล์เหล่านี้ยังคงอยู่ลึกในสมองด้านใกล้กลางในระยะหลังกลางมีขนาดใหญ่ commissural และ neurosecretory neuropil (รูปที่ 6J), และดังนั้นจึงอาจแสดงถึงโครงสร้างการจัดศูนย์เยาวชนระบบประสาท เป็นที่แนะนำสำหรับตัวอ่อนอื่น ๆ โพลีคีทา [50] Dorsal เซลล์ ampullary ปุย เราพบเซลล์ขนาดใหญ่มีหลาย motile cilia อีกชุดในรูปร่าง เครสเซนท์มูนเป็นเครสเซนท์เซลล์ (รูปที่ 6D) เซลล์สอง serotonergic ยังได้ค้นพบในภูมิภาคอวัยวะปลายยอด 30 hpf [31] ใกล้เคียงกับปุยถูกเป็น serotonergic อินเตอร์เซลล์ประสาท (สีขาวลูกศร รูปที่ 6D) ขาด drites เดนทางประสาทสัมผัส เซลล์นี้มีอยู่ใน epithelium ลึก ติดกับแอสเซมบลีของอธิบายไว้ก่อนหน้านี้รับความรู้สึก - neurosecretory หนาวรูปเซลล์ (รูปที่ 6E) นั้น mor-phologically คล้ายกับเซลล์ chemosensory [12] (เรียกว่า parampullary เซลล์ mollusks [11]) เพิ่มเติม ventral เซลล์ parampullary เราพบคู่มัธยฐานของเซลล์ลูกปืนสั้น แข็ง และโค้งทางประสาทสัมผัส cilia คล้าย mechanoreceptors (รูป 6F)Morphologies เหล่านี้โดดเด่น ร่วมกับ Profiling ที่เพิ่งจัดตั้งขึ้นโดยเทคนิครูปทะเบียน (PrImR) เปิดใช้งานเราสามารถกำหนด gerprint ฟินโมเลกุลเซลล์เหล่านี้ ให้ มีเอกลักษณ์เฉพาะ mo-lecular [47] PrImR ใช้การพัฒนา stereotyped Platynereis นั่งร้าน axonal เพื่อ gener - กินใน silico จัดแนวของ mRNA ในซินิพจน์แพท-terns และช่วยให้เซลล์เดียววิเคราะห์นิพจน์ร่วมจะ ดำเนิน [47] ชุดยีนอยู่ PrImR เซลล์เดียวนิพจน์ร่วมวิเคราะห์ 140, 29 ได้ differentially แสดงเซลล์ภาคปลายยอดอวัยวะในหนอน hpf 48 แฟ้มเพิ่มเติม 1: S5 รูปรายละเอียดการวิเคราะห์ตาม PrImR นิพจน์ร่วมสำหรับกล morphologically ระบุเซลล์ ได้แก่สุด ventral serotoninergic เซลล์ (แฟ้มเพิ่มเติม 1: S5A รูป), เซลล์รับความรู้สึก neurosecretory parampullary (เพิ่มเติมไฟล์ 1: รูป S5B-E), เซลล์ ampullary ปุย (แฟ้มเพิ่มเติม 1: S4F รูป), เซลล์เครสเซนท์ (แฟ้มเพิ่มเติม 1: S5G รูป) และคู่ของ puta tive mechanoreceptors (เพิ่มเติมไฟล์ 1 : รูปที่ S5H)PrImR เปิดเผยเฉพาะชุดของยีนที่แสดง โดยแต่ละชนิดของเซลล์เหล่านี้ โดยเฉพาะรับรู้- neurosecretory และ neuronal ลักษณะ ตัวอย่าง ตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ เซลล์ parampullary หนาวรูปแสดง otp (รูปที่ 6G แฟ้มเพิ่มเติม 1: S5B E รูป และดูข้างต้น), มีร์-7 (รูป 6 H) และ convertase prohormone 2 (phc2) [12] นอกเหนือจากนั้น PrImR ได้รับอนุญาตจัดสรรใบแสดงผลการเข้ารหัส precursors ไทด์ neuropep DLamide, FMRFamide และ WLDa-mide (รูปที่ 6I), สอดคล้องกับบทบาทนำของโทรศัพท์มือถือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราพบว่ากระจุกปลายถูกสร้างขึ้นโดยสองเซลล์ตะกร้าที่มีรูปทรงที่มีโครงสร้างการสนับสนุน tubulin เซลล์ (รูปที่ 6C); เซลล์ที่มีสัณฐานคล้ายกันมากเรียกว่าเซลล์ ampullary ได้รับก่อนหน้านี้ที่ระบุไว้ในตัวอ่อนหอย [11] เซลล์เหล่านี้ยังคงอยู่ลึกลงไปในสมองอยู่ตรงกลางในขั้นตอนต่อไปในศูนย์กลางของ neuropil commissural และ neurosecretory ใหญ่ (รูปที่ 6J) จึงอาจเป็นตัวแทนของศูนย์การจัดระเบียบโครงสร้างระบบประสาทของเด็กและเยาวชนที่แนะนำสำหรับโพลีคีทาตัวอ่อนอื่น ๆ [50] ครีบหลังไปยังเซลล์กระจุก ampullary เราพบชุดของเซลล์ที่มีขนาดใหญ่อีกหลายเคลื่อนที่ตาในรูปทรงพระจันทร์เสี้ยวดวงจันทร์ที่เรียกว่าเซลล์เสี้ยว (รูป 6D) สองเซลล์ serotonergic ยังพบในภูมิภาคอวัยวะปลาย 30 HPF [31] ใกล้เคียงกับกระจุกเป็นเซลล์ประสาทระหว่าง serotonergic (ลูกศรสีขาวรูป 6D) ขาด drites den- ประสาทสัมผัส มือถือนี้อยู่ลึกลงไปในเยื่อบุผิวอยู่ใกล้เคียงกับการชุมนุมของก่อนหน้านี้อธิบาย neurosecretory sensory- เซลล์ขวดรูป (รูปที่ 6E) ที่ mor- phologically คล้ายเซลล์ chemosensory [12] (เรียกว่าเซลล์ parampullary ในหอย [11]) เพิ่มเติมท้องกับเซลล์ parampullary เราตรวจพบคู่เฉลี่ยของเซลล์แบริ่งระยะสั้นแข็งและหยิกประสาทสัมผัสตาคล้าย mechanoreceptors (รูป 6F).
เหล่านี้รูปร่างลักษณะที่โดดเด่นร่วมกับโปรไฟล์ที่จัดตั้งขึ้นเมื่อเร็ว ๆ นี้โดยภาพลงทะเบียน (PrImR) เทคนิคช่วยให้เรา กำหนด gerprint โมเลกุล fin- ไปยังเซลล์เหล่านี้ให้พวกเขามีตัวตนที่ไม่ซ้ำกัน lecular mo- [47] PrImR ใช้พัฒนาตายตัวของ Platynereis นั่งร้าน axonal gener- การกินในการจัดแนว silico ของ mRNA ในการแสดงออกของแหล่งกำเนิดเทิร์นแบบที่ถูกและช่วยให้เซลล์เดียวร่วมวิเคราะห์การแสดงออกจะต้องดำเนินการ [47] ชุดของยีนที่ 140 ในปัจจุบันสำหรับการวิเคราะห์เซลล์ PrImR ร่วมแสดงออกเดียว 29 ถูกแสดงออกแตกต่างกันในเซลล์ของภูมิภาคปลายอวัยวะในตัวอ่อน HPF 48 แฟ้มเพิ่มเติม 1: รูป S5 รายละเอียด PrImR ตามการวิเคราะห์ร่วมแสดงออกดังกล่าวข้างต้นเซลล์ที่สามารถระบุตัวสัณฐานคือเซลล์ที่หน้าท้องมากที่สุด serotoninergic (แฟ้มเพิ่มเติม 1: รูป S5A) เซลล์ประสาทสัมผัส neurosecretory parampullary (แฟ้มเพิ่มเติม 1 รูป S5B-E) เซลล์กระจุก ampullary (แฟ้มเพิ่มเติม 1: รูป S4F) เซลล์เสี้ยว (แฟ้มเพิ่มเติม 1: รูป S5G) และคู่ของ mechanoreceptors เชิง puta- นี้ (แฟ้มเพิ่มเติม. 1: รูป S5H)
PrImR เปิดเผย ชุดที่ไม่ซ้ำกันของยีนที่แสดงออกโดยแต่ละเซลล์ชนิดเหล่านี้สอดคล้องกับของพวกเขาเฉพาะ neurosecretory sensory- และลักษณะเส้นประสาท ตัวอย่างเช่นตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ขวดรูปเซลล์ parampullary แสดงออก OTP (รูป 6G; แฟ้มเพิ่มเติม 1: รูป S5B-E และดูด้านบน) mir-7 (รูป 6H) และ prohormone convertase 2 (phc2) [12] . นอกเหนือจากนั้น PrImR ได้รับอนุญาตจัดสรรเซลล์ของยีนที่เข้ารหัสสารตั้งต้นน้ำ neuropep- สำหรับ DLamide, FMRFamide และ WLDa- Mide (รูป 6I) สอดคล้องกับบทบาทของการอนุรักษ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราจะพบว่า จุกปลายที่ถูกสร้างขึ้นโดยตะกร้าสองรูปร่างเซลล์ที่มีโครงสร้างสนับสนุนทูบูลินภายในเซลล์ ( รูปที่ 6 ) ; เซลล์ที่มีลักษณะคล้ายคลึงกันมาก เรียกว่า ampullary เซลล์ ได้เคยอธิบายไว้ในหอยตัวอ่อน [ 11 ] เซลล์เหล่านี้ยังคงลึกในสมองอยู่ตรงกลางที่ภายหลังระยะกลางและขนาดใหญ่ commissural ฮอร์โมน neuropil ( รูป 6j )และดังนั้นจึงอาจเป็นตัวแทนของโครงสร้างการจัดศูนย์ระบบประสาทของเด็กและเยาวชนที่แนะนำสำหรับตัวอ่อนเพรียงอื่นๆ [ 50 ] ด้านหลังกับเซลล์อย่าง ampullary เราพบอีกชุดของเซลล์ขนาดใหญ่ที่มีหลายเคลื่อนที่ cilia ในเสี้ยวพระจันทร์เสี้ยวรูปร่าง เรียกว่าเซลล์ ( รูปที่ 6 ) สอง serotonergic เซลล์ ได้ถูกพบในเขตอวัยวะปลาย 30 ความถี่ [ 31 ]ใกล้ช่อคือ serotonergic ระหว่างเซลล์ประสาท ( ลูกศรสีขาวรูปที่ 6 ) ขาดการเดน - drites . เซลล์นี้ตั้งอยู่ลึกเข้าไปในเยื่อบุผิว ติดกับ การประกอบ และอธิบายก่อนหน้านี้ - ฮอร์โมนขวดรูปร่างเซลล์ ( รูปที่ 6e ) ว่า มอ - phologically จะคล้ายกับ chemosensory เซลล์ [ 12 ] ( เรียกว่า parampullary เซลล์ในหอย [ 11 ] )เพิ่มเติม ) เพื่อให้เซลล์ parampullary เราพบคู่กลางเซลล์ เรืองสั้น แข็งและหยิกและขนอ่อนคล้าย mechanoreceptors ( รูป 6F ) .
สัณฐานที่โดดเด่นเหล่านี้ ร่วมกับการจัดตั้งขึ้นเมื่อเร็ว ๆ นี้ โดยภาพการลงทะเบียน ( primr ) เทคนิคที่ช่วยให้เราเพื่อให้โมเลกุลครีบ - gerprint เซลล์เหล่านี้ให้มีเอกลักษณ์เฉพาะตัว lecular โม - [ 47 ] primr ใช้พัฒนาตายตัวของ platynereis แอกโซนาลนั่งร้านเพื่อมกราคม - กินสำหรับสองของ mRNA ใน situ สีหน้าแพท - ทำให้และช่วยให้การแสดง Co เซลล์เดียววิเคราะห์ถูกดำเนินคดี [ 47 ] ของคอลเลกชันของ 140 ยีนที่ใช้ได้สำหรับ primr เซลล์เดียว Co การแสดงออกการวิเคราะห์29 ถูกแสดงออกแตกต่างกันในเซลล์ของอวัยวะในบริเวณปลาย 48 ความถี่ดักแด้ ไฟล์ : รายละเอียดเพิ่มเติม 1 S5 รูป primr จากการวิเคราะห์ดังกล่าวข้างต้นจำกัดการแสดงออกจากเซลล์ที่ระบุ คือ ครีบท้อง serotoninergic ที่สุดเซลล์ ( เพิ่มเติมไฟล์ 1 รูป s5a ) , parampullary ประสาท ฮอร์โมน เซลล์ ( เพิ่มเติมไฟล์ 1 รูป s5b-e )เซลจุก ampullary ( เพิ่มเติมไฟล์ 1 รูป s4f ) เซลล์เสี้ยว ( เพิ่มเติมไฟล์ 1 รูป s5g ) และคู่ของ พูตา - tive mechanoreceptors ( เพิ่มเติมไฟล์ 1 รูป s5h )
primr เปิดเผยเฉพาะชุดของยีนที่แสดงออกโดยแต่ละชนิดเซลล์เหล่านี้สอดคล้องกับลักษณะทางประสาทสัมผัสของพวกเขาพิเศษ ฮอร์โมน และด . ตัวอย่างเช่นตามที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ขวดรูป parampullary เซลล์แสดง OTP ( รูป 6G ; แฟ้มเพิ่มเติม 1 : รูป s5b-e ; และดูข้างต้น ) , mir-7 ตัวเลข ( 6H ) และโปรฮอร์โมน convertase 2 ( phc2 ) [ 12 ] นอกเหนือจากที่ได้รับอนุญาตจัดสรร primr เซลล์ของใบ neuropep - ไทด์ dlamide ตั้งต้นสำหรับการเข้ารหัสและ fmrfamide wlda - ไมด์ ( รูป 6i ) ให้สอดคล้องกับบทบาทของ
อนุรักษ์