2.7.3. Determination of total antho

2.7.3. Determination of total anthocyanins

The measurement of total anthocyanin content was carried out by the pH differential method (Bouayed et al., 2011). Briefly, 1–5 mL of the phenolic extract was diluted between 2 and 100 times with 2.5 μM potassium chloride solution (pH 1) and 0.4 M sodium acetate buffer (pH 4.5), respectively. After 15 min of incubation, the absorbance was measured at 520 and 700 nm vs. the blank (water). The content of total anthocyanins was expressed as mg cyanidin 3-glucoside equivalents (CGE) per 100 g fresh weight. A molar absorption coefficient of 26,900 L mol−1 cm−1 (cyanidin 3-glucoside) was used to calculate the concentration of anthocyanins in solution.

2.8. Methods to estimate antioxidant capacity

2.8.1. ABTS-radical scavenging capacity assay

The antioxidant capacity was measured by the vitamin C equivalent antioxidant capacity (VCEAC) test (Bouayed et al., 2011). In brief, 2.5 mM ABTS and 1 mM AAPH were mixed in PBS (pH 7.4). The mixture was heated in a water bath at 68 °C for ±15 min until the colour of the mixture turned blue-green. The absorbance of this blue-green ABTS radical solution was adjusted to 0.650 ± 0.020 with additional PBS. Then, 40 μL of appropriately diluted sample or standard were mixed with 1960 μL of ABTS radical solution and incubated in the dark at 37 °C for 10 min. After 10 min, the absorption was determined at 734 nm vs. the blank. The antioxidant capacity expressed as vitamin C equivalents (VCE) per 100 g fresh weight was calculated using an external calibration curve (vitamin C, n = 5 concentrations between 0 and 0.2 mg/L).

2.8.2. Ferric-reducing antioxidant power assay (FRAP)

The FRAP method as described earlier was employed (Bouayed et al., 2011). Briefly, the FRAP reagent was prepared freshly by mixing acetate buffer (pH 3.6), 10 mM TPTZ solution in 40 mM HCl and 20 mM iron(III)chloride solution (10:1:1, v/v/v) and warmed up to 37 °C before use. Then, 50 μL of sample (appropriately diluted extracts or standard) was mixed with 1.5 mL of FRAP reagent. After an incubation of 4 min the absorbance was determined at 593 nm vs. a blank. The antioxidant capacity expressed as μmol Fe(II) per 100 g fresh weight was calculated using an external calibration curve (iron(II)sulphate solution, n = 7 concentrations between 100 and 2000 μmol).

2.9. Determination of minerals, trace elements and total soluble solids (TSS)

Samples, 500 mg (dry weight), were digested in 7 mL HNO3 (plasma pure 67–70%; SCP Science, Courtaboeuf, France) and 3 mL H2O2 (30% w/w for metal traces analysis; Fisher Scientific, Tournai, Belgium). Acid digestion was performed in Teflon tubes in a microwave oven (Anton Paar Multiwave 3000, Graz, Austria) by increasing temperature and pressure until 200 °C and 30 bar. At the end of the procedure, samples were diluted with H2O up to 25 mL and kept at 4 °C prior to analysis. Blank and certified reference material (spinach from China National Analysis Center, NCS ZC73013) were included at each mineralization cycle for quality control. Samples were analysed by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS, Perkin Elmer Elan DRC-e, Waltham, MA, USA) according to the manufacturer’s recommendations, analogous as described by Neubauer and Wolf (2004). TSS is an index of soluble sugar content in fruits. TSS (°Brix) in plum varieties was determined with a refractometer (ABBE Mark III, Reichert, Seefeld, Germany), similar as described earlier (Javanmardi & Kubota, 2006).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7.3 การกำหนดรวม anthocyaninsวัดมีโฟเลทสูงรวมเนื้อหาถูกดำเนิน โดย pH แตกต่างวิธีการ (Bouayed et al., 2011) สั้น ๆ 1 – 5 mL ของสารสกัดฟีนอถูกผสม ระหว่าง 2 และ 100 เท่ากับ 2.5 μM โพแทสเซียมคลอไรด์ solution (pH 1) 0.4 M โซเดียม acetate บัฟเฟอร์ (pH 4.5), ตามลำดับ หลังจาก 15 นาทีของคณะทันตแพทยศาสตร์ absorbance ที่ถูกวัดที่ 520 และ 700 nm เทียบกับว่างเปล่า (น้ำ) เนื้อหาของ anthocyanins รวมถูกแสดงเป็นมิลลิกรัม cyanidin เทียบเท่า 3 glucoside (CGE) ต่อน้ำหนักสด 100 กรัม สัมประสิทธิ์สบดูดซึมเป็นของ cm−1 mol−1 26,900 L ที่ (cyanidin 3 glucoside) ถูกใช้เพื่อคำนวณความเข้มข้นของ anthocyanins ในโซลูชัน2.8. วิธีการประเมินกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ2.8.1 การรเรียนรัศมี scavenging กำลังทดสอบกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระถูกวัด โดยการทดสอบกำลังการผลิต (VCEAC) สารต้านอนุมูลอิสระเทียบเท่าวิตามินซี (Bouayed et al., 2011) สังเขป รเรียน 2.5 มม.และ 1 มม. AAPH ถูกผสมใน PBS (pH 7.4) ส่วนผสมถูกอุ่นในอ่างน้ำที่ 68 ° C สำหรับ ±15 นาทีจนสีของส่วนผสมเปิดสีฟ้า-เขียว Absorbance ของเขียวรเรียนรุนแรงแก้ไขปัญหานี้มีการปรับปรุงการ± 0.650 0.020 ด้วย PBS เพิ่มเติม แล้ว μL 40 ของตัวอย่างแตกออกอย่างเหมาะสมหรือมาตรฐานที่ผสมกับ μL 1960 รุนแรงของรเรียน และ incubated ในมืดที่ 37 ° C สำหรับ 10 นาที หลังจาก 10 นาที ดูดซึมถูกกำหนดที่ 734 nm เทียบกับว่างเปล่า มีคำนวณโดยใช้การปรับเทียบภายนอกโค้งหม่อนแสดงเป็นเทียบเท่าวิตามินซี (VCE) ต่อน้ำหนักสด 100 กรัม (วิตามิน C, n = 5 ความเข้มข้นระหว่าง 0 และ 0.2 mg/L)2.8.2 การสารต้านอนุมูลอิสระที่ Ferric-ลดพลังงานวิเคราะห์ (FRAP)วิธี FRAP ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้เป็นเจ้าของ (Bouayed et al., 2011) สั้น ๆ รีเอเจนต์ FRAP ถูกปรุงสด โดยผสม acetate บัฟเฟอร์ (pH 3.6), โซลูชัน TPTZ 10 มม. 40 มม. HCl และ 20 มม.เหล็ก (III) คลอไรด์ solution (10:1:1, v/v/v) และ warmed ถึง 37 ° C ก่อนใช้ แล้ว μL 50 ของตัวอย่าง (บางส่วนแตกออกอย่างเหมาะสมหรือมาตรฐาน) ถูกผสมกับ 1.5 mL ของรีเอเจนต์ FRAP หลังจากการบ่ม 4 นาที absorbance ที่ถูกกำหนดที่ 593 nm เทียบกับช่องว่าง หม่อนแสดง μmol Fe(II) ต่อ 100 กรัมน้ำหนักสดถูกคำนวณโดยใช้การปรับเทียบภายนอกโค้ง (เหล็ก (II) ซัลเฟตโซลูชัน n =ความเข้มข้น 7 ระหว่าง 100 และ 2000 μmol)2.9 การกำหนดของแร่ ติดตามองค์ และของแข็งละลายน้ำทั้งหมด (TSS)ตัวอย่าง 500 มิลลิกรัม (น้ำหนักแห้ง), ถูกต้องใน 7 mL HNO3 (พลาสม่าบริสุทธิ์ 67 – 70% SCP วิทยาศาสตร์ Courtaboeuf ฝรั่งเศส) และ 3 mL H2O2 (30% w/w สำหรับโลหะศาสตร์วิเคราะห์ ฟิชเชอร์ วิทยาศาสตร์ เบลเยียม Tournai) กรดย่อยอาหารถูกดำเนินการในท่อเทฟลอนในเตาอบไมโครเวฟ (แอนทอน Paar Multiwave 3000 กราซ ประเทศออสเตรีย) โดยการเพิ่มอุณหภูมิและความดันจนถึง 200 ° C และ 30 บาร์ ในตอนท้ายของกระบวนการ ตัวอย่างถูกผสมกับ H2O ถึง 25 mL และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสก่อนการวิเคราะห์ วัสดุอ้างอิงที่ว่างเปล่า และได้รับการรับรอง (ผักโขมจากประเทศจีนแห่งชาติวิเคราะห์ NCS ZC73013) ถูกรวมในแต่ละรอบ mineralization สำหรับควบคุมคุณภาพ ตัวอย่างที่ analysed โดยท่านพลาโตรเมทรี (ICP MS เพอร์เอลเมอ Elan DRC-อี Waltham, MA, USA) ตามข้อเสนอแนะของผู้ผลิต คู่ตามที่อธิบายไว้ โดย Neubauer และหมาป่า (2004) TSS เป็นดัชนีของเนื้อหาละลายน้ำตาลในผลไม้ กำหนด ด้วยการ refractometer (ABBE Mark III, Reichert เฟลด์ เยอรมนี), คล้ายเป็น TSS (° Brix) ในพลัมพันธุ์อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Javanmardi & คุ 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7.3 ความมุ่งมั่นของ anthocyanins รวมการวัดเนื้อหาanthocyanin รวมได้ดำเนินการโดยวิธีการที่แตกต่างกันพีเอช (Bouayed et al., 2011) สั้น ๆ 1-5 มิลลิลิตรของสารสกัดฟีนอลถูกเจือจางระหว่าง 2 และ 100 ครั้ง 2.5 ไมครอนแก้ปัญหาโพแทสเซียมคลอไรด์ (pH 1) และ 0.4 M โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ (pH 4.5) ตามลำดับ หลังจาก 15 นาทีของการบ่มการดูดกลืนแสงที่ถูกวัดที่ 520 และ 700 นาโนเมตรเทียบกับว่างเปล่า (น้ำ) เนื้อหาของ anthocyanins รวมได้รับการแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่า cyanidin 3 glucoside (CGE) ต่อ 100 กรัมน้ำหนักสด ค่าสัมประสิทธิ์การดูดซึมโมลของ 26,900 ลิตร mol-1 ซม-1 (cyanidin 3 glucoside) ถูกนำมาใช้ในการคำนวณความเข้มข้นของ anthocyanins ในการแก้ปัญหา. 2.8 วิธีการในการประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ2.8.1 ABTS รุนแรงการทดสอบความสามารถในการขับกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระโดยวัดจากวิตามินซีสารต้านอนุมูลอิสระเทียบเท่า(VCEAC) การทดสอบ (Bouayed et al., 2011) ในช่วงสั้น ๆ 2.5 มิลลิ ABTS และ 1 มิลลิ AAPH ถูกผสมในพีบีเอส (pH 7.4) ส่วนผสมที่ถูกความร้อนในอ่างน้ำที่ 68 องศาเซลเซียส± 15 นาทีจนสีผสมหันสีเขียว การดูดกลืนแสงนี้สีเขียว ABTS วิธีการแก้ปัญหาที่รุนแรงปรับ 0.650 ± 0.020 กับพีบีเอสเพิ่มเติม จากนั้น 40 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างเจือจางเหมาะสมหรือมาตรฐานผสมกับ 1960 ไมโครลิตรของ ABTS วิธีการแก้ปัญหาที่รุนแรงและบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที หลังจาก 10 นาที, การดูดซึมได้กำหนดที่ 734 นาโนเมตรเทียบกับที่ว่างเปล่า สารต้านอนุมูลอิสระแสดงเป็นรายการเทียบเท่าวิตามินซี (VCE) ต่อ 100 กรัมน้ำหนักสดที่คำนวณโดยใช้เส้นโค้งการสอบเทียบภายนอก (วิตามิน C, n = 5 ความเข้มข้นระหว่าง 0 และ 0.2 มก. / ลิตร). 2.8.2 เฟอร์ริกลดอำนาจการทดสอบสารต้านอนุมูลอิสระ (FRAP) วิธี FRAP ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ถูกจ้างมา (Bouayed et al., 2011) สั้น ๆ , น้ำยา FRAP ถูกปรุงสดใหม่โดยการผสมบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 3.6), 10 มิลลิแก้ปัญหา TPTZ ใน 40 มิลลิ HCl และเหล็กมิลลิ 20 (III) การแก้ปัญหาคลอไรด์ (10: 1: 1, v / v / v) และอุ่นขึ้น ถึง 37 ° C ก่อนการใช้งาน จากนั้น 50 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่าง (สารสกัดเจือจางเหมาะสมหรือมาตรฐาน) ผสมกับ 1.5 มลสาร FRAP หลังจากบ่ม 4 นาทีการดูดกลืนแสงที่ถูกกำหนดที่ 593 นาโนเมตรเทียบกับที่ว่างเปล่า สารต้านอนุมูลอิสระแสดงเป็นไมโครโมลเฟ (II) ต่อ 100 กรัมน้ำหนักสดที่คำนวณโดยใช้เส้นโค้งการสอบเทียบภายนอก (เหล็ก (II) การแก้ปัญหาซัลเฟต n = 7 ความเข้มข้นระหว่าง 100 และ 2000 ไมโครโมล). 2.9 ความมุ่งมั่นของเกลือแร่ธาตุและปริมาณของแข็งที่ละลายรวม (TSS) ตัวอย่าง 500 มก. (น้ำหนักแห้ง) ถูกย่อยใน 7 มล HNO3 (พลาสม่าบริสุทธิ์ 67-70%; SCP วิทยาศาสตร์ Courtaboeuf ฝรั่งเศส) และ 3 มิลลิลิตร H2O2 (30% w / w การวิเคราะห์โลหะร่องรอย; ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์, ทัวร์, เบลเยียม) การย่อยอาหารกรดได้ดำเนินการในท่อเทฟลอนในเตาอบไมโครเวฟ (แอนตันพาร์ multiwave 3000, กราซ, ออสเตรีย) โดยการเพิ่มอุณหภูมิและความดันจนถึง 200 องศาเซลเซียสและ 30 บาร์ ในตอนท้ายของขั้นตอนตัวอย่างถูกเจือจางด้วย H2O ถึง 25 มิลลิลิตรและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ ที่ว่างเปล่าและวัสดุอ้างอิงรับรอง (ผักโขมจากประเทศจีนศูนย์การวิเคราะห์แห่งชาติ ZC73013 NCS) ถูกรวมอยู่ในแต่ละรอบแร่สำหรับการควบคุมคุณภาพ ตัวอย่างการวิเคราะห์ inductively คู่พลาสมามวลสาร (ICP-MS, เพอร์กินเอลเมอ Elan DRC-อีเคมบริดจ์สหรัฐอเมริกา) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตคล้ายคลึงตามที่อธิบาย Neubauer และหมาป่า (2004) TSS คือดัชนีปริมาณน้ำตาลที่ละลายน้ำได้ในผลไม้ TSS (° Brix) ในสายพันธุ์พลัมถูกกำหนดด้วยเครื่องวัด (ABBE Mark III, แชร์, ซีเฟลด์, เยอรมนี) ที่คล้ายกันเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้า (Javanmardi และคูโบต้า 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7.3 . วิเคราะห์ปริมาณแอนโธไซยานิน

การวัดปริมาณแอนโธไซยานินทำโดยค่า pH วิธี ( bouayed et al . , 2011 ) สั้น 1 – 5 มิลลิลิตร สารฟีนอลเจือจางระหว่าง 2 และ 100 ครั้งกับ 2.5 μ M โพแทสเซียมคลอไรด์ โซลูชั่น ( M 1 ) และ 0.4 M โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 4.5 ) , ตามลำดับ หลังจาก 15 นาทีของระยะเวลา