2.9.2. Enzymatic and non-enzymatic

2.9.2. Enzymatic and non-enzymatic endogenous antioxidant system
2.9.2.1. Thiol group content (GSH). GSH levels were determined in the
PB homogenates of liver, kidneys and brain using Ellman's reagent
(DTNB) (Ellman, 1959), with modifications. GSH solution (2.5–
500 nmol GSH mL−1
) was used as standard and absorbance was
read at 412 nm. Reduced thiol contents were expressed in nmol
GSH mg−1 protein. The protein concentration of tissue homogenates
was done by Bradford method (Bradford, 1976).
2.9.2.2. Glutathione peroxidase activity (GPx). GPx activity was quanti-
fied in PB homogenates of liver. This assay is based on the oxidation of
10 mmol reduced glutathione by glutathione peroxidase coupled to
the oxidation of 4 mmol NADPH by 1 U enzymatic activity of GR in the
presence of 0.25mmol H2O2. The rate of NADPH oxidation was monitored
by the decrease in absorbance at 365nm (Flohe & Gunzler, 1984). Results
were expressed in nmol NADPH consumed min−1 mg−1 protein.
2.9.2.3. Glutathione reductase activity (GR). GR activity in liver was measured
in PB homogenates, following the decrease in absorbance at 340nm
induced by 1 mmol oxidized glutathione in the presence of 0.1 mmol
NADPH in phosphate buffer (Carlberg & Mannervik, 1985). The results
were expressed in nmol NADPH consumed min−1 mg−1 protein.
2.9.2.4. Superoxide dismutase activity. SOD activity was analyzed in
liver, kidneys and brain. One hundred microliters of appropriately diluted
PB homogenates was added in 96-well microplate and 150 μL of
the working solution (0.1 mmol hypoxanthine, 0.07 U xanthine oxidase,
and 0.6 mmol NTB in PB in 1:1:1 proportions) and the kinetic
reaction was monitored at 560 nm (Winterbourn, Hawkins, Brian, &
Carrell, 1975). The area under the curve (AUC) was calculated and
the SOD activity was expressed as U mg−1 protein.
2.9.3. Antioxidant potential in serum
Serum was treated with ethanol:ultrapure water and 0.75 mol L−1
metaphosphoric acid (Leite et al., 2011). These extracts were used in
ORAC (Davalos et al., 2004; Prior et al., 2003) and FRAP (Benzie &
Strain, 1996) assays, carried out as described above.
2.9.4. Fecal pH
The feces samples were collected in cecum and diluted with deionized
water (1 mg mL−1
) and homogenized and it was measured
the fecal pH in a pH meter (Tecnal model TEC-5, Piracicaba, SP —
Brazil) (Asvarujanon, Ishizuka, & Hara, 2005).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9.2. สารต้านอนุมูลอิสระของ endogenous เอนไซม์ในระบบ และไม่เอนไซม์ในระบบระบบ2.9.2.1 เนื้อหากลุ่ม thiol (GSH) ระดับ GSH ถูกกำหนดในการHomogenates PB ของตับ ไต และสมองที่ใช้รีเอเจนต์ของ Ellman(DTNB) (Ellman, 1959) มีการปรับเปลี่ยน GSH โซลูชัน (2.5 –mL−1 GSH 500 nmol) ใช้เป็นมาตรฐานและ absorbance มีอ่านที่ 412 nm Thiol ลดเนื้อหาถูกแสดงใน nmolGSH mg−1 โปรตีน ความเข้มข้นของโปรตีนของเนื้อเยื่อ homogenatesได้โดยวิธีแบรดฟอร์ด (แบรดฟอร์ด 1976)2.9.2.2 ไธ peroxidase กิจกรรม (GPx) กิจกรรม GPx ถูก quanti-ฟองใน PB homogenates ของตับ ทดสอบนี้จะขึ้นอยู่กับการเกิดออกซิเดชันของ10 mmol ลดไธไธ peroxidase ควบคู่ไปออกซิเดชันของ NADPH mmol 4 โดยกิจกรรมเอนไซม์ในระบบ U 1 ของ GR ในการสถานะของ 0.25mmol H2O2 มีการตรวจสอบอัตราการเกิดออกซิเดชันของ NADPHโดยลดลง absorbance ที่ 365nm (Flohe & Gunzler, 1984) ผลลัพธ์ถูกแสดงใน nmol NADPH ที่ใช้ min−1 mg−1 โปรตีน2.9.2.3. ไธ reductase กิจกรรม (GR) เป็นวัดกิจกรรม GR ในตับใน PB homogenates ต่อลดลง absorbance ที่ 340nmเกิดจาก 1 mmol ออกซิไดซ์ไธในต่อหน้าของ 0.1 mmolNADPH ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (Carlberg & Mannervik, 1985) ผลลัพธ์ถูกแสดงใน nmol NADPH ที่ใช้ min−1 mg−1 โปรตีน2.9.2.4. ซูเปอร์ออกไซด์ dismutase กิจกรรม กิจกรรมสดถูกวิเคราะห์ในตับ ไต และสมอง Microliters หนึ่งร้อยของผสมอย่างเหมาะสมเพิ่ม microplate 96 ดีและ μL 150 ของ PB homogenatesโซลูชันการทำงาน (0.1 mmol hypoxanthine, 0.07 U xanthine oxidaseและ 0.6 mmol NTB ใน PB ใน 1: สัดส่วน 1:1) และการเคลื่อนไหวมีการตรวจสอบปฏิกิริยาที่ 560 nm (Winterbourn ฮอว์กินส์ ไบรอัน &Carrell, 1975) มีคำนวณพื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) และกิจกรรมสดถูกแสดงเป็นโปรตีน mg−1 U2.9.3. ศักยภาพสารต้านอนุมูลอิสระในซีรั่มซีรั่มได้รับเอทานอล: น้ำ ultrapure และ 0.75 โมล L−1metaphosphoric กรด (Leite et al., 2011) สารสกัดเหล่านี้ถูกใช้ในORAC (Davalos et al., 2004 ทราบและ al., 2003) และ FRAP (Benzie &ต้องใช้ 1996) assays ดำเนินออกตามที่อธิบายไว้ข้างต้น2.9.4 fecal pHDeionized อุจจาระตัวอย่างที่ถูกรวบรวมไว้ใน cecum และผสมกับน้ำ (mL−1 1 มิลลิกรัม) และ homogenized เป็นกลุ่ม และมีวัดpH fecal ในเครื่องวัด pH (Tecnal รุ่น TEC-5, Piracicaba, SP —ประเทศบราซิล) (Asvarujanon ไว้ และ ระ 2005)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9.2 เอนไซม์และไม่ใช่ระบบเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระภายนอก
2.9.2.1 เนื้อหากลุ่ม thiol (GSH) ระดับ GSH ได้รับการพิจารณาใน
homogenates PB ของตับไตและสมองโดยใช้สาร Ellman ของ
(DTNB) (Ellman, 1959) ด้วยการปรับเปลี่ยน วิธีการแก้ปัญหา GSH (2.5-
500 nmol GSH
mL-1) ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานและการดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านได้ที่ 412 นาโนเมตร
ลดเนื้อหา thiol ถูกแสดงใน nmol
GSH-1 มิลลิกรัมโปรตีน ความเข้มข้นของโปรตีนเนื้อเยื่อ homogenates
ทำโดยวิธีแบรดฟ (แบรด, 1976).
2.9.2.2 กลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดกิจกรรม (GPx) กิจกรรม GPx ถูก quanti-
กระแสไฟใน homogenates PB ตับ การทดสอบนี้จะขึ้นอยู่กับการเกิดออกซิเดชันของ
10
มิลลิโมลกลูตาไธโอนลดลงโดยกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดคู่กับการเกิดออกซิเดชันของ4 มิลลิโมล NADPH 1 กิจกรรม U เอนไซม์ของ GR
ในการปรากฏตัวของ0.25mmol H2O2 อัตราของการเกิดออกซิเดชัน NADPH
ถูกตรวจสอบโดยการลดลงของการดูดกลืนแสงที่365nm (Flohe และ Gunzler, 1984) ผลที่ได้สามารถแสดงออกใน NADPH nmol บริโภคนาที 1 มิลลิกรัม-1 โปรตีน. 2.9.2.3 กิจกรรม reductase กลูตาไธโอน (GR) กิจกรรม GR ในตับวัดในhomogenates PB ตามการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ 340nm เกิดจาก 1 มิลลิโมลออกซิไดซ์กลูตาไธโอนในที่ที่ 0.1 มิลลิโมลNADPH ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (Carlberg & Mannervik, 1985) ผลที่ได้สามารถแสดงออกใน NADPH nmol บริโภคนาที 1 มิลลิกรัม-1 โปรตีน. 2.9.2.4 กิจกรรม superoxide dismutase กิจกรรม SOD วิเคราะห์ในตับไตและสมอง หนึ่งร้อย microliters ของเจือจางเหมาะสมhomogenates PB ถูกเพิ่มเข้ามาใน microplate 96 หลุมและ 150 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาการทำงาน(0.1 มิลลิโมล hypoxanthine 0.07 U oxidase xanthine, และ 0.6 มิลลิโมล NTB ใน PB 1: 1: 1 สัดส่วน) และการเคลื่อนไหวปฏิกิริยาคือการตรวจสอบที่ 560 นาโนเมตร (Winterbourn ฮอว์กินไบรอันและCarrell, 1975) พื้นที่ใต้เส้นโค้ง (AUC) ที่คำนวณได้และกิจกรรมSOD ถูกแสดงเป็น U-1 มิลลิกรัมโปรตีน. 2.9.3 สารต้านอนุมูลอิสระที่อาจเกิดขึ้นในซีรั่มเซรั่มรับการรักษาด้วยเอทานอล: น้ำบริสุทธิ์และ 0.75 mol L-1 กรด metaphosphoric (. Leite et al, 2011) สารสกัดเหล่านี้ถูกนำมาใช้ในORAC (Davalos et al, 2004;.. ก่อน, et al, 2003) และ FRAP (Benzie และสายพันธุ์, 1996) การตรวจดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้น. 2.9.4 ค่า pH อุจจาระอุจจาระตัวอย่างถูกเก็บไว้ในลำไส้ใหญ่ส่วนต้นและเจือจางด้วยปราศจากไอออนน้ำ(1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) และปั่นและมันก็วัดค่า pH อุจจาระเมตรค่า pH (Tecnal รูปแบบ TEC-5, Piracicaba, SP - บราซิล) (Asvarujanon, Ishizuka และ Hara, 2005)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9.2 . เอนไซม์และเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในระบบที่ไม่ใช่
2.9.2.1 . ขนาดกลุ่มเนื้อหา ( GSH ) GSH มีระดับน้ำใน homogenates
PB ของ ตับ ไต สมอง ใช้เ ล์แมนเป็นรีเอเจนต์
( dtnb ) ( เอลเมิ่น 1959 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน กลุ่มโซลูชั่น ( 2.5 –
500 nmol GSH ml − 1
) มาใช้เป็นมาตรฐานและค่าถูก
อ่านที่ 412 นาโนเมตร ลดปริมาณ thiol แสดงออกใน
?10 − 1 มิลลิกรัมโปรตีน ระดับโปรตีนของเนื้อเยื่อ homogenates
โดย Bradford วิธี Bradford , 1976 )
2.9.2.2 . กิจกรรมของเอนไซม์กลูตาไธโอน ( GPX ) กิจกรรม GPX คือการไฟฟ้า -
fied ใน PB homogenates ตับ วิธีนี้จะขึ้นอยู่กับการเกิดออกซิเดชันของ
10 mmol โดยลดลงกลูตาไธโอนกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดสควบคู่กับ
ออกซิเดชัน 4 mmol nadph 1 u เอนไซม์ของ GR ใน
การปรากฏตัวของ 0.25mmol H2O2 . อัตราการออกซิเดชันของ nadph
โดยลดการดูดกลืนแสงที่ 365nm ( flohe & gunzler , 1984 ) ผลลัพธ์
มีความ nadph บริโภคซึ่งมิน− 1 ต่อมิลลิกรัมโปรตีน− 1 .
2.9.2.3 . กิจกรรมของเอนไซม์กลูตาไธโอน ( GR ) ทุกกิจกรรมในตับได้
homogenates ตะกั่วต่อไปนี้ลดการดูดกลืนแสงที่ 340nm
1 มิลลิโมลและออกซิไดซ์กลูตาไธโอนในตัวตนของ 0.1 มิลลิโมล
nadph ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( คาร์ลเบิร์ก& mannervik , 1985 ) ผลลัพธ์
มีความ nadph บริโภคซึ่งมิน− 1 ต่อมิลลิกรัมโปรตีน− 1 .
2.9.2.4 . กิจกรรม Superoxide Dismutase . กิจกรรมสดได้วิเคราะห์
ตับ ไต และ สมอง หนึ่งร้อยตัวเลขของเจือจาง
อย่างเหมาะสมPB homogenates เพิ่มในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย และ 96 ดี 150 μ l
แก้ปัญหาการทำงาน ( 0.1 มิลลิโมลของเอนไซม์ไฮโปแซนทีน , 0.07 U
, 0.6 มิลลิโมล ntb ตะกั่วในสัดส่วน 1 : 1 : 1 ) และปฏิกิริยาจลน์
ถูกตรวจสอบที่ 560 nm ( winterbourn Hawkins , ไบรอัน &
คาร์เรล , 1975 ) พื้นที่ใต้เส้นโค้ง ( ยา ) คือค่า
สดกิจกรรม แสดงเป็นคุณ− 1 มิลลิกรัมโปรตีน .
2.9.3 .สารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในซีรั่มเซรั่มรักษา
ด้วยเอทานอล : น้ำบริสุทธิ์มากและ 0.75 โมล L − 1
เมตทาฟอสฟอริกแอซิด ( leite et al . , 2011 ) สารสกัดเหล่านี้ถูกใช้ใน
ORAC ( davalos et al . , 2004 ; ก่อนที่ et al . , 2003 ) และ VDO ( benzie &
สายพันธุ์ , 1996 ) หรือ ดําเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้น .
2.9.4 . คัลพีเอช
อุจจาระตัวอย่างในลำไส้ใหญ่ส่วนต้น และเจือจางด้วยน้ำ ( 1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร คล้ายเนื้อเยื่อประสาน

− 1